|
| |
|
| |
|
|
Zavedení nových metod detekce vybraných polymorfismů u pacientů s chronickou myeloidní leukémií léčených imatinib mesylátem
Kupčová, Markéta ; Pecka, Miroslav (vedoucí práce) ; Fátorová, Ilona (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Bc.Markéta Kupčová Vedoucí: Doc. RNDr. Miroslav Pecka CSc. Konzultant: Mgr. Filip Vrbacký Název diplomové práce: Zavedení nových metod detekce vybraných polymorfismů u pacientů s chronickou myeloidní leukémií léčených Imatinib mesylátem. Chronická myeloidní leukémie je nádorové onemocnění krvetvorby charakteristické přítomností BCR/ABL fúzního genu s patologickou tyrozinkinázovou aktivitou, která způsobuje neřízenou proliferaci především buněk granulocytární řady. Revoluci v léčbě této choroby, ale také v prognóze, zaznamenal objev inhibitorů tyrozinkináz, které se v posledních letech používají s velkým úspěchem. Prvním z inhibitorů byl Imatinib mesylát, který tlumí aktivitu této tyrozinkinázy, nicméně u některých pacientů dochází k rezistenci a k selhání léčby, což může být způsobeno řadou vlivů, mezi které patří i polymorfismy v genech zodpovědných za transport a metabolizmus této látky. Pro diplomovou práci proto byly vybrány geny ABCB1, ABCG2, SLC22A1 a CYP3A5, jejichž produkty se podílejí na transportu a biotranformaci Imatinib mesylátu. U těchto genů byla provedena genotypizace vybraných jednonukleotidových polymorfismů pomocí alelické diskriminační PCR v reálném čase s...
|
|
|
Laboratorní diagnostika trombofilních stavů
Studená, Šárka ; Pecka, Miroslav (vedoucí práce) ; Blažek, Martin (oponent)
SOUHRN Prace pojednava o vyskytu trombofilnich stavů a o možnostech jejich diagnostiky u žen s rekurentnimi spontannimi aborty. Ve studii byl zpracovan soubor žen vedenych v hematologicke poradně II. Interni kliniky - Odděleni klinicke hematologie FN a LFUK v Hradci Kralove v letech 1995 - 2007. U dřive vyšetřovanych žen jsem použila archivni data. Vyšetřovani žen, ktere byly zařazeny do sestavy v poslednich letech, jsem se sama aktivně zučastnila. Při zpracovani sledovaneho souboru byla použita nasledujici kriteria, ktera by podle našich představ vychazejicich z literarnich pramenů, měla posoudit zavažnost trombofilniho stavu, připadně zaznamenat zvyšenou incidenci jeho zachytu: věk - v teto časti jsme použili median věku žen ze sledovaneho souboru počet prodělanych abortů - tento parametr ma poměrně značnou vypovědni hodnotu, ale je nutne přihližet k celkove delce těhotenstvi, po jejimž uplynuti k abortu dochazi (v prvnim trimestru se považuje za vyznamny až prodělany třeti abort a v druhem trimestru prodělany druhy abort). počet narozenych děti - riziko spontanniho abortu se s každym dalšim narozenym ditětem zvyšuje doba uživani antikoncepce - uživani antikoncepce může již v mladem věku odhalit sklon k trombofilnimu stavu. S delkou uživani by se riziko spontanniho abortu u žen se sklonem k...
|
|
|
Prognostický význam transkripce genu pro angiopoietin-2 u chronické lymfocytární leukémie
Gradošová, Iveta ; Pecka, Miroslav (vedoucí práce) ; Smolej, Lukáš (oponent)
Chronická B-lymfocytární leukémie (B-CLL) je nejčastěji se vyskytující leukémie u dospělých, která je charakteristická vysoce variabilním průběhem choroby. Podle poznatků z posledních let je patrné, že se na její patogenezi významně podílí angiogeneze. Jedním z důležitých cytokinů účastnících se tohoto procesu je angiopoietin-2 (Ang-2), jehož zvýšená aktivita byla pozorována u některých hematologických malignit. Údajů týkajících se Ang-2 u CLL je však velmi málo. V průběhu své práce jsem měřila množství transkriptu pro Ang-2 pomocí kvantitativní PCR v reálném čase u 24 neléčených pacientů s CLL. Pro normalizaci rozdílů v koncentraci templátu mezi jednotlivými vzorky byl použit transkript kontrolního genu Abl1. U 10 pacientů byla zjištěna zvýšená koncentrace mRNA pro Ang-2 (poměr Ang-2/Abl1 > 5x10-3 ). U ostatních 14 pacientů bylo množství transkriptu pro Ang-2 nízké či nedetekovatelné (poměr Ang-2/Abl1 < 5x10-3 nebo Cp pro Ang-2 > 35). Získané hodnoty byly následně porovnány metodou X2 s dalšími prognostickými faktory (mutační stav IgVH, exprese CD38 a ZAP70), stádiem onemocnění dle Raie a průběhem onemocnění. Exprese ZAP-70 a CD38 byla analyzována průtokovou cytometrií. Mutační stav IgVH byl stanoven z cDNA standardní metodou využívající databázi IgBLAST. Statistickým vyhodnocením získaných dat...
|
|
|
Zavedení nových metod detekce vybraných polymorfismů u pacientů s chronickou myeloidní leukémií léčených imatinib mesylátem
Kupčová, Markéta ; Pecka, Miroslav (vedoucí práce) ; Fátorová, Ilona (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Bc.Markéta Kupčová Vedoucí: Doc. RNDr. Miroslav Pecka CSc. Konzultant: Mgr. Filip Vrbacký Název diplomové práce: Zavedení nových metod detekce vybraných polymorfismů u pacientů s chronickou myeloidní leukémií léčených Imatinib mesylátem. Chronická myeloidní leukémie je nádorové onemocnění krvetvorby charakteristické přítomností BCR/ABL fúzního genu s patologickou tyrozinkinázovou aktivitou, která způsobuje neřízenou proliferaci především buněk granulocytární řady. Revoluci v léčbě této choroby, ale také v prognóze, zaznamenal objev inhibitorů tyrozinkináz, které se v posledních letech používají s velkým úspěchem. Prvním z inhibitorů byl Imatinib mesylát, který tlumí aktivitu této tyrozinkinázy, nicméně u některých pacientů dochází k rezistenci a k selhání léčby, což může být způsobeno řadou vlivů, mezi které patří i polymorfismy v genech zodpovědných za transport a metabolizmus této látky. Pro diplomovou práci proto byly vybrány geny ABCB1, ABCG2, SLC22A1 a CYP3A5, jejichž produkty se podílejí na transportu a biotranformaci Imatinib mesylátu. U těchto genů byla provedena genotypizace vybraných jednonukleotidových polymorfismů pomocí alelické diskriminační PCR v reálném čase s...
|
|
|
Laboratorní diagnostika trombofilních stavů
Studená, Šárka ; Blažek, Martin (oponent) ; Pecka, Miroslav (vedoucí práce)
SOUHRN Prace pojednava o vyskytu trombofilnich stavů a o možnostech jejich diagnostiky u žen s rekurentnimi spontannimi aborty. Ve studii byl zpracovan soubor žen vedenych v hematologicke poradně II. Interni kliniky - Odděleni klinicke hematologie FN a LFUK v Hradci Kralove v letech 1995 - 2007. U dřive vyšetřovanych žen jsem použila archivni data. Vyšetřovani žen, ktere byly zařazeny do sestavy v poslednich letech, jsem se sama aktivně zučastnila. Při zpracovani sledovaneho souboru byla použita nasledujici kriteria, ktera by podle našich představ vychazejicich z literarnich pramenů, měla posoudit zavažnost trombofilniho stavu, připadně zaznamenat zvyšenou incidenci jeho zachytu: věk - v teto časti jsme použili median věku žen ze sledovaneho souboru počet prodělanych abortů - tento parametr ma poměrně značnou vypovědni hodnotu, ale je nutne přihližet k celkove delce těhotenstvi, po jejimž uplynuti k abortu dochazi (v prvnim trimestru se považuje za vyznamny až prodělany třeti abort a v druhem trimestru prodělany druhy abort). počet narozenych děti - riziko spontanniho abortu se s každym dalšim narozenym ditětem zvyšuje doba uživani antikoncepce - uživani antikoncepce může již v mladem věku odhalit sklon k trombofilnimu stavu. S delkou uživani by se riziko spontanniho abortu u žen se sklonem k...
|
|
|
Prognostický význam transkripce genu pro angiopoietin-2 u chronické lymfocytární leukémie
Gradošová, Iveta ; Pecka, Miroslav (vedoucí práce) ; Smolej, Lukáš (oponent)
Chronická B-lymfocytární leukémie (B-CLL) je nejčastěji se vyskytující leukémie u dospělých, která je charakteristická vysoce variabilním průběhem choroby. Podle poznatků z posledních let je patrné, že se na její patogenezi významně podílí angiogeneze. Jedním z důležitých cytokinů účastnících se tohoto procesu je angiopoietin-2 (Ang-2), jehož zvýšená aktivita byla pozorována u některých hematologických malignit. Údajů týkajících se Ang-2 u CLL je však velmi málo. V průběhu své práce jsem měřila množství transkriptu pro Ang-2 pomocí kvantitativní PCR v reálném čase u 24 neléčených pacientů s CLL. Pro normalizaci rozdílů v koncentraci templátu mezi jednotlivými vzorky byl použit transkript kontrolního genu Abl1. U 10 pacientů byla zjištěna zvýšená koncentrace mRNA pro Ang-2 (poměr Ang-2/Abl1 > 5x10-3 ). U ostatních 14 pacientů bylo množství transkriptu pro Ang-2 nízké či nedetekovatelné (poměr Ang-2/Abl1 < 5x10-3 nebo Cp pro Ang-2 > 35). Získané hodnoty byly následně porovnány metodou X2 s dalšími prognostickými faktory (mutační stav IgVH, exprese CD38 a ZAP70), stádiem onemocnění dle Raie a průběhem onemocnění. Exprese ZAP-70 a CD38 byla analyzována průtokovou cytometrií. Mutační stav IgVH byl stanoven z cDNA standardní metodou využívající databázi IgBLAST. Statistickým vyhodnocením získaných dat...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.