| |
| |
| |
|
Vliv rekombinantní bakterie Lactobacillus plantarum na vývoj pylové alergieL
Schwarzer, Martin ; Repa, A. ; Wiedermann, U. ; Hrnčíř, Tomáš ; Daniel, C. ; Pot, B. ; Štěpánková, Renata ; Hudcovic, Tomáš ; Tlaskalová, Helena ; Součková, Martina ; Kozáková, Hana
Monokolonizovali jsme bezmikrobní myši rekombinantním kmene Lactobacillus plantarum, produkujícím Bet v 1. Následně byly myši senzitizovány třemi intraperitoneálními injekcemi k alergenu Bet v 1. Monokolonizace rekombinantním kmenem Lb. plantarum snížila hladinu Bet v 1 specifických IgE a stimulovala produkci INF-gamma v supernatantech slezinných lymfocytů. Vyvozujeme z toho, že monokolonizace rekombinantním kmenem Lb. plantarum posunula rovnováhu imunitní odpovědi směrem k Th1 a je tak slibným kandidátem na vakcínu proti alergiím I. typu
|
| |
| |
|
Vakcinační potenciál cystatinu z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
HARCUBOVÁ, Adéla
Klíšťata patří mezi ektoparazity přenášející řadu patogenů nebezpečných pro člověka- bakterie, viry a protozoa. Vývoj vakcíny proti klíšťatům je velmi důležitý. Cystatiny hrají důležitou roli v trávení klíšťat a mají imunomodulační účinky. Z toho důvodu jsou cystatiny možnými kandidáty na vytvoření vakcíny proti klíšťatům. Tato práce se zabývá experimentální vakcinací myší rekombinantním cystatinem z klíštěte Ixodes ricinus.
|
|
Charakterizace rekombinantních cathepsinů B ptačí schistosomy Trichobilharzia regenti
Dvořáková, Hana ; Mikeš, Libor (vedoucí práce) ; Dvořák, Jan (oponent)
Tato studie se zabývá rekombinantními cysteinovými peptidázami - cathepsiny B - původem z ptačí schistosomy Trichobilharzia regenti, která je jedinečná v rámci celé čeledě pro svoji schopnost migrovat nervovou tkání až do míst konečné lokalizace. Peptidázy napomáhají invazi tohoto parazita do hostitele, migraci ve tkáni, degradaci hostitelských proteinů a pravděpodobně také úniku před hostitelským imunitním systémem. Tato práce navazuje na výzkum prováděný pracovníky Katedry parazitologie Přírodovědecké fakulty Karlovy Univerzity a měla za cíl prohloubit charakteristiku rekombinantních cathepsinů B původem z T. regenti. U T. regenti byly již dříve charakterizovány 2 cysteinové peptidázy cathepsin B1 (TrCB1) a cathepsin B2 (TrCB2). TrCB1 je lokalizován ve střevě schistosomul a je pravděpodobně zodpovědný za trávení. TrCB2 byl nalezen v postacetabulárních žlázách cerkárií a zřejmě napomáhá při penetraci. Rekombinantní pro-cathepsiny B (izoformy TrCB1.1 a TrCB1.4 a dále TrCB2) byly získány expresí v systému P. pastoris. Byl rovněž proveden pokus o produkci rekombinantní izoformy TrCB1.6, jehož cystein aktivního místa je nahrazen glycinem, v kvasinkovém systému Pichia pastoris. Zatímco TrCB2 byl schopen se sám aktivovat za podmínek expresního media, TrCB1.1 a TrC1.4 zymogeny byly efektivně aktivovány...
|
|
Charakterizace dvou zástupců multigenní rodiny jednodoménových Kunitz-inhibitorů z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
SINGEROVÁ, Barbora
Dva nové geny, kódující 94AA dlouhé proteiny Monolaris 1 a Monolaris 2, byly izolovány z klíštěte Ixodes ricinus. Monolaris 1 je 8,1kDa velký protein, Monolaris 2 8,3kDa. Funkce proteinu Monolaris 1 byla testována s použitím RNA interference. Po injikaci dsRNA se daly samičky klíštěte Ixodes ricinus sát na morčata. Pro zhodnocení efektu utlumení genu byla změřena tělesná hmotnost, hmotnost vaječné snůšky a úmrtnost samic. V bakteriálním expresním systému byl připraven rekombinantní protein Monolaris 1 a po imunizaci králíka byly získány protilátky proti tomuto proteinu. Protilátky reagovaly s přibližně 190kDa velkým proteinem ve slinných žlázách, ováriích a střevě klíštěte, zatímco Monolaris 1 nebyl v slinách, slinných žlázách a dalších tkáních detekován.
|
|
Využití rostlin k produkci protilátek
Angelis, Karel ; Šmídková, Markéta
Rostliny jsou nejstarším biotechnologickým produkčním systémem a jako eukaryotní organismy jsou schopny produkovat modifikované proteiny. Využívají se laboratorní modelové rostliny jako tabák nebo produkční plodiny s vypracovou logistikou sklizně a skladování jako je brambor a rýže. Perspektivní jsou kapalné kultury unožňující kultivací za kontrolovaných podmínek. Např. mech Physcomitrella patens kromě pěstování v kapalné kultuře díky vysoké účinnosti homologní rekombinace umožňuje cílenou modifikací (gene targeting) rekonstruovt glykosylační dráhy tak, aby odpovídala lidským. Pro heterologní expresi v rostlinách se konstruují rekombinantní protilátky, kdy se pro plně funkční jednořetězcovou scFv se z původní protilátky využívá pouze variabilní konce lehkého VL a těžkého VH řetězce, které vytváří vazebné místo. Rekombinantní scFv protilátky jsou využívány pro terapii a diagnostiku různých nádorových onemocnění.
|
host ::
