Název:
Model experimentálně regulovatelné exprese dipeptidylpeptidasy IV v gliomových buněčných liniích
Překlad názvu:
Model of experimentally regulated expression of dipeptidylpeptidase IV in glioma cell lines
Autoři:
Trylčová, Jana Typ dokumentu: Rigorózní práce
Rok:
2012
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Model experimentálně regulovatelné exprese dipeptidylpeptidasy IV v gliomových buněčných liniích Abstrakt "Dipeptidylpeptidase IV aktivitou a/nebo strukturou homologní" (DASH) molekuly představují nově definovanou skupinu multifunkčních molekul, z nichž většina nese hydrolytickou aktivitu podobnou dipeptidylpeptidase IV (DPPIV, EC 3.4.14.5, identická s diferenciačním antigenem lymfocytů CD26), která odštěpuje X-Pro dipeptidy od N-konce peptidů a bílkovin. Dosavadní poznatky svědčí o významu těchto molekul v procesech vzniku a rozvoje řady nádorových onemocnění. Cílem práce je (i) přehled problematiky DASH molekul a jejich funkčních substrátů v nádorech odvozených z neuroektodermu a (ii) příprava stabilně transfekovaných lidských glioblastomových buněčných linií s indukovatelnou expresí DPPIV. Pro tuto práci byly připraveny originální vektory s lidským genem DPPIV a s její v aktivním centru mutovanou formou pro posouzení významu vlastní enzymové aktivity výsledného produktu. Transgenní buněčné linie umožní studovat biologické úlohy DPPIV v procesech vzniku a rozvoje nádorů odvozených z neuroektodermu - v buněčném růstu, invazi a migraci na úrovni vlastní transformované buňky v modelu in vitro a v komplexním systému in vivo po homotopní implantaci do imunodeficientní myši. Vzniklé buněčné linie budou tedy...Model of experimentally regulated expression of dipeptidyl peptidase IV in glioma cell lines Abstract "Dipeptidyl peptidase IV Activity and/or Structure Homologues" (DASH) represent a newly defined group of multifunctional molecules, typically bearing dipeptidyl peptidase IV- like hydrolytic activity. Dipeptidyl peptidase IV (DPPIV, EC 3.4.14.5, identical to CD26) cleaves out X-Pro dipeptides from the N-terminus of peptides. Recent knowledge shows substantial role of DASH in cancer pathogenesis. Here we present (i) an overview of the issue of DASH molecules and their functional substrates in the neuroectodermal tumor and (ii) a preparation of stable transfected human glioblastoma cell lines with inducible gene expression of DPPIV. Vectors containing human DPPIV gene and its mutated form in the catalytic active site have been prepared to assess the importance of the enzymatic activity of the final product. This will enable us to study the biological role of DPPIV in genesis and progression of neuroectodermal tumors - cells growth, invasion and migration of transformed glial cells in vitro. Moreover, complex role of DPPIV will be studied using a model of homotopic application of transfected cells into the brain of immunodeficient mice. Prepared cell lines provide more consistent information about DPPIV from...