|
|
In silico design and validation of conotoxin-based peptides for neuroblastoma nanotherapy
Mokrý, Michal ; Gumulec, Jaromír (oponent) ; Heger, Zbyněk (vedoucí práce)
This thesis is focused on in silico design and validation of peptides based on -MrIA conotoxin from Conus marmoreus marine snail species, and their possible use in the treatment of neuroblastoma through norepinephrine transporter targeting. Five conotoxin-based peptides were designed using molecular dynamics simulations, and their trajectories were analyzed to determine peptide properties. Two homology models of human norepinephrine transporter were prepared for further analysis of binding properties of the conotoxin-based peptides to norepinephrine transporter. Peptides were synthesized and used to coat apoferritin nanoparticles with cytotoxic agent ellipticine trapped inside apoferritin’s cavity. Created peptides and nanoparticles were analyzed to determine their physico-chemical characteristics. Furthermore, cellular uptake and cytotoxicity towards neuroblastoma and epithelial cell lines were studied. From both in silico and in vitro studies, it appears that YKL-6 peptide is the best candidate for further research.
|
|
|
In silico design and validation of conotoxin-based peptides for neuroblastoma nanotherapy
Mokrý, Michal ; Gumulec, Jaromír (oponent) ; Heger, Zbyněk (vedoucí práce)
This thesis is focused on in silico design and validation of peptides based on -MrIA conotoxin from Conus marmoreus marine snail species, and their possible use in the treatment of neuroblastoma through norepinephrine transporter targeting. Five conotoxin-based peptides were designed using molecular dynamics simulations, and their trajectories were analyzed to determine peptide properties. Two homology models of human norepinephrine transporter were prepared for further analysis of binding properties of the conotoxin-based peptides to norepinephrine transporter. Peptides were synthesized and used to coat apoferritin nanoparticles with cytotoxic agent ellipticine trapped inside apoferritin’s cavity. Created peptides and nanoparticles were analyzed to determine their physico-chemical characteristics. Furthermore, cellular uptake and cytotoxicity towards neuroblastoma and epithelial cell lines were studied. From both in silico and in vitro studies, it appears that YKL-6 peptide is the best candidate for further research.
|
|
|
Využití funkčních potravin v terapii nádorových onemocnění
Vašíčková, Kateřina
Tato diplomová práce s názvem „Využití funkčních potravin v terapii nádorových onemocnění“ se zaměřuje na studium možnosti využití nutriceutik funkčních potravin při léčbě nádorových onemocnění. Literární rešerše pojednává o tématu funkčních potravin a jejich pozitivních účincích na lidský organismus, zejména z hlediska prevence a léčby různých typů onemocnění. Jedním z hlavních témat jsou nádorová onemocnění a možnosti jejich léčby. V současnosti je často předmětem výzkumů problematika využívající nutriceutika jakožto doplňkové či monoterapeutické modality nádorových onemocnění. V této práci byly zkoumány účinky nutriceutika kurkuminu, jehož protinádorové účinky byly testovány in vitro jak ve formě monoterapie, tak i doplňkové léčby karcinomu prsu. V rámci doplňkové léčby byl testován v synergii s cytostatikem doxorubicinem. Biologicky aktivní molekuly byly enkapsulovány do bílkovinného nanotransportéru apoferitinu, díky kterému byly jejich léčivé účinky podpořeny a zároveň ochráněny netransformované prsní buňky. Enkapsulační výtěžnost se pohybovala okolo 68–72 % aplikovaných molekul. Stabilita komplexů s enkapsulovaným kurkuminem a doxorubicinem skladovaných ve vodném prostředí při 4 °C a 20 °C po dobu 48 hodin byla stanovena sledováním změny optických vlastností, změny velikosti a povrchového ζ-potenciálu nanočástic či předčasného uvolnění léčiva z nanotransportéru. Mimo to, byl proveden test koloidní stability, který potvrdil zvýšenou ochranu biologicky aktivních molekul procesem řízené enkapsulace. V roztocích simulujících vnitřní prostředí organismu (krevní plazma, cytoplazma, endozomy) byla po dobu 48 hodin při 37 °C sledována míra uvolněných molekul z dutiny apoferitinu. Testem koloidní stability bylo stanoveno chování v krevní plazmě po dobu 48 hodin. Několika buněčnými experimenty byla stanovena toxicita testovaných komplexů vůči nádorovým buněčným liniím MDA-MB-231 a MDA-MB-468. Jako kontrolní nenádorové buňky byla zvolena buněčná linie HBL-100. Výzkum této diplomové práce stanovil oxidační stres buněčných liniích indukovaný připravenými komplexy a míru internalizace těchto formulací do buněk. Biokompatibilita byla stanovena sledováním tvorby proteinových koron na povrchu nanočástic, aktivací složky komplementu C3, genotoxickým působením na zdravé prsní buněčné linie a mírou hemolýzy erytrocytů v lidské krvi.
|
host ::
RSS.