|
|
Oligosacharidy hyaluronanu a jejich biologická funkce
Kučerová, Barbora ; Netopilová, Miloslava (oponent) ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra fyziky a fyzikální chemie Kandidát: Bc. Barbora Kučerová Školitel: Doc. Ing. Alice Lázníčková, CSc. Název diplomové práce: Oligosacharidy hyaluronanu a jejich biologická funkce Ve své kompilační diplomové práci shromažďuji informace o oligosacharidech hyaluronanu. Přestože se hyaluronan v těle nachází většinou v dlouhých řetězcích, můžeme ho zde nalézt i ve formě malých fragmentů - oligosacharidů. Tyto oligosacharidy vykazují jiné vlastnosti než hyaluronanové polymery. Oligosacharidy hyaluronanu lze v laboratoři připravovat, separovat a analyzovat různými metodami. Velké molekuly lze rozbít na fragmenty chemickými, fyzikálními či enzymatickými způsoby. K následné separaci a purifikaci se využívají především chromatografické metody. Pro konečnou analýzu se jako nejvhodnější ukázaly elektroforetické metody či hmotnostní spektrometrie. V těle probíhá neustálý metabolizmus hyaluronanu. Syntézy se účastní hyaluronan syntáza a pro člověka důležitou biodegradaci obstarává několik druhů hyaluronidáz. Na interakci hyaluronanu s buňkami se podílí různé receptory. Specifický receptor pro hyaluronan je CD44, který váže jak velké polymery, tak oligosacharidy o více než čtyřech jednotkách. V těle jsou však přítomny i další receptory...
|
|
|
Establishment of CD method for studies of amyloid-oligomerization process during Alzheimer disease
Vilímová, Jana ; Kubíček, Vladimír (oponent) ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce)
Jedním z hlavních znaků Alzheimerovy nemoci jsou senilní plaky, nacházející se v mozku. Plaky jsou tvořeny z fibril, které za patologických podmínek vznikají oligomerizací z Aβ. Jednou z možných terapii Alzheimerovy nemoci je zastavení nebo zpomalení procesu oligomerizace. Pro experiment byla použita optická metoda, CD-spektrometrie, která umožnuje sledovat změny v sekundární struktuře proteinu. V rámci této práce byla CD- metoda použita k monitorování oligomeračního procesu syntetického Aβ. Pro validaci metody byl testován vliv různých rozpouštědel ( EtOH, MeOH and DMSO) na CD- spektra a byla ustanovena koncentrace Aβ 42. Dále bylo zkoumáno, zda přidání desintegračních sloučenin ( přírodních sloučenin, fluorescenčních barviv a antibiotik) má vliv na zpomalení oligomerizačního procesu Aβ 42. Pro každou testovanou látku byl také připraven kontrolní vzorek. Experiment probíhal při teplotě 37 řC a měřilo se v určitých intervalech (0, 7, 24, 48). Závěrem, použité inhibitory vykazují koncentračně závislý inhibiční efekt na Aβ 42. Tím bylo dokázáno, že CD-metoda může být použita pro detekci vlivu sloučenin na Aβ-oligomerizaci a navíc pro objevování nových substancí, které by mohli být potenciálními léčivy AD.
|
|
|
Studium radioaktivního značení hyaluronové kyseliny oxidativní jodací
Dvořáčková, Eliška ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Eliška Dvořáčková 2009 Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie V ramci teto prace byla prostudovana literatura, tykajici se vlastnosti a využiti kyseliny hyaluronove a metod radioaktivniho značeni sloučenin se zaměřenim na jodaci. V experimentalni časti prace byly vyzkoušeny dvě metody oxidativni jodace hyaluronove kyseliny modifikovane tyraminem s nejnižšim stupněm modifikace ( HA - Tm - 1 ). Prvni použita chloraminova metoda se ukazala jako nevhodna, diky přitomnosti oxidačniho činidla ve fazi s hyaluronovou kyselinou došlo k častečnemu štěpeni řetězce značene latky. Dalši metoda jodace s použitim jodogenu, je reakci heterogenni, kdy je oxidačni činidlo přitomno jako ve vodě nerozpustny odparek na stěnach reakčni nadobky. Tento způsob značeni byl proto k hyaluronove kyselině mnohem šetrnějši. Zastaveni reakce bylo provedeno nanesenim reakčni soustavy na kolonu se Sephadexem G - 50, kde došlo k odděleni označene sloučeniny od agresivniho reakčniho prostředi. Ukazalo se, že tento způsob přečištěni značeneho produktu neodstrani z roztoku zbytky radioaktivniho jodidu, proto bylo provedeno promyti značene hyaluronove kyseliny přes filtr se sraženinou chloridu střibrneho. Pro stanoveni radiochemicke čistoty a stability značeneho produktu byla...
|
|
|
Studium stability monoklonální protilátky nimotuzumab modifikované chelátorem DOTA radioaktivně značené luteciem-177 ([177Lu]Lu-hR3(p-SCN-Bn)DOTA)
Petřík, Michal ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Zvýšená exprese genu pro receptor epidermálního růstového faktoru (EGF) a tím zvýšený počet receptorů (EGFR) na povrchu buněk úzce souvisí s nádorovým bujením těchto buněk a s nepříznivou prognózou pro pacienty s rakovinou. Z tohoto důvodu se EGFR staly jedním z hlavních terčů v terapii nádorů. Nimotuzumab (také známý jako h-R3) je humanizovaná monoklonální protilátka, která blokuje receptor pro epidermální růstový faktor. Předmětem této práce bylo stanovení radiochemické čistoty této protilátky konjugované s bifunkčním chelátorem DOTA a označené pomocí luthecia, případně její přečištění, a dále stanovení její stability v různých prostředích, v acetátovém pufru pH = 7, v prostředí nadbytku konkurenčního ligandu EDTA a v potkaní plazmě. Pro tyto úkoly byly použity vhodné analytické metody: vysokoúčinná kapalinová chromatografie, gelová permeační chromatografie a chromatografie na tenké vrstvě. Výsledky práce ukázaly, že tento způsob modifikace pro radioaktivní značení není vhodný pro velké bílkovinné struktury jako je Nimotuzumab.
|
|
| |
|
|
Použití polarizovaného světla ke studiu interakcí látek v roztocích I
Otradovská, Zuzana ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Tato rigorózní práce se zabývá studiem interakcí mezi laurylsíranem sodným a organickým barvivem neutrální červení s využitím fluorescenční spektroskopie. Cílem této práce bylo navázat na výsledky mé diplomové práce a ověřit interakci tenzidu a organického barviva v roztocích další metodou. Měření má sloužit jako úvodní studie pro eventuální využití fluorescenčních měření s polarizovaným světlem v biomedicínském a gerontologickém výzkumu. Studium roztoků poskytlo velmi zajímavé výsledky, které nasvědčují tvorbě agregátů. Z výsledků však nelze určit, zda vznikají agregáty vysoce uspořádané či neuspořádané.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Vliv elektrolytů na CMC
Šmerdová, Jana ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Souhrn V této diplomové práci bylo použito UV-VIS absorpční spektrofotometrie k měření CMC katonických tenzidů a vlivu elektrolytů na CMC. Dosažené výsledky potvrzují očekávaný trend poklesu hodnot CMC tenzidů se stoupající iontovou silou roztoků. Použitá modifikace metody UV-VIS absorpční spektrofotometrie pro stanovení CMC byla rovněž úspěšná.
|
host ::
RSS.