Original title: Syntéza a charakterizace AibB8LysB28ProB29-insulinu za účelem studia významu T a R konformací insulinu
Translated title: Synthesis and characterization of AibB8LysB28ProB29-insulin to study T a R conformations of insulin
Authors: Kosinová, Lucie ; Stiborová, Marie (advisor) ; Flegel, Martin (referee)
Document type: Bachelor's theses
Year: 2011
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Souhrn Ve své bakalářské práci jsem celkovou chemickou syntézou připravila nový analog insulinu - AibB8LysB28ProB29-insulin. Tento analog byl připraven za účelem objasnění významu T a R konformací insulinu a jejich úlohy při interakci insulinu s receptorem. Aminokyselina Aib byla v pozici B8 použita z důvodu její schopnosti silně indukovat šroubovicové struktury v peptidových řetězcích. Prolin a lysin v pozicích B28 a B29 byly zaměněny z důvodu snížení schopnosti analogu vytvářet dimery a hexamery. Metodou syntézy na pevné fázi byl připraven insulinový řetězec A a modifikovaný insulinový řetězec AibB8LysB28ProB29-B. Surové A a B řetězce byly po štěpení nejprve převedeny na S- sulfonáty, poté odsoleny gelovou chromatografií a následně purifikovány a izolovány pomocí preparativního provedení RP-HPLC. Řetězce byly spojeny rekombinační reakcí za vzniku nového insulinového analogu AibB8LysB28ProB29-insulinu. Tento nový analog byl opět přečištěn nejprve gelovou chromatografií a poté pomocí RP-HPLC. Oba řetězce i výsledný analog byly charakterizovány pomocí analytického provedení RP-HPLC a hmotnostní spektrometrií. Nakonec byla stanovena vazebná afinita AibB8LysB28ProB29-insulinu k insulinovému receptoru. Hodnota jeho disociační konstanty ve srovnání s hodnotou disociační konstanty lidského insulinu vypovídá o... According to the International Diabetes Federation, there were 285 million people in the age from 20 to 79 years suffering from diabetes on the planet in 2010. This means diabetes has become a global epidemic so the importace of insulin research is still growing. Insulin is a protein hormone that plays a key role in regulating blood glucose level which has a widespread impact on the whole metabolism. Insulin acts through binding of its monomeric form to the insulin receptor. At present, however, the active monomeric structure of insulin is still unknown. It is clear that insulin monomer must undergo structural changes upon binding to the insulin receptor as the residues crucial for the interaction are burried within the native form. According to studies of highly active hormon analogs there is an ample evidence that the C-terminal part of the B-chain is a dynamic element in insulin activation and receptor binding. Probably, there is also great importance of the B-chain N- terminus and the transition between T and R conformation. However, the exact significance of the T and R states of insulin remains unclear. In this work, a new insulin analog AibB8LysB28ProB29-insulin was prepared for the purpose of studying significance of the T and R conformations of insulin and their relationship to the active...
Keywords: analog; binding afinity; insulin; R conformation; synthesis; T conformation; analog; insulin; R konformace; syntéza; T konformace; vazebná afinita

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/38675

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-302928


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Bachelor's theses