|
|
Elektroforetické stanovení oxidované a redukované formy glutathionu v rostlinném materiálu
Durychová, Eva ; Křížek, Tomáš (vedoucí práce) ; Kubíčková, Anna (oponent)
Tato práce vychází z dříve publikované metody pro stanovení dvaceti proteinogenních aminokyselin pomocí kapilární elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí a zabývá se možností jejího využití ke stanovení oxidované (GSSG) a redukované (GSH) formy glutathionu s aminokyselinami. Teoretická část se nejdříve věnuje stručnému představení vlastností a významu glutathionu a jeho stabilizací vůči autooxidaci, konkrétně alkylací pomocí N-ethylmaleimidu (NEM) vázajícím se na GSH za vzniku alkylované formy (GSH-NEM). Dále se věnuje stručnému souhrnu dostupných metod k stanovení glutathionu, s detailnějším zaměřením na již vyvinuté metody kapilární zónové elektroforézy. Na závěr ve zkratce představuje elektroforetickou metodu pro stanovení dvaceti proteinogenních aminokyselin, ze které tato práce vychází. V praktické části se nachází postup, s jakým bylo zaváděno stanovení obou forem glutathionu do metody pro stanovení proteinogenních aminokyselin. Nejprve byla testována zjednodušená, časově méně náročná metoda v kratší 50,0 cm kapiláře bez hydroxyethylcelulózy, kde byly obě formy glutathionu separovány na základní linii během 10 minut. U této metody byly zjištěny relativní směrodatné odchylky ploch píků (GSH 2,1 %; 1,2 GSSG %; GSH-NEM 2,2%) a jejich migračních časů (GSH 0,56 %; GSSG 0,59 %; GSH-NEM 1,31...
|
|
|
Studium vlivu požití kávy na antioxidační stav organismu
Prucková, Zdeňka
Teoretická část se zabývá charakterizací kávy, její výrobou, chemickým složením zrna a vlivem požití kávy na zdravotní stav organismu. Dále se zabývá antioxidanty, jejich dělením a působením na lidský organismus. Je zde popsán glutathion, jako jeden z nejdůležitějších antioxidantů v krvi. Praktická část se zabývá experimentem, skládajícím se z odběru kapilární krve a následném stanovení obsahu thiolových skupin Ellmanovou metodou, stanovení celkového obsahu redukovaného glutathionu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie) s elektrochemickou detekcí a stanovení celkového obsahu bílkovin v krvi Bradfordovou metodou. Všechny výsledky jsou znázorněny pomocí grafů. Obsah thiolových skupin a glutathionu se s pravidelnou konzumací kávy zvyšoval, obsah proteinů se neměnil. V poslední části experimentu byla provedena senzorická analýza testovaného vzorku instantní kávy. Káva byla hodnocena jako průměrná, jelikož její celkový dojem byl ohodnocen průměrně 52,7 body.
|
|
|
Význam glutathionu v hormonální regulaci odpovědi na stres u Arabidopsis thaliana
Šlapáková, Martina
Tripeptid glutathion má význam v odpovědi rostlin na řadu stresových faktorů. Současné poznatky ukazují, že obsah glutathionu je modulovaný cytokininy a glutathion je proto jedním z možných faktorů, který se podílí na toleranci stresu u rostlin se změnou percepce a/nebo obsahu cytokininů. Pro sledování biologické relevance úzkého spojení cytokininů a glutathionu bylo využito modelové xenobiotikum 1 chloro 2,4 dinitrobenzen (CDNB), které je detoxifikováno glutathionem. Aplikace CDNB vedla k podregulaci genů zahr-nutých v biosyntéze cytokininů a k podregulaci transkripčních markerů cytokininů u modelové rostliny Arabidopsis thaliana. Transgenní rostliny se sníženým obsahem en-dogenních cytokininů vykázaly zvýšenou toleranci CDNB v testu elongace kořene. U ros-tlin deficientních v obsahu cytokininů byla stanovena zvýšená hladina glutahionu při expozici CDNB. Význam glutahionu pro toleranci CDNB u těchto rostlin byl dále dokázán ztrátou tolerance vůči CDNB po farmakologické inhibici biosyntézy glutahionu. Tyto výsledky ukazují, že cytokininy se účastní adaptace na přítomnost CDNB.
|
|
|
Alternativy k SO2
Měřínská, Iva
Bakalářská práce se zabývá problematikou oxidu siřičitého a látek navržených k jeho náhradě. Teoretická část vymezuje základní problémové oblasti – využití oxidu siřičitého ve vinařství, formy oxidu siřičitého ve víně, způsoby aplikace, dopady na lidské zdraví a metody ke snížení oxidu siřičitého ve víně. V praktické části je věnována pozornost pokusu, který byl proveden s vyloučením použití oxidu siřičitého během vinifikace. Výsledná vína jsou v práci sledována po analytické a senzorické stránce. Naměřené výsledky jsou v závěru práce přiměřeně zhodnoceny.
|
|
|
Vliv zdroje selenu na antioxidační potenciál laboratorních potkanů
Buriánková, Markéta
Buriánková M.: Vliv zdroje selenu na antioxidační potenciál laboratorních potkanů. Diplomová práce, MENDELU, Brno, 90 s. Cílem diplomové práce bylo experimentálně stanovit vliv různých forem (nanoselen, nanoselen modifikovaný glukózou) a hladin selenu (0 mg, 0,02 mg a 0,02 mg selenu/organismus/den + 0,1 mg glukózy/organismus/den) na antioxidační potenciál modelových zvířat - potkanů. Bylo použito 18 samců laboratorního potkana outbredního kmene Wistar albino, kteří byli rozděleni do tří skupin. Ve skupinách, kde byl aplikován samotný nanoselen došlo k průkazně příznivějšímu účinku na konečnou koncentraci selenu v plazmě a střevech (P < 0,05) oproti kontrole (bez suplementace). Ve skupinách ošetřených nanoselenem modifikovaným glukózou došlo průkazně (P < 0,05) k příznivějšímu vlivu na krev o 78,1 % a játra o 111,3% v porovnání s kontrolou. Aplikovaný nanoselen v obou skupinách tedy značně zvyšoval konečnou koncentraci selenu ve tkáních. U ostatních skupin potkanů doplňování nanoselenu výrazně neovlivnilo konečnou koncentraci selenu ve tkáních. Antioxidační aktivita tkání se průkazně (P < 0,05) zvýšila v plazmě ve skupině, kde byly aplikovány nanočástice selenu modifikované glukózou, a to o 83,6 % v porovnání s kontrolou. Hodnocena byla pomocí antioxidačních metod FR (P < 0,05) a FRAP, u které byla většina výsledků bez statistické významnosti (P > 0,05). Obě formy nanoselenu měly vliv na úroveň redukovaného (GSH) a oxidovaného (GSSG) glutathionu. V krvi došlo průkazně (P < 0,05) ke zvýšení hladiny GSH. V erytrocytech byly průkazně (P < 0,05) vyšší obě skupiny s nanoselenem, kde vyšší účinek na hladinu GSH měla skupina s nanoselenem modifikovaným glukózou, čímž se snížil oxidační stres organismu. V játrech došlo k průkaznému (P < 0,05) snížení GSH ve skupině se samotným nanoselenem a v obou skupinách se průkazně (P < 0,05) snížily hodnoty naměřeného GSSG. Z výsledků je patrné, že úrovně nanoselenu a nanoselenu modifikovaného glukózou zvyšovaly koncentrace tohoto prvku ve tkáních organismu zvířat, zvýšily antioxidační aktivitu v plazmě a rovněž hladinu GSH v krvi a erytrocytech.
|
|
|
Vliv taurinu na biochemické ukazatele v orgánech laboratorních potkanů
Mrázková, Martina
Cílem diplomové práce bylo zhodnotit vliv různých hladin taurinu na antioxidační status organismu laboratorních potkanů. Sledovat koncentraci taurinu a jednotlivých aminokyselin ve vybraných orgánech. Diplomová práce hodnotí vliv taurinu v játrech a mozku laboratorních potkanů, po jeho aplikaci v krmých směsích. Byl sledován vliv taurinu na poměr GSH/GSSG, koncentraci taurinu a metalothioneinu. Do pokusu bylo použito 48 samců potkanů druhu Wistar, kteří byli rozděleni do osmi skupin (n=6). Během čtyř týdnů, byly potkanům podávány krmné směsi obohaceny o taurin v dávce 0, 1000, 1500, 2000 2500, 3000, 3500 a 4000 mg/kg/diety. Zvířata příjmala dietu a pitnou vodu ad libidum. Průměrná spotřeba krmné směsi za den byla 35 g. Aplikací taurinu došlo ke zvýšení koncentrace taurinu v organismu, což pozitivně působí na antioxidační mechanismy organismu. Ovšem nemůžeme potvrdit, že doplnění taurinu do diety ovlivňuje koncentrace metalothioneinu a glutathionu v organismu. V mozku byla zjištěn zvýšený poměru GSH/GSSG a snížení koncentrace metalothioneinu. Naopak tomu bylo v játrech, kdy došlo ke snížení poměru GSH/GSSG a zvýšení koncentrace metalothioneinu.
|
|
|
Role cytokininů v regulaci odpovědi na nedostatek síry u Arabidopsis thaliana
Štuříková, Helena
Za deficitu síry dochází u rostlin k mnoha adaptivním stresovým reakcím, které musí být vzá-jemně zkoordinovány. Bylo již dokázáno, že fytohormony cytokininy se účastní příjmu a asi-milace síry, poznatky jsou však rozporuplné. V této diplomové práci bylo zjištěno, že cytokini-ny vyvolávají změny v expresi genů odpovědi na nedostatek síry, které jsou doprovázeny sní-žením glutathionu, klíčové sloučeniny síry. Dále bylo zjištěno, že odpověď na nedostatek síry zahrnuje i změnu hladiny cytokininů, díky které je dosaženo koordinace adaptací ve vývoji a/nebo metabolismu. Rostliny A. thaliana deficientní v signální dráze cytokininů vykázaly na-rušení elongace kořene za nedostatku síry. Elongace kořene v odpovědi na nedostatek síry byla navíc dále stimulována nízkými koncentracemi cytokininů. Roli cytokininů v odpovědi na nedostatek síry dále prokázaly opět rostliny deficientní v signální dráze cytokininů, které akumulovaly více glutathionu za běžné výživy oproti standardním rostlinám, snížení glutathio-nu navíc posílil nedostatek síry. Výsledky této práce ukazují na účast cytokininů v kontrole výživy sírou.
|
|
|
Biotransformační aspekty nových karbocyklických analogů nukleosidů.
Rozumová, Nela ; Mertlíková Kaiserová, Helena (vedoucí práce) ; Rumlová, Michaela (oponent)
Analogy karbocyklických nukleosidů s norbornanovým skeletem byly syntetizovány na ÚOCHB AV ČR a představují nová potenciální chemoterapeutika s významnou aktivitou proti Coxsackie virům. Základním cílem této práce bylo zkoumání metabolismu a mechanismu účinku původního karbocyklického nukleosidového analogu MS 254, jež se vyznačuje protivirovou a cytostatickou aktivitou. Částečně je pozornost věnována i dvěma strukturně příbuzným látkám (MS 255, MS 320). V této práci byla stanovena cytotoxicita těchto látek v buněčné kultuře a vliv látky MS 254 na množství celkového a oxidovaného glutathionu, na aktivitu glutathion-S-transferasy (GST), glutathionreduktasy (GR) a na oxidační stres. Dále byla stanovena kinetika přeměny MS 254 lidskou GST. Bylo potvrzeno, že ze tří sledovaných látek je nejvíce cytotoxická látka MS 255 a nejméně cytotoxická je látka MS 254. Dále bylo zjištěno, že látka MS 254 nenavozuje v buňce oxidační stres a že se vzrůstající koncentrací této látky se zvyšuje aktivita GST i GR. Michaelis-Mentenové konstanta pro konjugaci látky MS 254 s glutathionem (hlavní metabolická cesta) byla stanovena v řádech milimolů, což ukazuje na relativně nízkou afinitu substrátu ke GST.
|
|
|
Význam glutathionu pro kvalitu hroznů a vína
Kandourova, Alexandra
Glutathion je důležitá složka hroznů, moštu a vína. Zvláštní důraz je kladen na jeho výskyt v hroznech, moštu a víně, na jeho funkci jako antioxidantu. Účinek na různé aromatické sloučeniny je také popsán. Objevují se informace o pozitivním účinku použití přípravku obohacených glutathionem ve vinařském průmyslu. Je ohodnocena jeho účinnost v kombinaci s kyselinou askorbovou proti vzniku oxidačního zbarvení.
|
|
|
Význam glutathiónu pre kvalitu hrozna a vína
Kacina, Michal
Glutathion má důležitou roli jako antioxidant při oxidaci muštů bílých odrůd. Do jisté míry omezuje hnědnutí muštů, má ochranný efekt na aromatické látky a zabraňuje netypickému stárnutí vína. Je překurzorem některých aromatických volatilných thiolů. Jeho obsah v hroznech je ovlyvněný odrůdou, ročníkem a zásobou živin v půde. Jeho obsah v muště ovlyvňuje vystavení kyslíku, aktivita tyrosinázy, délka předfermentační macerace a podmínky lisování. Jeho koncentrace během alkoholické fermentace kolísá. Glutathion má synergický efekt s oxidem siřičitým na stabilitu vína a umožňuje znížení jeho dávek. Cílené řízení hladiny glutathionu během vinifikace může zvýšit kvalitu výsledného vína a délku jeho skladovatelnosti.
|
host ::
RSS.