|
|
Phytochemical Research of Adhatoda vasica III.
Dundelová, Lenka ; Jahodář, Luděk (advisor) ; Opletal, Lubomír (referee)
SOUHRN Úkolem této rigorózní práce bylo získat zpracovatelné množství krystalů L3, určené jako 3S,7- dihydroxyvasicinolon, z meziproduktů získaných v průběhu jeho izolace v rámci diplomové práce (29), posoudit jeho stabilitu, popřípadě popsat jeho degradační produkty. Zhodnocením získaných vzorků bylo dosaženo těchto výsledků. 1. V matečných louzích L3 (3S,7-dihydroxyvasicinolon) byly detekovány látky, chovající se jako alkaloidy, žádná však nevykazovala shodné chování s L3. Je pravděpodobné, že se jedná o jeho degradační produkty. 2. Ve frakci 5 získané izokratickou HPLC ethylacetátového extraktu se nacházela látka, která vykazovala stejné charakteristiky (Rf, UV spektrum, reakce s detekčními činidly) jako L3 (3S,7- dihydroxyvasicinolon). 3. Přítomnost L3 (3S,7-dihydroxyvasicinolon) nemohla být potvrzena z důvodu malého množství materiálu. 4. Ve frakci HPLC 6 se nacházela látka, jejíž některé fyzikálně-chemické charakteristiky odpovídaly vlastnostem dříve izolovaných alkaloidů. 5. Totožnost této látky nemohla být určena, neboť se ani po přečištění pomocí preparativní HPLC nepodařilo získat zpracovatelné množství čistých krystalů.
|
|
|
Phytochemical study of Evolvulus alsinoides IV
Svačinová, Jana ; Karlíčková, Jana (advisor) ; Opletal, Lubomír (referee)
SOUHRN Provedla jsem výzkum petroletherového extraktu Evolvulus alsinoides L. Sloupcovou chromatografií jsem získala celkem 113 frakcí, z nichž pro další výzkum jsem zvolila frakce 3-4, 5-7, 15-16, 17, 36-40, které se jevily jako perspektivní. Sumární petroletherový (Pe) extrakt byl podroben testování na akutní toxicitu. Test akutní toxicity nebylo možno s extraktem adekvátně provést, jelikož podmínkou jeho provedení je rozpustnost vzorku ve vodě. U emulze Pe extraktu s vodou byl výsledek negativní. Pe extrakt vykazoval slabou antioxidační aktivitu. Výsledky testování na antioxidační aktivitu mohly být zkresleny vzhledem k malé rozpustnosti extraktu v použitém rozpouštědle. Z frakce 3-4 (1,3244 g) bylo získáno 0,02 g čistých krystalů bílé barvy a voskovité konzistence s teplotou tání 58-82 řC, které byly dle provedené TLC pravděpodobně směsí tří látek. Srovnávací TLC ukázala, že se nejednalo o kyselinu palmitovou a stearovou. Pomocí GC/MS bylo zjištěno, že krystalický podíl frakce 3-4 představuje směs látek. Jedná se o kyselinu 8-methyldekanovou, kyselinu olejovou, alifatický uhlovodík a polynenasycené mastné kyseliny, které nebylo možno pro jejich malé množství blíže specifikovat. Stanovení antioxidační aktivity u krystalického podílu frakce 3-4 bylo negativní. Frakce 5-7 (2,7028 g) poskytla 0,0052 g...
|
|
|
Biological activity of plant metabolites II. Influence of alkaloids from Chelidonium majus L. on acetylcholinesterase.
Vítková, Eva ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Karlíčková, Jana (referee)
SOUHRN Spolu s ostatními diplomantkami (Dagmar Kubincovou, Janou Nagyovou a Šárkou Brožovou) jsme provedly extrakci 41,8 kg suché nati s kořeny. Poté jsme tento získaný primární extrakt vyčistily a to filtrací a následným oddestilováním rozpouštědla. Dále jsme připravily sekvenčním postupem výtřepky s jednotlivými typy alkaloidů: šlo o dva diethyletherové výtřepky, které byly následně okyseleny, vzniklé kvartérní jodidy po přidání jodidu draselného vytřepány chloroformem a po následné alkalizaci extraktu byly získány další kvartérní jodidy vytřepáním do směsi chloroform + ethanol 8,5:1,5. Dále jsem zpracovávala výtřepek A. Provedla jsem separaci látek z výtřepku A pomocí sloupcové chromatografie. Poté jsem použila frakci 12, kde se podle výsledků tenkovrstvé chromatografie nacházely 2 čisté látky ("A vyšší" a "A nižší"). Preparativní tenkovrstvou chromatografií jsem "A vyšší" a "A nižší" oddělila a pro další práci pak použila pouze "A nižší", tj. čistou látku CH-M/A- 3 (0,0494 g). Rhomboidní nahnědlé krystalky látky CH-M/A-3 z frakce 27 vykrystalizovaly až po izolaci látky CH-M/A-3 z frakce 12 (0,0777 g), nebyly proto vyčištěny a dále zpracovány. Další izolaci látky z frakce 27 jsem neprováděla, protože se ukázalo, že látka CH-M/A-3 z frakce 27 je identická s látkami označovanými jako "A nižší" z frakce 12....
|
|
|
Biological activity of plant metabolites IV. Influence of alkaloids from Chelidonium majus L. on acetylcholinesterase
Nagyová, Jana ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Opletalová, Veronika (referee)
SOUHRN K izolaci alkaloidů z Chelidonium majus bylo použito 41,8 kg celé sušené rostliny (nať a kořen). Na extrakci drogy jsem se podílela spolu s dalšími diplomantkami Šárkou Brožovou, Evou Vítkovou a Dagmar Kubincovou. Přípravou extraktu a jeho čištěním jsme získaly pseudokyanidy, kvarterní baze z pseudokyanidů, chloridy ve vodě rozpustné a chloridy ve vodě nerozpustné. Zabývala jsem se dělením alkaloidů jejichž chloridy byly ve vodě rozpustné a izolovala jsem látku CH-M/A- 2. Tenkovrstvá chromatografie ukázala, že alkaloid připravený naším postupem (sloupcová chromatografie na oxidu hlinitém z frakcí 13+14, 15-17, 18, 19-26) je čistý. Neznám ale jeho přesnou strukturu a musím počkat na výsledky spektrálních analýz. U této látky byla změřena její biologická aktivita (schopnost inhibovat acetylcholinesterázu). Naměřená hodnota, IC50 = 35 mg/l, ukazuje, že účinnost látky CH-M/A-2 je nízká. Jedná se však pouze o výsledek předběžný, protože hodnotu IC50 nebylo možné přesně stanovit vzhledem k tomu, že není známa přesná struktura látky.
|
|
|
Biological activity of plant metabolites V. Influence of alkaloids from Chelidonium majus L. on acetylcholinesterase
Brožová, Šárka ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Jun, Daniel (referee)
SOUHRN Z 41,8 kg celé usušené rostliny byly získány jednotlivé výtřepky. Extrakce byla provedena společně s dalšími diplomantkami Janou Nagyovou, Evou Vítkovou a Dagmar Kubincovou. Z výtřepku A, (182,0 g; světlé medové barvy, vysoce viskózní, nekrystalizující) pak byly získány alkaloidy ve vodě rozpustné (5,0737 g; světle nažloutlý, hrubě krystalický). Dále náš postup pokračoval sloupcovou chromatografií, kde byly získány jednotlivé frakce. Já jsem se věnovala frakci 11 a 12 (žlutá s krystalky), ze kterých byla izolována látka CH-M/A-1. Přičemž přečištěním frakce 11 bylo získáno 10,4 mg jemně nažloutlých jehličkovitých krystalů a z frakce 12 29,2 mg jemně nažloutlých jehličkovitých krystalů. Z matečného louhu frakce 12 bylo pomocí preparativní TLC získáno ještě dalších 14,8 mg téže látky. Byla stanovena teplota tání izolované látky (198 - 204 řC) a IČ spektrum. Na konci naší práce byl určen inhibiční vliv izolované látky na aktivitu AChE. IC50 má hodnotu 54,8 mg/l. Tento výsledek je pouze předběžný, protože není dosud známa struktura látky. Nicméně tato hodnota předběžně ukazuje velmi malý inhibiční vliv na AChE a jako inhibitor při AD by tato látka neměla využití
|
|
|
Biological activity of plant metabolites I. Influence of plant constituents on some species of the genus Eimeria
Kvapilová, Jana ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Tilšer, Ivan (referee)
SOUHRN K přípravě extraktů a následnému testování bylo na základě literatury vybráno několik drog - Caryophylli flos, Curcumae longae radix, Ocimi sancti herba, Origani herba a jedna izolovaná substance knicin (z Cardui benedicti herba). Z těchto drog jsem metodou kontinuální extrakce (perkolace) připravila extrakty a poté u nich stanovila sušinu. Potřebné množství zhomogenizovaného extraktu jsem sorbovala na celozrnnou mouku tak, aby v konečném množství roztěru 200 g byly nasorbovány 2 g suchého extraktu a byl dokonale homogenní. Tento roztěr byl dispergován do krmiva pro myši a krysy tak, aby výsledná koncentrace byla 100 ppm. V případě knicinu jsem obdržela již izolovanou substanci, příprava roztěru probíhala obdobným způsobem. Každý z extraktů a knicin byly testovány v jednom experimentu, jehož délka se pohybovala kolem asi 7 - 8 dnů. Testovaná látka byla podávána pokusné skupině zvířat (mastomyši a myši CD1) v krmivu, kontrolní skupina zvířat dostávala stejné krmivo, ale bez přídavku testované látky. Kokcidiostatický efekt se zjišťoval jako rozdíl v kvantitě vylučovaných oocyst mezi testovanou a kontrolní skupinou. Dle grafu 19 je patrné, že nejlepší kokcidiostatickou aktivitu vykazovaly tři extrakty připravené z drog Ocimi sancti herba, Caryophylli flos a Origani herba. U Ocimi sancti herba bylo...
|
|
|
Biological activity of plant metabolites III. Influence of alkaloids from Chelidonium majus L. on acetylcholinesterase
Kubincová, Dagmar ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Kuča, Kamil (referee)
SOUHRN Spolu s ostatními diplomantkami (Šárkou Brožovou, Janou Nagyovou a Evou Vítkovou) jsem provedla extrakci 41,8 kg suché nati s kořeny. Primární extrakt jsme vyčistily filtrací a následným oddestilováním rozpouštědla na vakuové odparce. Dále jsme připravily sekvenčním postupem výtřepky s jednotlivými typy alkaloidů: šlo o dva diethyletherové výtřepky (získané po předchozí alkalizaci primárního extraktu uhličitanem sodným a hydroxidem draselným), které byly následně okyseleny kyselinou chlorovodíkovou, vzniklé kvartérní jodidy po přidání jodidu draselného vytřepány chloroformem a po následné alkalizaci extraktu amoniakem získány další kvartérní jodidy vytřepáním do směsi chloroform + ethanol 8,5:1,5. Já jsem se zabývala výtřepkem B, který obsahoval silně basické alkaloidy. Provedla jsem separaci výtřepku B pomocí sloupcové chromatografie. Zpracovávala jsem frakci 27- 46, jejíž odparek jsem po vysušení rozdělila na dvě části. První část (0,02 g) byla podrobena barevným reakcím s činidly, které prokázaly, že izolovaný alkaloid CH-M/B-1 je berberin.Dále jsem změřila teplotu tání Z druhé části odparku jsem získala 0,346 g žlutého prášku, který byl v závěru práce podroben testu vlivu látky na aktivitu AChE. Z naměřené hodnoty IC50= 0,221 (0,146- 0,228) μM je patrné, že látka CH-M/B-1 je vysoce aktivní v...
|
|
| |
|
|
Basic phytochemical investigation of some taxons division Eumycota with respect to study of antioxidant activity
Mrvíková, Hana ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Siatka, Tomáš (referee)
SOUHRN Tato práce si kladla za cíl provést základní fytochemický výzkum vybraných 14 taxonů hub oddělení Eumycota. Pojednávané druhy hub patří celkem do sedmi čeledí: Boletaceae, Hydnaceae, Pleurotaceae, Polyporaceae, Russulaceae, Strophariaceae a Telephoraceae. Nejpočetněji je zde zastoupena čeleď Russulaceae kam náleží osm hub ze sledovaných 14 druhů. Příprava extraktů pro účely v této práci spočívala jen v navážení potřebného množství již hotového lyofilizátu a přidání vhodného rozpouštědla. Práce se zabývala dvěma experimentálními základy. Tenkovrstvou chromatografií se skupinovými reakcemi a stanovením antioxidační aktivity pomocí DPPH testu s použitím metody SIA. Literární rešerže byla zaměřena jak na informace o obsahových látkách sledovaných taxonů tak na údaje o jejich biologické aktivitě a případné toxicitě. Z hlediska antioxidační aktivity se zdá být zajímavá houba Albatrellus ovinus. Ve studii 3- hydroxyneogrifolin a 1-formyl-3-hydroxyneogrifolin, látky obsažené v její plodnici, vykazovaly silnější antioxidační aktivitu než α - tokoferol nebo BHA. 14 Při použití metody SIA pro stanovení antioxidační aktivity DPPH testem byly použity koncentrace sumárních extraktů 0,1 mg/ml, 0,5 mg/ml, 0,25 mg/ml a 0,1 mg/ml. Standardem byl Trolox měřený při koncentracích 0,5 mg/ml, 0,1 mg/ml, 0,05 mg/ml a 0,025...
|
|
|
Plant sterols in prevention and therapy
Bradáčová, Petra ; Opletal, Lubomír (advisor) ; Siatka, Tomáš (referee)
SOUHRN Oleje a tuky jsou směsi lipidů rostlinného nebo živočišného původu. Z 95-98 % jsou tvořeny glyceridy (acylglyceroly), zbytek jsou průvodní látky - vosky, steroly, lecitin, fosfatidy, uhlovodíky a vitamíny. Tyto látky nejsou hydrolyzovatelné a označují se jako nezmýdelnitelný podíl. Steroly jsou steroidní alkoholy, patří do velké skupiny izoprenoidů, vzájemně se liší strukturou postranních řetězců a umístěním dvojných vazeb na steroidní jádro. Celkem bylo identifikováno asi 40 fytosterolů, mezi nejčastější patří sitosterol, stigmasterol a kampesterol, méně časté jsou brassikasterol a avenasterol. Přirozeně se vyskytují hlavně v rostlinných olejích, v semenech, méně v plodech, ovoci a zelenině. Pro kvasinky a houby je typický ergosterol (provitamín D2), pro řasy fukosterol. Saturací dvojné vazby na steroidním jádru v poloze 5-6 vzniká analogická řada stanolů, které se v přírodě vyskytují méně často než steroly. Společně s fosfolipidy jsou steroly základní součástí plazmatických membrán eukaryotických buněk a mají významný vliv na fyzikálně-chemické vlastnosti fosfolipidové dvojvrstvy. Již v roce 1950 bylo zjištěno, že fytosteroly mají schopnost snižovat koncentraci plazmatického cholesterolu tím, že redukují absorpci cholesterolu ze střeva kompeticí s cholesterolem o vazbu ve smíšených micelách...
|
guest ::
