|
|
Úloha exprese buněčného prionového proteinu v diferenciaci neuronálních buněčných linií
Kučerová, Johanka ; Holada, Karel (vedoucí práce) ; Janoušková, Olga (oponent)
Buněčný prionový protein PrPC je membránově vázaný glykoprotein, který se běžně vyskytuje u obratlovců, především v nervové soustavě, ale také například v buňkách gastrointestinálního traktu, v kostní dřeni, v pohlavních buňkách či v srdci. PrPC je zároveň nezbytným pro patogenezi prionových chorob, smrtelných onemocnění bez možnosti léčby. Patogenní izoforma PrPSc , vznikající změnou sekundární struktury PrPC , je základním stavebním kamenem infekční prionové částice, jenž se akumuluje v mozku postižených jedinců a tento děj je spojen s neurodegenerací. Samotná fyziologická úloha PrPC v organizmu však nebyla dosud objasněna, při vyřazení genu pro PrPC (PRNP), nebyl pozorován fenotypový rozdíl. Potencionální funkce PrPC jsou spojovány s anti-apoptotickými účinky, metabolismem iontů či ochranou před oxidačním stresem. Výsledky z poslední doby současně naznačují, že by PrPC mohl hrát důležitou roli v buněčné diferenciaci. V průběhu diferenciace by protein mohl mít vliv na vývoj a typizaci buněk, ovlivňovat průběh buněčného cyklu a podílet se na utváření nervové soustavy. Cílem této práce je zmapování míry dopadu snížení exprese PrPC na buněčnou diferenciaci a vlivu prionové infekce na diferenciaci neuronální buněčné linie (CAD 5), která je schopná propagovat priony. V rámci této práce byly porovnávány linie...
|
|
|
Prionové proteiny a jejich interakce s těžkými kovy
Sedláčková, Eliška
Prionové proteiny jsou infekční glykoproteiny, které neobsahují nukleové kyseliny. Jejich specifická funkce v mozku však dosud není zcela objasněná. Konverze buněčné formy prionového proteinu (PrPC) na jeho patologickou izoformu (PrPSc) je považována za příčinu vzniku neurodegenerativních onemocnění. PrPC je glykoprotein, který interaguje s řadou dvojmocných kovových iontů, zejména s Cu2+ a Zn2+. Dalším proteinem, který má schopnost vázat kovy je i metalothionein (MT), který tvoří několik specifických forem. Z hlediska vzniku neurodegenerativních onemocnění je významná izoforma MT-3 obsažena v mozku. Jednou z funkcí MT-3 v mozku je účast na udržování optimální koncentrace kovových iontů. Cílem této práce bylo ověření přítomnosti exprese genů PrPC anebo MT-3 v bakteriálních buňkách E. coli. Dále jsme sledovali vliv přídavků kovů k bakteriální kultuře E. coli exprimující protein PrPC anebo MT-3. V závěru jsme se věnovali stanovení celkové koncetrace MT v bakteriálních buňkách E. coli exprimujících protein PrPC anebo MT-3. Veškerá stanovení proběhla v porovnání se standardním kmenem E. coli Bl21(DE3).
|
host ::
RSS.