Original title:
Příprava thioredoxinu a thioredoxin-vazebné domény proteinkinasy ASK1 pro strukturní studie
Translated title:
Preparation of thioredoxin and thioredoxin-binding domain of protein kinase ASK1 for structural studies
Authors:
Jarosilová, Kateřina ; Obšil, Tomáš (advisor) ; Kalábová, Dana (referee) Document type: Bachelor's theses
Year:
2015
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Všechny živé organismy jsou v průběhu života vystaveny rozličným formám stresu. Možná právě proto se vyvinul evolučně velmi dobře konzervovaný systém MAPK (z anglického mitogen-activated protein kinase) signálních kaskád regulující buněčnou odpověď na stres. Tyto signální dráhy se skládají ze tří následujících tříd proteinkinas MAP3K, MAP2K a MAPK. Z MAPK je poté signál přenášen na další proteinkinasy nebo transkripční faktory. Proteinkinasa ASK1 (z anglického apoptosis signal-regulating kinase 1) je členem MAPK dráhy, konkrétně se řadí do třídy MAP3K, tedy mitogeny aktivovaná proteinkinasa kinasa kinasa. Lidská ASK1 je protein složený z 1374 aminokyselin uspořádaných do několika domén a sekvenčních motivů. Třemi hlavními doménami jsou N-terminální coil-coiled doména (NCC), serin/threoninová kinasová doména a C-terminální coil-coiled doména (CCC). Dále bylo v sekvenci charakterizováno několik míst, která jsou zodpovědná za interakci ASK1 s jejími vazebnými partnery. Aktivita ASK1 je totiž regulována různými faktory, mezi něž patří inhibitory thioredoxin a 14-3-3 proteiny. Naopak faktory TRAF (z anglického TNF receptor associated factor) proteinkinasu aktivují. Cílem této práce byla příprava šesti variant expresních konstruktů N-terminálního úseku sekvence lidské ASK1, který by měl být zodpovědný za...All living organisms are exposed to various forms of stress during their lifetime. This is probably the reason why an evolutionally well conserved the mitogen-activated protein kinase (MAPK) system of signaling cascades was formed to regulate cellular stress response. Those signaling pathways consist of three consecutive classes of protein kinases: MAP3K, MAP2K and MAPK. The signal is then transmitted from MAPK to another protein kinases and transcription factors. Apoptosis signal-regulating kinase 1 (ASK1) is a member of MAPK pathway, more specifically is classified as a member of the mitogen-activated protein kinase kinase kinase family (MAP3K). Human ASK1 consists of 1374 amino acids which are folded into several domains and sequence motives. The N-terminal coil-coiled domain (NCC), the serine/threonine kinase domain and the C-terminal coil-coiled domain (CCC) are three main domains. In addition, several regions responsible for the interaction between ASK1 and their binding partners have also been identified. The activity of ASK1 is regulated by various factors including thioredoxin and the 14-3-3 proteins, which function as inhibitors, and TNF receptor associated factors (TRAFs), which function as activators. The aim of this study was the preparation of six different expression constructs of...
Keywords:
ASK1; protein kinase; Thioredoxin; ASK1; proteinkinasa; Thioredoxin
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/61880