|
|
Hodnocení transkarbamu 12 a jeho nečistot pomocí HPLC s MS detekcí
Folbrová, Jana ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Hodnocení Transkarbamu 12 a jeho nečistot pomocí HPLC s MS detekcí Rigorózní práce Mgr. Jana Folbrová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové Tato práce se zabývá hodnocením Transkarbamu 12 (T 12), jeho tří nečistot ε-aminokapronové kyseliny (Ak), ε-kaprolaktamu (Ka) a aduktu T 12 a Ak, a vnitřního standardu, což je kyselina 8- aminooktanová (Ao). Transkarbam 12 je relativně nová látka patřící mezi akceleranty transdermální penetrace. Tato skupina látek usnadňuje nebo umožňuje přestup léčiv přes kožní bariéru do systémové cirkulace. Byly optimalizovány podmínky pro hodnocení uvedených látek metodou založenou na spojení HPLC a MS s ESI iontovým zdrojem. Přímým nástřikem byla zjištěna MS a MS/MS spektra všech látek a byly vyladěny podmínky jejich detekce. K separaci byla použita analytická kolona Luna Phenyl-Hexyl (5 μm, 150 x 3.0 mm). Jako mobilní fáze byla použita směs voda/acetonitril s obsahem 0.025 % kyseliny mravenčí. Účinné separace všech látek bylo dosaženo při užití gradientové eluce s následujícím profilem: 0. - 1. min 4 % acetonitril; 1. - 25. min 4 → 55 % acetonitril; 25. - 30. min 4 % acetonitril. Retenční časy jednotlivých látek byly následující: Rt (Ak) = 1.84 min; Rt (Ao) = 2.82 min; Rt...
|
|
|
Identification of related compounds by GC-MS
Kušnír, Jaroslav ; Vrbatová, Ivana (oponent) ; Kučera, Radim (vedoucí práce)
Identifikace příbuzných látek pomocí GC-MS Diplomová práca Jaroslav Kušnír Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra charmaceutické chemie a kontroly léčiv Bola zisťovaná molekulová hmotnosť za účelom identifikácie troch nečistôt, ktoré boli zistené v substancií 1,3-butandiolu pri analýze pomocou GC/FID. Pre zisťovanie molekulovej hmotnosti sa využila technika GC/MS. K ionizácií vzorky boli použité nasledujúce techniky - elektrónová ionizácia, chemická ionizácia pomocou ionizačného plynu methanu a isobutanu. K získaniu stabilnejšieho molekulárneho iontu boli skúšané aj rôzne typy derivaizačných reakcií (napr. acetylácia). Výsledky neboli však uspokojivé. Ako najlepšia metóda pri zisťovaní molekulovej hmotnosti nečistôt sa ukázala chemická ionizácia pomocou ionizačného plynu isobutanu. Ten je šetrnejší ionizačný plyn ako je methan a preto sa v hmotnostnom spektre môže objaviť intenzívnejší iont (M+H)+ , z ktorého sa dá určiť molekulová hmotnosť. Okrem zisťovaní molekulových nečistôt sa skúmali aj najlepšie podmienky pri používaní ionizačného plynu isobutanu v GC/MS. Z meraní vyšlo, že najlepšie podmienky sú pri tlaku plynu 80 kPa a zvýšeného napätia na detektore o 0,4 kV oproti základnému nastaveniu. Boli stanovené molekulové hmotnosti všetkých troch študovaných...
|
|
|
Využití separačních metod v analýze léčiv II
Ferebauerová, Markéta ; Kastner, Petr (oponent) ; Kučera, Radim (vedoucí práce)
SOUHRN Využití separačních metod v analýze léčiv II Diplomová práce Markéta Ferebauerová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Tato diplomová práce shrnuje poznatky o analýze léčiv plynovou chromatografií a o validaci analytické metody. Byla studována směs látek, obsahující 1,3-butandiol, glycerol a dvě další složky. Při validaci metody byla zkoumána a zároveň potvrzena selektivita, linearita, přesnost a správnost metody. V rámci robustnosti byly měněny tyto chromatografické parametry: rychlost průtoku nosného plynu, splitovací poměr, nosný plyn, stabilita, teplota detektoru, teplota nástřiku a teplota na koloně Bylo prokázáno, že metodu nejvíce ovlivňují tyto faktory: rychlost průtoku mobilní fáze a teplota kolony v úseku 1. Bylo potvrzeno, že vzorek nepodléhá rozkladu po dobu 24 hodin.
|
|
|
Development of an LC-MS method for determination of new antimalarial drugs in biological matrices.
Klimeš, Jiří ; Kučera, Radim (oponent) ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce)
Artemisin a jeho deriváty, především artesunat, jsou nejdůležitější skupinou léků používaných v klinické praxi v léčbě malárie. Významná a charakteristická je pro ně endoperoxidická skupina. WHO doporučuje tyto látky v kombinaci s jinými déle působícími antimalariky (lumefantrinem, piperaquinem) jako léky volby. Jelikož ve struktuře těchto látek chybí UV nebo fluorescentně detekovatelné chromofory, dřívější metody pro stanovení těchto látek využívaly post-column on line derivatizaci nebo elektrochemickou detekci v redukujícím módu. Tyto metody ovšem vykazovaly malou selektivitu a sensitivitu. V rámci této práce byl proveden kompletní vývoj LC-MS metody pro stanovení artesunatu a jeho hlavního metabolitu dihydroartemisinu v biologických vzorcích. Vývoj zahrnoval tyto části: ladění ESI - triple quadrupole hmotového spektrometru a optimalizaci chromatografických podmínek, především pak pH a složení mobilní fáze. Artesunat (ARST) a dihydroartemisin (DHA) byly stanovovány v lidské plasmě za použití artemisinu jako vnitřního standardu. Různé úpravy vzorků plasmy, a to liquid-liquid extrakce a protein precipitace, byly optimalizovány a porovnány. Na základě prevalidačních údajů byl zjištěn spodní limit kvantifikace při úpravě liqud-liquid extrakcí 2,5 a 3,0 ng/ml pro DHA a ARST za použití 400 μl plasmy....
|
|
|
Stanovení kyseliny valproové metodou kapilární plynové chromatografie s hmotnostní detekcí
Šillerová, Tereza ; Kučera, Radim (oponent) ; Kastner, Petr (vedoucí práce)
SOUHRN Kyselina valproová je chemickou látkou jednoduché struktury a širokého terapeutického účinku. V první řadě je využívána k léčbě epilepsie, bipolární afektivní poruchy a vyjímečně k léčbě depresí. Hladiny kyseliny valproové v séru musí být stanovovány pro její úzké terapeutické rozmezí a riziko interakce s jinými léky. Proto byla vyvinuta nová senzitivní analytická metoda využívající kapilární plynové chromatografie s hmotnostní detekcí ke stanovení hladin kyseliny valproové v humáním séru (vnitřním standardem je kyselina kaprylová). Výsledky ukázaly, že nová metoda je lineární v rozmezí koncentrací 0,96 - 967,38 µmol/l, které zahrnuje terapeutické rozmezí (367 - 693 µmol/l) kyseliny valproové. Metoda byla srovnána s fluorescenční polarizační imunoanalýzou (FPIA) pro stanovení kyseliny valproové v humáním séru pomocí Passing-Bablokovi regresní analýzy a Bland-Altmanova rozdělovacího diagramu. Statistická analýza potvrdila, že nová metoda je vhodná pro stanovení hladin kyseliny valproové v reálných vzorcích séra. Validovaná metoda může být využita k rutinní analýze vzorků sér pacientů.
|
|
|
Využití plynové chromatografie v kontrole léčiv IV
Kratochvílová, Eva ; Kovaříková, Petra (oponent) ; Kučera, Radim (vedoucí práce)
Využití plynové chromatografie v kontrole léčiv IV. Diplomová práce Eva Kratochvílová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Heyrovského 1203, Hradec Králové Tato diplomová práce se zabývá validací analytické metody pro stanovení nečistot v 1,3- butandiolu plynovou chromatografií. Stanovení optimálních separačních parametrů- teploty na koloně, teplotního gradientu, rychlosti průtoku nosného plynu a splitovacího poměru umožní ideální separaci píku 1,3-butandiolu a nečistot, které jsou v něm obsaženy. Pro kvantifikaci složek vzorku byla testována metoda vnitřního standardu a metoda normalizace. Normalizační metoda byla dále validována. Validace metody zahrnuje linearitu, přesnost, reprodukovatelnost, robustnost, LOD a LOQ. Nalezená metoda splňuje všechny požadavky na tyto parametry. Stabilita vzorku 1,3-butandiolu byla potvrzena sérií měření během 24 hodin.
|
|
|
Využití HPLC v analýze léčiv III
Václavková, Jana ; Kovaříková, Petra (oponent) ; Kučera, Radim (vedoucí práce)
Diplomová práce Využití HPLC v analýze léčiv III Jana Václavková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Vysokoúčinná kapalinová chromatografie je jednou z nejprogresivnějších separačních a analytických metod. Alternativou ke klasickým stacionárním silikagelovým fázím jsou fáze založené na oxidu zirkoničitém s výhodnějšími chemickými vlastnostmi. Cílem této diplomové práce bylo převedení podmínek separace z kolony ZirChrom® -PBD na kolonu Zirchrom® -MS a umožnit tak propojení s hmotnostním detektorem. Během optimalizace bylo pracováno s různými typy pufru (hydrogenfosforečnan, octan amonný), koncentracemi pufru, se složením mobilní fáze (rozpouštědlo: acetonitril, methanol). Pro separaci ondansetronu a jeho pěti nečistot byly zjištěny tyto optimální podmínky: mobilní fáze složená z acetonitrilu a 5 mM octanového pufru (pH 7), 0-4 min. (40 : 60, V/V), 4-5 min. (40→50 : 60→50, V/V), 5-21 min. (50 : 50, V/V), 21-25 min. (50→40 : 50→60, V/V). Analýza probíhala při teplotě 40 řC a rychlosti průtoku 0,5 ml/min. Detekce byla provedena při vlnové délce 216 nm. Celková doba separace trvala 20 minut.
|
|
|
Využití HPLC v analýze léčiv I
Kalafut, Peter ; Kučera, Radim (vedoucí práce) ; Kovaříková, Petra (oponent)
Kurkumín a jeho deriváty patria medzi farmakologicky účinné diarylheptanoidové zlúčeniny. Získavajú sa z rastlinných oddenkov rodu Curcuma spp. (Zingiberaceae), ktoré sú rozšírené v tropických regiónoch juhovýchodnej Ázie. Posledné desaťročia sa farmaceutická droga dostáva do povedomia vedeckých pracovníkov. Dokázali sa zaujímavé účinky na ľudský organizmus. Terapeuticky sa využíva cholagogický, antioxidačný a antiflogistický účinok. V posledných rokoch sa záujem orientuje na prevenciu a liečbu rakoviny a priaznivý vplyv pri Alzheimerovej chorobe. Po perorálnom podaní však dosahuje systémový obeh iba nepatrné množstvo kurkumínu. V predkladanej práci sme vypracovali HPLC metódu stanovenia kurkuminoidov. Najlepším spôsobom extrakcie kurkumínových farbív z rastliny alebo extraktu je použitie metanolu ako pomerne polárneho rozpúšťadla. Vo vode je kurkumín prakticky nerozpustný. V alkalických vodných roztokoch sa prejavuje prítomnosť troch slabo kyslých vodíkov. Výslednú ionizáciu dokumentuje zmena farby roztoku zo žltej na červenú. Tieto podmienky pôsobia nepriaznivo na stabilitu kurkumínu - čiastočne je možné degradácii zabrániť použitím antioxidačnej látky a uchovávaním roztoku v tme. Analýza prebehla na kolóne Symmetry RP C18 metódou vonkajšieho štandardu. Použitá mobilná fáza bola zmesou...
|
|
|
HPLC analysis of drug candidates from the group of aroylhydrazones II.
Stariat, Ján ; Kovaříková, Petra (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
1. ABSTRAKT Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je v oblasti liečiv jednou z najčastejšie používanou analytickou technikou. Železo je dôležitým biogénnym prvkom, no napriek tomu jeho zvýšené množstvo v organizme pôsobí toxicky. Výskum vysoko selektívnych a účinných biokompatibilných chelátorov železa bol pôvodne inšpirovaný potrebou mobilizovať železo v tkanivách s chronickým preťažením železa. Avšak v posledných rokoch je pozornosť venovaná využitia chelátorov železa tiež pri liečbe bežných onemocnení. Salicylaldehyd isonicotinoyl hydrazon (SIH), biokompatibilný chelátor železa odvodený od aroylhydrazonu, je v dnešnej dobe predmetom aktívneho výskumu ako potenciálne liečivo. Okrem schopnosti viazať železo, vykazuje aj ďalšie zaujímavé farmakologické účinky: antioxidačný, antiproliferatívny, kardioprotektívny, antimalarický a antimikróbny. Táto práca sa zaoberá vypracovaním optimálnych chromatografických podmienok HPLC separácie SIH a jeho potenciálnych metabolitov (isoniazid, acetylisoniazid, salicylaldehyd) a následne využitia tejto separácie k štúdiu možnosti izolácie uvedených látok z moči králika pomocou SPE ako úpravy vzorku. Najlepšia chromatografická analýza bola dosiahnutá použitím kolóny od firmy Phenomenex (2504,6 mm I. D.) s náplňou Prodigy 5u ODS3 100A (5 μm). Mobilná fáza bola v...
|
|
|
Využití alternativních stacionárních fází v HPLC analýze léčiv
Holásková, Petra ; Kovaříková, Petra (oponent) ; Kučera, Radim (vedoucí práce)
Rigorózní práce Využití alternativních stacionárních fází v HPLC analýze léčiv Mgr. Petra Holásková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Rozpustnost silikagelu při vyšším pH mobilní fáze vedlo k vývoji alternativních HPLC kolon na bázi oxidů kovů (oxidu titaničitého, oxidu hlinitého), zejména pak oxidu zirkoničitého. Jeho vlastnosti, především chemická odolnost a separační účinnost, byly vyzkoušeny v naší práci, kdy jsme studovali alternativní stacionární fáze pro kvalitativní a kvantitavní analýzu doxazosinu a jeho pěti nečistot. Vzhledem k nízké retenci a dostatečné selektivitě se jako nejvhodnější jevil oxid zirkoničitý modifikovaný polystyrenem. Doba separace trvala do 16-ti minut. Výsledné chromatografické podmínky byly následně validovány.
|
host ::
RSS.