|
|
The characterisation of sperm and seminal plasma glycoproteins: Their role within the tetraspanin network and male fertility
Páleníková, Veronika
1 ů spermií a semenné plazmy: Jejich role v tetraspaninových sítích a samčí fertilitě Mgr. Veronika Páleníková Membrány spermie jsou vysoce organizované struktury, ve kterých jsou zahrnuty tetraspaniny tvořící tetraspaninové sítě, které také zahrnují transmembránové glykoproteiny nazvané integriny. Tetraspaninové sítě byly popsány u savčích oocytů, kde se podílí na interakci molekul přítomných nejen na vajíčku, ale také na spermii. Přítomnost některých integrinů byla také detekována ve spermiích, ale jejich přesná lokalizace nebo interakce s jinými integriny a tetraspaniny je diskutabilní. Naším cílem p lokalizaci a heterodimerizaci integrinů α3, α6, αV, β1 a β4 ve spermiích, ale také určit jejich možnou interakci s tetraspaniny, zejména s molekulou CD151. Hlavním výstupem této disertační práce je podrobná charakterizace výše uvedených integrinů. Detekovali jsme přítomnost podjednotky integrinu β4 v myší spermii a charakterizovali, že tvoří funkční heterodimer s podjednotkou α6. Kromě toho jsme popsali páry integrinů α6β1 a α3β1, které přispívají k integritě a komplexnosti membrán spermie. Navíc jsme zjistili, že podjednotka α6 integrinu interaguje s CD151 tetraspaninem, který jsme poprvé detekovali ve spermiích savců. Také jsme navrhli CD9 a CD81 jako tetraspaninové partnery pro αV integrin v...
|
|
|
The characterisation of sperm and seminal plasma glycoproteins: Their role within the tetraspanin network and male fertility
Páleníková, Veronika ; Postlerová, Pavla (vedoucí práce) ; Ryšlavá, Helena (oponent) ; Pěknicová, Jana (oponent)
1 ů spermií a semenné plazmy: Jejich role v tetraspaninových sítích a samčí fertilitě Mgr. Veronika Páleníková Membrány spermie jsou vysoce organizované struktury, ve kterých jsou zahrnuty tetraspaniny tvořící tetraspaninové sítě, které také zahrnují transmembránové glykoproteiny nazvané integriny. Tetraspaninové sítě byly popsány u savčích oocytů, kde se podílí na interakci molekul přítomných nejen na vajíčku, ale také na spermii. Přítomnost některých integrinů byla také detekována ve spermiích, ale jejich přesná lokalizace nebo interakce s jinými integriny a tetraspaniny je diskutabilní. Naším cílem p lokalizaci a heterodimerizaci integrinů α3, α6, αV, β1 a β4 ve spermiích, ale také určit jejich možnou interakci s tetraspaniny, zejména s molekulou CD151. Hlavním výstupem této disertační práce je podrobná charakterizace výše uvedených integrinů. Detekovali jsme přítomnost podjednotky integrinu β4 v myší spermii a charakterizovali, že tvoří funkční heterodimer s podjednotkou α6. Kromě toho jsme popsali páry integrinů α6β1 a α3β1, které přispívají k integritě a komplexnosti membrán spermie. Navíc jsme zjistili, že podjednotka α6 integrinu interaguje s CD151 tetraspaninem, který jsme poprvé detekovali ve spermiích savců. Také jsme navrhli CD9 a CD81 jako tetraspaninové partnery pro αV integrin v...
|
|
|
Monitoring of protein network dynamics: the role of FcRL proteins during sperm-egg membrane interaction
Bašus, Kryštof ; Komrsková, Kateřina (vedoucí práce) ; Šušor, Andrej (oponent)
Vzájemná interakce a fúze membrán spermie a vajíčka je zprostředkována různými molekulami, které se nacházejí na membáně spermie i vajíčka a tvoří proteinové sítě. U mnoha kandidátních proteinů byla předpokládána jejich účast při fúzi membrán gamet, některé z těchto proteinů (Izumo1, CD9, Juno) se ukázaly býti nezbytnými, zatímco u jiných byla objevena zcela jiná role (CD46, tetraspaniny). U myši se po vazbě spermie na vajíčko váže protein Juno na povrchu vajíčka na monomerní protein Izumo1 na povrchu spermie, následuje dimerizace Izumo1 a rychlé vyvázání proteinu Juno z povrchu vajíčka, jak bylo popsáno u myši. Tato skutečnost naznačuje, že pro zajištění fúze membrán musí být na vajíčku exprimován další, zatím nespecifikovaný receptor. Abychom nalezli hlavní lidský fúzogenní receptor pro IZUMO1, využili jsme metodu náhodného screeningu, jedna kulička - jedna sloučenina" (one--bead one compoud, OBOC). Byla vybrána kulička interagující s lidskými spermiemi za splnění všech kritérií a tato kulička nesla navázanou peptidovou sekvenci homologní s Ig doménou ...
|
|
|
Monitoring of protein network dynamics: the role of FcRL proteins during sperm-egg membrane interaction
Bašus, Kryštof ; Komrsková, Kateřina (vedoucí práce) ; Šušor, Andrej (oponent)
Vzájemná interakce a fúze membrán spermie a vajíčka je zprostředkována různými molekulami, které se nacházejí na membáně spermie i vajíčka a tvoří proteinové sítě. U mnoha kandidátních proteinů byla předpokládána jejich účast při fúzi membrán gamet, některé z těchto proteinů (Izumo1, CD9, Juno) se ukázaly býti nezbytnými, zatímco u jiných byla objevena zcela jiná role (CD46, tetraspaniny). U myši se po vazbě spermie na vajíčko váže protein Juno na povrchu vajíčka na monomerní protein Izumo1 na povrchu spermie, následuje dimerizace Izumo1 a rychlé vyvázání proteinu Juno z povrchu vajíčka, jak bylo popsáno u myši. Tato skutečnost naznačuje, že pro zajištění fúze membrán musí být na vajíčku exprimován další, zatím nespecifikovaný receptor. Abychom nalezli hlavní lidský fúzogenní receptor pro IZUMO1, využili jsme metodu náhodného screeningu, jedna kulička - jedna sloučenina" (one--bead one compoud, OBOC). Byla vybrána kulička interagující s lidskými spermiemi za splnění všech kritérií a tato kulička nesla navázanou peptidovou sekvenci homologní s Ig doménou ...
|
|
|
The Molecular mechanisms of sperm-egg fusion in mouse
Klinovská, Karolína ; Hortová, Kateřina (vedoucí práce) ; Jonáková, Věra (oponent)
Molekulární mechanismus fúze gamet zůstává i přes svoji klíčovou roli v oplození z velké části neobjasněn. Bylo popsáno několik molekul, mezi nimi spermatický protein IZUMO1 a tetraspanin CD9 na vajíčku, které jsou nutné pro průběh interakce a fúze gamet u myši. Ze známých dat se v posledních letech formuje koncept velkého multiproteinového komplexu na obou membránách, společně tvořících fúzní aparát. Předpokládá se, že tetraspanin CD9 hraje roli v organizaci a udržování membránových struktur díky laterálním interakcím s ostatními membránovými proteiny. Naproti tomu se očekává, že IZUMO1, obsahující imunoglobulinovou doménu (Ig), má na povrchu vajíčka svůj vazebný receptor. Ig doména je známá pro své interakce s jinými protein, mezi nimi především Fc receptory, které by tak mohly představovat potenciální vazebné proteiny na povrchu vajíčka. Nedávné experimenty identifikovaly molekulu Fc receptor-like 3 (FCRL-3) jako kandidátní vazebný faktor vajíčka pomocí metody one-bead one-compound. Cílem této práce bylo určit lokalizaci FCRL3 na myších vajíčcích a případnou kolokalizaci s proteinem IZUMO1 na komplexu vajíčka s navázanými spermiemi, nutnou pro jejich možnou interakci. Pomocí fluorescenčního značení byl FCRL-3 identifikován jak v cytoplazmě, tak na povrchu plazmatické membrány vajíčka. Příromnost...
|
host ::
RSS.