|
|
Fotochemická internalizace saporinu ftalocyaninovými fotosensitizéry
Vlková, Kateřina ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Kozlíková, Magdaléna (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Student: Bc. Kateřina Vlková Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultant: Mgr. Monika Rohlíčková Název diplomové práce: Fotochemická internalizace saporinu ftalocyaninovými fotosensitizéry Aplikace terapeutických makromolekul je často ovlivněna omezeným vstupem těchto látek do buněk a jejich následnou lyzosomální degradací, čímž nedosáhnou svých intracelulárních cílů. Jejich buněčný příjem lze zvýšit prostřednictvím fotochemické internalizace. Fotochemická internalizace využívá fotosenzitivní látky, které se lokalizují v membránách endosomů a vyvolají uvolnění účinných látek po expozici světlu. Diplomová práce, metodou fotochemické internalizace, zkoumá vliv cíleného toxinu saporinu a vybraných nesymetrických fotosensitizérů na buněčné linii HeLa. Hodnotí účinek různých koncentrací těchto látek na životaschopnost nádorových buněk. Dále se zabývá porovnáváním dvou přístupů dodání světelné energie, a to před a po podání saporinu - tzv. "light-before" a "light-after" přístup. Z našich dat je patrné, že samostatně podaný saporin příliš nesnižuje životaschopnost testované linie, přestože byl aplikován v poměrně vysoké koncentraci. Snahou bylo vytvořit účinnou kombinaci koncentrací PS a saporinu. Nicméně z...
|
|
|
Cell senescence in aging, cell stress and chemoresistance
Andrašková, Tereza ; Vokřál, Ivan (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Študentka: Tereza Andrašková Školiteľ: Prof. Dr. Alexandra K. Kiemer a PharmDr. Ivan Vokřál, PhD. Názov diplomovej práce: Bunková senescencia v starnutí, bunkový stres a chemorezistencia Proces biologického starnutia je spojený so stratou funkcie tkanív, ktorá vedie k mnohým patologickým stavom, vrátane kardiovaskulárnych chorôb a rakoviny. Bunková senescencia, jav charakterizovaný trvalým zastavením bunkového cyklu vyvolaným endogénnym alebo exogénnym stresom, hrá významnú úlohu vo vývoji metabolických ochorení súvisiacich s rastúcim vekom. Senescentné endotelové bunky boli objavené v aterosklerotickom pláte a kvôli faktorom vyvolávajúcim zápal sa podieľajú na jeho vývoji. Napriek tomu, spustením antiproliferatívnej reakcie, môže mať senescencia tiež potenciál ako prostriedok na potlačenie rakoviny. Cieľom tejto práce bolo vyvinutie metódy stanovujúcej bunkovú senescenciu v rozličných bunkových typoch a následne analyzovať zlúčeniny s potenciálom inhibovať starnutie vyvolané H2O2, ako aj faktory, ktoré môžu byť vďaka tomuto javu pozmenené. Test aktivity β-galaktozidázy spojenej so senescenciou (SA-β-gal) v primárnych ľudských endotelových bunkách odhalil schopnosť statínov a kurkumínu inhibovať bunkové...
|
|
|
Characterization of different differentiation protocols of H9c2 cardiomyoblasts
Gardianová, Anna ; Jirkovský, Eduard (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Anna Gardianová Školiteľ: PharmDr. Eduard Jirkovský, Ph.D. Názov diplomovej práce: Charakterizácia rôznych diferenciačných protokolov H9c2 kardiomyoblastov Bunková diferenciácia je bežný proces vo vývoji mnohobunkového organizmu, kedy dochádza k zmene bunkového vzhľadu a funkcie. Proces diferenciácie zohráva významnú úlohu aj pri oprave poškodených tkanív. Niektoré chemické látky môžu negatívne ovplyvniť tieto procesy, a tým ovplyvniť i ľudské zdravie. V tejto práci sme sa zamerali na charakterizáciu procesu diferenciácie bunkovej línie H9c2 použitím rôznych publikovaných diferenciačných protokolov, a popísali v čase zmeny v morfológii (výskyt viacjadrových a predĺžených buniek) a expresii mRNA vybraných markerov typických pre fenotyp srdcového (cTnT, Hand2, GATA4) alebo kostrového (myogenín) svalu. Proces diferenciácie sme sledovali po dobu 15 dní a jednotlivé protokoly sa líšili prídavkom fetálneho hovädzieho séra (FBS, 1 % alebo 10 %) a all-trans-retinovej kyseliny (ATRA, 10 nmol/L) do kultivačného média Dulbecco's Modified Eagle's Medium. Z pozorovaných výsledkov môžeme povedať, že všetky použité protokoly viedli k diferenciácii buniek, ktorá sa ale kvantitatívne i kvalitatívne menila a...
|
|
|
Monitoring the antioxidant activity of newly synthesized potential acetylcholinesterase modulators
Keratová, Žaneta ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Kobrlová, Tereza (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Žaneta Keratová Vedoucí diplomové práce: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultant: RNDr. Ľubica Múčková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Sledovanie antioxidačnej aktivity novo syntetizovaných potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy Teoretická časť diplomovej práce je zameraná na charakteristiku oxidačného stresu (OS) a antioxidačnej ochrany organizmu. V ďalšej časti sú podrobne spracované jednotlivé neurodegeneratívne ochorenia a význam OS pri ich rozvoji. V experimentálnej časti predkladanej práce bola hodnotená cytotoxicita 16 nových potenciálnych modulátorov acetylcholinesterasy pomocou neuroblastómovej bunkovej línie SH-SY5Y. Cytotoxicita látok, vyjadrená ako IC50, bola meraná pomocou kolorimetrickej metódy, ktorá využíva tetrazóliovú soľ (MTT). Táto metóda bola využitá aj k stanoveniu maximálnej tolerovateľnej koncentrácie (MTC). Hodnoty MTC boli následne overené pomocou sledovania apoptoticko-nekrotického profilu buniek vo fyziologickom prostredí (bez OS) a v prostredí OS, ktoré bolo indukované peroxidom vodíka (H2O2) pomocou mikrokapilárnej prietokovej cytometrie. Z výsledkov bolo patrné, že látky nevyvolali žiadnu štatisticky významnú zmenu distribúcie buniek v jednotlivých populáciách....
|
|
|
Study of migration of cells affected by sulfur mustard
Mojská, Mária ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Mária Mojská Školiteľ: RNDr. Miloslav Macháček, PhD. Konzultant: Mgr. Petr Jošt, PhD. Názov diplomovej práce: Štúdium migrácie buniek ovplyvnených sírnym yperitom Sírny yperit je vysoko toxická chemická látka. Z pohľadu toxikológie ju radíme medzi pľuzgierotvorné chemické látky a jej použitie je zakázané medzinárodným "Dohovorom o zákaze vývoja, výroby, hromadenia a použitia chemických zbraní a o ich zničení". Aj napriek tomu bola však táto látka v minulosti zneužitá v niekoľkých ozbrojených konfliktoch a teroristických útokoch. Pri kontakte s ľudskou kožou dochádza k tvorbe typických pľuzgierov naplnených nažltlým exsudátom. Sírny yperit má cytotoxické a cytostatické účinky na živé tkanivo, a preto je liečba takýchto lézií mimoriadne obťažná. Táto práca sa zaoberá hodnotením hypotézy, či môžu rastové faktory IGF, KGF a EGF prispieť k rýchlejšej regenerácii tkaniva zasiahnutým yperitom. Metódou "scratch wound healing assay" bol hodnotený vplyv uvedených rastových faktorov na kolektívnu migráciu buniek keratinocytov HaCaT a kožných fibroblastov HDFa v podmienkach in vitro. Naše výsledky ukazujú, že toxické účinky sírneho yperitu natoľko inhibujú migráciu buniek, že sa pozitívny vplyv testovaných rastových...
|
|
|
Isocitrate dehydrogenase 2 inhibitor enasidenib synergizes daunorubicin cytotoxicity by targeting aldo-keto reductase 1C3.
Haddad, Andro ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Andro Haddad Supervisor: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Consultant: Anselm Morell García, Ph.D. Title of diploma thesis: ISOCITRATE DEHYDROGENASE 2 INHIBITOR ENASIDENIB SYNERGIZES DAUNORUBICIN CYTOTOXICITY BY TARGETING ALDO-KETO REDUCTASE 1C3 Treatment with anthracyclines is crucial in treating several oncologic disorders. However, several molecular mechanisms hinder the effectivity of anthracyclines, which is a significant obstacle in cancer therapy. Carbonyl reducing enzymes (CREs), a type of NAD(P)H-dependent oxidoreductase, contribute to anthracycline resistance by reducing these drugs to fewer active alcohols. These enzymes also play a role in the proliferation and differentiation of cancer cells, leading to increased tumour aggressiveness. Therefore, targeting these enzymes is essential for effective anticancer therapy. This study aimed to uncover the potential off-targets of the isocitrate dehydrogenase (IDH) inhibitor enasidenib (ENA) that could counteract the resistance to anthracycline, specifically in relation to the detoxification role of CREs. For this, we screened the ability of ENA to inhibit different recombinant CREs that can reduce daunorubicin (Daun) to daunorubicinol...
|
|
|
Protinádorový a imunomodulační efekt polymerních konjugátů na bázi HPMA nesoucích gemcitabin
Klusová, Natálie ; Beránek, Martin (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Natálie Klusová Školitel: prof. PharmDr. Martin Beránek, Ph.D. Konzultant: RNDr. Milada Šírová, Ph.D. (MBÚ AV ČR, v.v.i.) Název diplomové práce: Protinádorový a imunomodulační efekt polymerních konjugátů na bázi HPMA nesoucích gemcitabin Diplomová práce se zaměřila na zkoumání protinádorového a imunomodulačního účinku polymerních konjugátů na bázi HPMA s navázaným gemcitabinem (Gem). Zkoumány byly čtyři polymerní konjugáty (P-Gem1-P-Gem4), jejichž molární hmotnost a obsah léčiva byly podobné a lišily se použitými spojkami pro vazbu Gem na nosič. Využity byly spojky: β- Alanin (P-Gem1); glycyl-fenylalanyl-leucyl-glycyl (P-Gem2); kyselina aminokapronová (P- Gem3); kyselina valerová (P-Gem4). Na základě stanovených hodnot IC50 na nádorových liniích 4T1, LL2, Panc02, MiaPaca2 a Panc1 byly vzorky rozděleny do dvou skupin: a) vzorky s rychlým uvolňováním léčiva (P-Gem1, P-Gem2); b) vzorky s pomalým uvolňováním léčiva (P-Gem3, P-Gem4). Stabilita konjugátu in vivo ovlivňuje systémovou toxicitu a protinádorovou aktivitu, což prokázal experiment na BALB/c myších s modelem myšího mammárního karcinomu (4T1), kdy byla již po jedné intravenózní aplikaci pozorována významná protinádorová aktivita vzorků P-Gem3 a...
|
|
|
Peripherally substituted subphthalocyanines for photodynamic therapy with benzocrown or tyrosine methyl ester as axial ligands
Hlbočanová, Ingrid ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Ingrid Hlbočanová Školiteľ: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Názov diplomovej práce: Periférne substituované subftalocyaníny pre fotodynamickú terapiu s axiálne viazaným benzocrownom alebo metylesterom tyrozínu Nádorové ochorenia sa pomaly, ale s istotou stávajú najrozšírenejším ochorením na svete. Malígne stavy postihujú široké spektrum ľudí, ktorí predispozíciu k ochoreniu zdedili geneticky, prípadne boli alebo sú ovplyvnení faktormi vonkajšieho prostredia. Nákladná terapia však predstavuje problém nielen vo vyspelých krajinách, ale hlavne v krajinách tretieho sveta. Financie a dostupnosť predstavujú len časť z problému. Základom je hlavne včasná diagnostika, prevencia pred vznikom tohto typu ochorenia a efektívna terapia. Vzhľadom na vysokú rozšírenosť a úmrtnosť spojenú s malígnymi ochoreniami, ktoré každoročne stúpajú, sa venuje veľké úsilie predchádzaniu týchto ochorení a správnou a včasnou diagnostikou spojenou so zdravým životným štýlom. Veľká pozornosť sa venuje taktiež aj výskumu a vývoju nových a účinných protinádorových liečiv a terapeutických postupov. Jednou z takýchto moderných a sľubných metód je fotodynamická terapia (PDT). Jedná sa o selektívnu, minimálne invazívnu klinicky schválenú...
|
|
| |
|
|
Studium účinnosti originálních amfifilních (aza)ftalocyaninů nesoucí trvalý kladný náboj
Rohlíčková, Monika ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Pejchal, Jaroslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Monika Steklá Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Název diplomové práce: Studium účinnosti originálních amfifilních (aza)ftalocyaninů nesoucí trvalý kladný náboj Nádorová onemocnění jsou v dnešní době jednou z nejčastějších příčin úmrtí ve vyspělých státech. Proto je věnována velká pozornost vývoji nových způsobů léčby těchto chorob. Jednou z takovýchto moderních metod je i fotodynamická terapie. Jedná se o vysoce selektivní, minimálně invazivní metodu s minimem nežádoucích účinků. Principem tohoto způsobu terapie je podání samostatně neaktivní látky takzvaného fotosensitizéru a jeho následné ozáření světlem s vhodnou vlnovou délkou v přítomnosti kyslíku. Fotodynamická terapie tedy potřebuje tři základní komponenty: fotosensitizér, světlo a kyslík. Všechny tyto tři látky jsou pro tělo samostatně netoxické, jejich společný výskyt však vede ke vzniku fotochemické reakce, při které vznikají velmi reaktivní formy kyslíku, především pak singletový kyslík. Tyto reaktivní molekuly následně poškozují cílové buňky, což vede k jejich zániku. Jak už bylo řečeno, důležitou složkou PDT je fotosensitizér, což je látka schopná absorbovat záření určité vlnové délky a přeměnit ho na užitečnou energii. V dnešní...
|
host ::
RSS.