Název: Charakterizace strukturně-funkčních domén v plasmatické membráně kvasinek
Překlad názvu: Structural and functional characterization of yeast plasma membrane domains
Autoři: Strádalová, Vendula ; Malínský, Jan (vedoucí práce) ; Palková, Zdena (oponent) ; Konopásek, Ivo (oponent)
Typ dokumentu: Disertační práce
Rok: 2012
Jazyk: eng
Abstrakt: [eng] [cze]
Plasma membrane (PM) of living cells hosts variety of important cellular functions that must be precisely coordinated in space and time. Recent research shows that the plasma membrane is organized into specific domains to accomplish all these tasks. Our laboratory is focused on the organization of the plasma membrane in Saccharomyces cerevisiae where several distinct lateral compartments were identified at the fluorescence microscopy level. One of them is the Membrane Compartment occupied by arginine transporter Can1 (MCC) which consists of isolated, highly stable, ergosterol enriched, 300nm patches containing specific proton symporters and proteins of unknown function (Sur7- and Nce102-like). These membrane domains are organized by cytosolic protein complexes called eisosomes, composed mainly of proteins Pil1 and Lsp1. This work is a continuation of studies that tried to elucidate the composition, structure and function of MCC. In the first section of this work we concentrated on ultrastructural characterization of MCC domains. Foremost, we developed a protocol preserving the plasma membrane ultrastructure. The comparison of cryofixed and chemically crosslinked cells clearly showed that cryofixation by high pressure freezing together with freeze substitution and low temperature resin embedding... Plazmatická membrána (PM) všech buněk hostí celou řadu důležitých buněčných funkcí. Tyto funkce musí být pečlivě koordinovány, a jak současný výzkum ukazuje, plazmatická membrána je za tímto účelem uspořádána do specializovaných domén. Naše laboratoř se zabývá výzkumem způsobu organizace plazmatické membrány u kvasinky pivní, kde bylo za použití fluorescenční mikroskopie popsáno několik nepřekrývajících se domén. Jednou takovou doménou je MCC (Membrane Compartment occupied by transporter Can1), která je tvořena stabilními izolovanými oblastmi PM o velikosti asi 300 nm. MCC domény obsahují několik přenašečů a proteinů o neznámé funkci (proteiny příbuzné Sur7 a Nce102) a jejich formování je organizováno z cytosolu proteinovými komplexy zvanými eisosomy, jež jsou tvořeny především proteiny Pil1 a Lsp1. Tato práce navazuje na studie, které měly za cíl objasnit složení, strukturu a funkci MCC. V první části práce jsme se zaměřili na ultrastrukturální analýzu MCC, přičemž jsme nejdříve vyvinuli protokol pro transmisní elektronovou mikroskopii (TEM), který dobře zachovává strukturu PM. Zjistili jsme, že mrazová fixace pomocí vysokotlakého zamražení, kombinovaná s mrazovou substitucí a zalitím vzorku do pryskyřice za nízké teploty, vede k výrazně lepšímu zachování buněčné struktury a vyššímu signálu při...

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/45562

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-309852


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Disertační práce