|
|
Příprava radioaktivně značeného albuminu
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Cíl: Tato diplomová práce byla zaměřena na vypracování pro naše podmínky optimální metody značení albuminu vybraným radionuklidem - techneciem 99m Tc. Naším úkolem bylo zvládnout příslušné metodiky potřebné k vypracování vhodného postupu značení albuminu uvedeným radioizotopem a rovněž otestovat i biologické chování značeného albuminu in vitro v buněčném experimentu s čerstvě izolovanými potkaními ledvinnými buňkami. Cílem diplomové práce bylo následně vyhodnotit provedené experimenty, porovnat získané výsledky s dalšími známými metodami značení albuminu techneciem 99m Tc a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu bylo použito nízkého pH a vysoké koncentrace albuminu. K redukci technecistanu 99m Tc bylo použito roztoku SnCl2.2H2O. Přečištění značeného albuminu proběhlo gelovou permeační chromatografií za použití Sephadexu G-50. Bicinchoninovou metodou byla stanovena poloha peaku albuminu ve frakcích. Stanovením chromatografického spektra samotného technecistanu byla stanovena poloha peaku technecistanu. Kontrola značení proběhla stanovením elučního spektra. Radiochemická čistota značeného albuminu byla ověřena chromatografií na papíře a následnou detekcí. K buněčnému experimentu byl použit čerstvě označený albumin. Byla sledována akumulace...
|
|
|
Studium membránového transportu albuminu v ledvinách in vitro
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Mgr. Martin Suchan 2010 Hradec Králové Doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Katedra farmakologie a toxikologie Abstrakt Cíl: Práce byla zaměřena na studium transportu albuminu in vitro pomocí akumulačních buněčných studií a s využitím dvou typů albuminu - albuminu značeného techneciem- 99m a FITC-albuminu značeného fluorescenční sondou. Součástí práce bylo ověření optimální přípravy a hodnocení kvality 99m Tc-albuminu. Cílem bylo porovnat akumulaci obou typů albuminu v ledvinných buňkách, zjistit vliv vybraných faktorů na akumulaci albuminu, stanovit typ mechanismu transmembránového transportu albuminu a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu techneciem-99 bylo použito optimalizovaného postupu za použití nízkého pH, vysoké koncentrace albuminu a optimální koncentrace cínatých iontů. Radiochemická čistota 99m Tc-albuminu byla ověřována chromatografií na papíře. Jako buněčné in vitro modely byly použity izolované nativní ledvinné buňky potkana a standardní linie ledvinných tubulárních buněk prasete LLC-PK1. V akumulačních studiích byl sledován uptake albuminu v závislosti na teplotě, čase, složení inkubační směsi, přítomnosti inhibitoru transportu a byl hodnocen vliv experimentálního modelu. U LLC-PK1 buněk byl též testován vliv stáří buněk na míru...
|
|
|
Studium membránového transportu albuminu v ledvinách in vitro
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Mgr. Martin Suchan 2010 Hradec Králové Doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Katedra farmakologie a toxikologie Abstrakt Cíl: Práce byla zaměřena na studium transportu albuminu in vitro pomocí akumulačních buněčných studií a s využitím dvou typů albuminu - albuminu značeného techneciem- 99m a FITC-albuminu značeného fluorescenční sondou. Součástí práce bylo ověření optimální přípravy a hodnocení kvality 99m Tc-albuminu. Cílem bylo porovnat akumulaci obou typů albuminu v ledvinných buňkách, zjistit vliv vybraných faktorů na akumulaci albuminu, stanovit typ mechanismu transmembránového transportu albuminu a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu techneciem-99 bylo použito optimalizovaného postupu za použití nízkého pH, vysoké koncentrace albuminu a optimální koncentrace cínatých iontů. Radiochemická čistota 99m Tc-albuminu byla ověřována chromatografií na papíře. Jako buněčné in vitro modely byly použity izolované nativní ledvinné buňky potkana a standardní linie ledvinných tubulárních buněk prasete LLC-PK1. V akumulačních studiích byl sledován uptake albuminu v závislosti na teplotě, čase, složení inkubační směsi, přítomnosti inhibitoru transportu a byl hodnocen vliv experimentálního modelu. U LLC-PK1 buněk byl též testován vliv stáří buněk na míru...
|
|
|
Příprava radioaktivně značeného albuminu
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Cíl: Tato diplomová práce byla zaměřena na vypracování pro naše podmínky optimální metody značení albuminu vybraným radionuklidem - techneciem 99m Tc. Naším úkolem bylo zvládnout příslušné metodiky potřebné k vypracování vhodného postupu značení albuminu uvedeným radioizotopem a rovněž otestovat i biologické chování značeného albuminu in vitro v buněčném experimentu s čerstvě izolovanými potkaními ledvinnými buňkami. Cílem diplomové práce bylo následně vyhodnotit provedené experimenty, porovnat získané výsledky s dalšími známými metodami značení albuminu techneciem 99m Tc a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu bylo použito nízkého pH a vysoké koncentrace albuminu. K redukci technecistanu 99m Tc bylo použito roztoku SnCl2.2H2O. Přečištění značeného albuminu proběhlo gelovou permeační chromatografií za použití Sephadexu G-50. Bicinchoninovou metodou byla stanovena poloha peaku albuminu ve frakcích. Stanovením chromatografického spektra samotného technecistanu byla stanovena poloha peaku technecistanu. Kontrola značení proběhla stanovením elučního spektra. Radiochemická čistota značeného albuminu byla ověřena chromatografií na papíře a následnou detekcí. K buněčnému experimentu byl použit čerstvě označený albumin. Byla sledována akumulace...
|
host ::
RSS.