|
|
Zkoumání jaderné funkce interleukinu-1alfa
Novák, Josef ; Pospíšek, Martin (vedoucí práce) ; Vondrejs, Vladimír (oponent)
Interleukin-1alfa (IL-1alfa) je dobře známý jako extracelulární prozánětlivá signální molekula. Množí se však i důkazy pro jeho nekanonickou jadernou funkci, která jej řadí mezi "cytokiny dvojí funkce". Tato funkce není závislá na oblasti aktivující receptor, ale na jeho evolučně konzervované N-terminální doméně, která po rozštěpení prekurzoru zůstává v buňce a přesouvá se do jádra. Je známo, že prekurzor lidského IL-1alfa dokáže interagovat s histonacetyltransferázovými (HAT) komplexy. Doposud ale nebyla určena bílkovina z těchto komplexů, která je za interakci s N-terminální doménou IL-1alfa zodpovědná. Pro studium interakce IL-1alfa s HAT byla N-terminální doména lidského IL-1alfa, respektive celý prekurzor IL-1alfa, produkovány v kvasinkách. Byla testována vhodnost takového uspořádání pro studium interakce IL-1alfa s eukaryontními komplexy. Bioinformatickou analýzou byly v rámci této práce charakterizovány predikované oblasti, kterými se IL-1alfa může vázat na koaktivátory transkripce. Jeden z proteinů, na který se IL-1alfa může těmito oblastmi vázat, je Ada2. Proteiny Ada2, prekurzor a maturovaný IL-1alfa byly v bakteriálním expresním systému produkovány ve fúzi s epitopy vhodnými pro afinitní purifikaci a přečištěny. Tato práce dále předkládá predikci terciární struktury N-terminální domény IL-1alfa....
|
host ::
RSS.