|
|
Light-harvesting like domain of the cyanobacterial ferrochelatase
PAZDERNÍK, Marek
This thesis is focused on elucidating the function of the C-terminal transmembrane lightharvesting complex like (LHC) domain of the cyanobacterial ferrochelatase (FeCh). Using the model cyanobacterium Synechocystis PCC 6803, I show that the FeCh LHC domain can bind chlorophyll (Chl) and carotenoids; however, this pigment binding occurs only when the biosynthesis of heme and Chl in the cell is misbalanced. Further, I found that point mutation, which prevents the pigment binding to FeCh LHC domain results in a misregulated ratio between heme and Chl during stress conditions due to low heme accumulation. My data also show that the FeCh LHC domain interacts with CurT protein most likely to localize the FeCh into a specialized membrane domain, where the synthesis of photosystem II is proposed to occur. Based on my data I propose that the role of the FeCh LHC domain is to monitor the availability of Chl during photosystem biogenesis and to coordinate Chl availability with the synthesis of heme.
|
|
|
Molecular pathology of selected porphyria with skin manifestation
Sameh Anwar Hussein Farrag, Mohamed ; Martásek, Pavel (vedoucí práce) ; Baxová, Alice (oponent) ; Raman, C. S. (oponent)
SOUHRN Porfyrie jsou skupinou heterogenních dědičných metabolických poruch způsobených defekty enzymů biosyntézy hemu, které vedou k nadprodukci prekurzorů porfyrinů hemu v různých tělesných orgánech. Tyto enzymy jsou kódovány specifickými geny a patogenní změny v jejich sekvenci podmiňují konkrétní typ porfyrie. V těchto genech byly zjištěny četné mutace, které vedou k poškozením funkce enzymu, a tím k rozvoji klinických projevů porfyrie. Cílem této práce bylo zkoumat na molekulární úrovni gen UROD u pacientů s pozdní kožní porfyrií (PCT) a hepatoerytropoetickou protoporfyrií (HEP) a dále gen FECH u pacientů s erytropoetickou protoporfyrií (EPP). Identifikovali jsme řadu mutací v genech UROD a FECH ve třech různých populacích - české, slovenské a egyptské. Popsali jsme nové mutace v genu UROD u pacientů egyptského původu s onemocněním HEP a mutace v genu FECH u pacientů českého a slovenského původu s onemocněním EPP. Studovali jsme mutovaný enzym UROD na úrovni proteinu a určili, že jeho enzymová aktivita představuje 19 % zdravé kontroly. Stávající studie předkládá poprvé frekvenci sestřihové varianty IVS3-48c genu FECH u zdravých kontrol z české populace. Analyzovali jsme 624 alel u nepříbuzných jedinců z běžné české populace a zjistili, že frekvence alely C v české populaci je 5,5 %, podobná jako je v...
|
|
|
Molecular pathology of selected porphyria with skin manifestation
Sameh Anwar Hussein Farrag, Mohamed ; Martásek, Pavel (vedoucí práce) ; Baxová, Alice (oponent) ; Raman, C. S. (oponent)
SOUHRN Porfyrie jsou skupinou heterogenních dědičných metabolických poruch způsobených defekty enzymů biosyntézy hemu, které vedou k nadprodukci prekurzorů porfyrinů hemu v různých tělesných orgánech. Tyto enzymy jsou kódovány specifickými geny a patogenní změny v jejich sekvenci podmiňují konkrétní typ porfyrie. V těchto genech byly zjištěny četné mutace, které vedou k poškozením funkce enzymu, a tím k rozvoji klinických projevů porfyrie. Cílem této práce bylo zkoumat na molekulární úrovni gen UROD u pacientů s pozdní kožní porfyrií (PCT) a hepatoerytropoetickou protoporfyrií (HEP) a dále gen FECH u pacientů s erytropoetickou protoporfyrií (EPP). Identifikovali jsme řadu mutací v genech UROD a FECH ve třech různých populacích - české, slovenské a egyptské. Popsali jsme nové mutace v genu UROD u pacientů egyptského původu s onemocněním HEP a mutace v genu FECH u pacientů českého a slovenského původu s onemocněním EPP. Studovali jsme mutovaný enzym UROD na úrovni proteinu a určili, že jeho enzymová aktivita představuje 19 % zdravé kontroly. Stávající studie předkládá poprvé frekvenci sestřihové varianty IVS3-48c genu FECH u zdravých kontrol z české populace. Analyzovali jsme 624 alel u nepříbuzných jedinců z běžné české populace a zjistili, že frekvence alely C v české populaci je 5,5 %, podobná jako je v...
|
|
|
Expression and purification of \kur{Synechocystis} ferrochelatase from \kur{Escherichia coli}
RICHTOVÁ, Jitka
Ferochelatáza (FeCH) je všudypřítomný enzym produkující hem, který je nezbytný pro všechny žijící organizmy. Fotosyntetické organizmy syntetizují heme a chlorofyl společnou dráhou, ve které hraje FeCH významnou roli jako klíčový enzym pro regulaci obou větví. Vytvoření aktivní rekombinantní FeCH by bylo neocenitelné pro pochopení role FeCH v regulaci biosyntetické dráhy chlorofylu a hemu. Cílem této práce je exprimovat FeCH ze sinice Synechocystis 6803 v Escherichia coli a připravit protokol pro purifikaci tohoto proteinu ve formě vysoce aktivního enzymu.
|
|
|
Evoluce vybraných enzymů šikimátové dráhy a dráhy pro syntézu hemu u červených řas skupiny Florideophyceae
VORÁČOVÁ, Kateřina
Rozsivky mají sekundární plastid a endosymbiontem byla červená řasa. V průběhu endosymbiózy je většina genů endosymbionta přesunuta do jádra hostitele, tyto geny tedy spíš než s fylogenezí hostitelského organismu korespondují s fylogenezí plastidu. Geny pro ferochelatázu a DAHP syntázu u rozsivek jsou příbuzné těm u vyšších rostlin a zelených řas, tedy také fotosynteticým organismům. Z tohoto scénáře se vymykají červené řasy, u nichž jsou tyto geny evidentně jiného původu. Mým cílem bylo amplifikovat a osekvenovat tyto geny u červených řas třídy Florideophyceae a zjistit tak jejich fylogenetickou pozici.
|
host ::
RSS.