|
|
Monitorování toxikologických testů
Rosecká, Michaela ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Horstkotte, Burkhard (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Michaela Rosecká Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Monitorování toxikologických testů Cílem této práce bylo monitorování kinetických profilů permeace fluorescenčního markeru přes monovrstvu buněk (MDCKII-MDR) pomocí sekvenční injekční analýzy. K tomuto účelu byl využit nový typ cely, který umožňuje měření ze 2 kompartmentů - donorového a akceptorového. Cela byla během experimentu termostatována na 37řC a obsah akceptorového kompartmentu byl nepřetržitě míchán. Experiment byl vždy několikrát opakován, aby byla zajištěna opakovatelnost interakce látky s membránovým transportérem. Inserty s monovrstvou buněk MDCKII-MDR byly po každém experimentu vyměněny. Buňky použité v tomto experimentu měly geneticky modifikovaný P-glykoprotein. K on-line monitorování extracelulárního transportu byl využit Rhodamin 123 jakožto fluorescenční marker. Kinetika průchodu tohoto markeru byla sledována pomocí plně automatizovaného systému sekvenční injekční analýzy, a to v pětiminutových intervalech vždy po dobu 120 minut. Vzorek byl vždy v jednom cyklu odebírán z donorového kompartmentu, v následujícím cyklu pak z kompartmentu akceptorového. Dále byl zkoumán vliv inhibitoru...
|
|
|
Spectrophotometric determination of chlorhexidine in mouthwash employing Lab-In-Syringe automated ion-pair extraction and back-extraction
Řeháková, Pavla ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Pavla Řeháková Školitel: Dr. Burkhard Horstkotte, Ph.D., M.Sc. Konzultant: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Spektrofotometrické stanovení chlorhexidinu v ústní vodě s využitím extrakce iontového asociátu a zpětné extrakce automatizované v systému Lab-In-Syringe Práce popisuje disperzní kapalinovou mikroextrakci pomocí magnetického míchadla (MSA-DLLME), která je automatizována technikou Lab-In-Syringe. MSA-DLLME je založena na míchání vzorku s nemísitelným rozpouštědlem pomocí magnetického míchadla za účelem rozptýlení rozpouštědla na jemné kapky, což vede k podpoře extrakčního procesu. Magnetické míchadlo je umístěno uvnitř rezervoáru pístového čerpadla, který je použit jako extrakční komora. Pro umožnění použití extrakčního rozpouštědla, které je lehčí než voda, bylo v této práci pístové čerpadlo otočeno ústím dolů. Tato metoda byla navržena a optimalizována pro stanovení chlorhexidinu v komerčních vzorcích ústní vody. Aby byla extrakce umožněna, bylo potřeba vytvořit iontový pár chlorhexidinu s činidlem methyloranž. Po extrakci iontového páru do organického rozpouštědla byla k roztoku přidána kyselina chlorovodíková, do které byl analyt zpětně extrahován za účelem dosažení...
|
|
|
Automatizace metody extrakce pevnou fází pro stanovení flavonoidů s využitím průtokového systému
Krovová, Tereza ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Tereza Krovová Školitel: M.Sc. Burkhard Horstkotte, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Ivana Horstkotte Šrámková, Ph.D. Název diplomové práce: Automatizace metody extrakce pevnou fází pro stanovení flavonoidů s využitím průtokového systému Tato diplomová práce se zabývala vývojem a optimalizací metody pro automatizovanou extrakci tuhou fází v průtokovém systému s využitím platformy Lab- On-Valve pro stanovení flavonoidů. Extrakce tuhou fází provedená technikou bead injection byla následována spektrofotometrickou detekcí v UV oblasti. Metoda byla optimalizována pro stanovení kvercetinu a jeho pěti metabolitů: rutinu, kyseliny 3,4-dihydroxyfenyloctové, kyseliny homovanilové, kyseliny 3-(3- hydroxyfenyl)propionové a 4-methylkatecholu. Mezi optimalizované parametry patřil výběr vhodného sorbentu pro extrakci, množství tohoto sorbentu pro tvorbu kolonky, pH dávkovacího pufru, složení elučního činidla a promývacího roztoku, průtokové rychlosti pro dávkování a vymývání vzorků, objem vzorku, poměr vzorku a pufru a vliv okyselení vzorku. Optimalizace metody na stanovení flavonoidů byla provedena na standardních roztocích a nyní je připravena pro aplikaci na biologických vzorcích.
|
|
|
Spectrophotometric determination of chlorhexidine in mouthwash employing Lab-In-Syringe automated ion-pair extraction and back-extraction
Řeháková, Pavla ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Pavla Řeháková Školitel: Dr. Burkhard Horstkotte, Ph.D., M.Sc. Konzultant: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Spektrofotometrické stanovení chlorhexidinu v ústní vodě s využitím extrakce iontového asociátu a zpětné extrakce automatizované v systému Lab-In-Syringe Práce popisuje disperzní kapalinovou mikroextrakci pomocí magnetického míchadla (MSA-DLLME), která je automatizována technikou Lab-In-Syringe. MSA-DLLME je založena na míchání vzorku s nemísitelným rozpouštědlem pomocí magnetického míchadla za účelem rozptýlení rozpouštědla na jemné kapky, což vede k podpoře extrakčního procesu. Magnetické míchadlo je umístěno uvnitř rezervoáru pístového čerpadla, který je použit jako extrakční komora. Pro umožnění použití extrakčního rozpouštědla, které je lehčí než voda, bylo v této práci pístové čerpadlo otočeno ústím dolů. Tato metoda byla navržena a optimalizována pro stanovení chlorhexidinu v komerčních vzorcích ústní vody. Aby byla extrakce umožněna, bylo potřeba vytvořit iontový pár chlorhexidinu s činidlem methyloranž. Po extrakci iontového páru do organického rozpouštědla byla k roztoku přidána kyselina chlorovodíková, do které byl analyt zpětně extrahován za účelem dosažení...
|
|
|
Study of size selectivity measurement of cell subpopulations using field-flow fractionation
Prokofeva, Daria ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Daria Prokofeva Školitel: Burkhard Horstkotte, Ph.D., M.Sc. Konzultant: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová Ph.D. Název práce: Studium měření selektivity velikosti buněčných subpopulací pomocí frakcionace tokem v poli Byla zkoumána účinnost buněčné separace sedimentační frakcionací tokem v poli (SdFFF) prostřednictvím buněčné izolace a další charakterizace separovaných frakcí. V této práci byla testována jen SdFFF. Jako analyt byly použity kolorektální rakovinné (CRC) buněčné linie -WiDr, HCT116. Polydisperzní heterogenní buněčná populace, jako CRC buněčná linie, obsahuje buňky v různých vývojových stadiích diferenciace, včetně rakovinných kmenových buněk, jež jsou pravděpodobně zodpovědné za rakovinné bujení a terapeutickou účinnost léčby. SdFFF byla pro získání subpopulací (frakcí) kolorektálních rakovinných buněk použita v tzv. nadvrstevním režimu a následně byla studována účinnost velikost-zavislé separace a byla provedena charakterizace parametrů metody. V prvním kroku byly získány buněčné subpopulace pomocí kolekce buněk z různých pozic elučního píku. Získané subpopulace byly zpětně nastřikovány do SdFFF přístroje za účelem ziskani elučního profilu každé frakce. Změřená průměrná velikost a retenční čas...
|
|
|
Comparison of manual and dynamic extractions of selected transition metals from solid samples
Kucharčíková, Vendula ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Horstkotte Šrámková, Ivana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Vendula Kucharčíková Školitel: Burkhard Horstkotte Konzultant: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání manuální a dynamické extrakce vybraných přechodných kovů z pevných vzorků Analýza stopových kovů v půdě je předmětem studií mnoha laboratoří. Díky rozsáhlým průmyslovým zónám může být půda vysoce kontaminována. Tato práce se soustředila na dvě jednoduché metody - manuální extrakci a průtokovou extrakci se stejným extraktantem - kyselinou octovou. Dvě metody, dvě koncentrace a dva vzorky byly použity k vyhodnocení nejvýhodnějších podmínek. Jako detekční zařízení byla vybrána optická emisní spektrometrie s indukčně vázanou plazmou a dvě vlnové délky k zabránění interferencí. Manuální extrakce byla více časově náročná a hůře opakovatelná než ta dynamická. Vyšší koncentrace kyseliny octové (0,43 M) extrahovala vyšší množství kovů a extrakce vykazovala vyšší opakovatelnost výsledků. U obou půd kontaminace mědí přesáhla maximální povolené množství tohoto kovu (podle požadavků vlády Baleárských ostrovů) a jsou potenciálně kontaminované.
|
|
|
Setup and characterization of an automated method for salt-assisted dispersive liquid-liquid microextraction using a Lab-in-Syringe system
Bešťák, Ondřej ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ondřej Bešťák Školitel: Dr. Burkhard Horstkotte, Ph.D., Ms.C. Konzultant: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Setup and characterization of an automated method for salt-assisted dispersive liquid-liquid microextraction using a lab-in-syringe system Sekvenční injekční analýza (SIA) je technika odvozená od Průtokové injekční analýzy. Systém se zpravidla skládá z počítačem řízené stříkačkové (pístové) pumpy, selekčního ventilu a detektoru, kdy je vše spojeno systémem inertních plastových trubiček. Používá se k automatizaci laboratorních procedur. Technika "Laboratoř-ve-stříkačce" je modifikací SIA, která se používá k vykonání částí experimentu v prostoru ve stříkačkové pumpě. Za použití magneticky poháněné míchací tyčinky potažené vrstvou PTFE ve stříkačce je například možné homogenně smísit obsah stříkačky nebo provést různé extrakční protokoly jako je disperzní mikro-extrakce v systému kapalina-kapalina (DLLME). V této práci je poprvé zkoumán a hodnocen přístup k vysolovací, ve stříkačce prováděné DLLME. Počínaje v jednofázovém systému, analyt byl extrahován z vody do n-propanolu. Pro toto byl použit vysoce koncentrovaný roztok síranu hořečnatého za účelem zvýšení polarity vodné...
|
|
|
Set-up and optimization of automated in-syringe extraction of trace metals for ICP measurement
Fikarová, Kateřina ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Fikarová Školitel: Burkhard Horstkotte, Ph.D., M.Sc. Konzultant: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová Ph.D. Název práce: Sestavení a optimalizace automatické "in-syringe" extrakce stopového množství kovů pro ICP detekci. Znečištění životního prostředí těžkými kovy musí být monitorováno citlivými metodami, kvůli jejich možnému nahromadění v lidském těle a toxickému efektu na lidské zdraví. Disperzní kapalinová mikroextrakce následována zpětnou extrakcí byla poprvé studována s použitím automatické techniky "Lab-In-Syringe" pro stanovení kadmia, mědi a olova pomocí emisní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem (ICP-AES). Metoda byla automatizována pomocí systému pro sekvenční injekční analýzu, konkrétně obousměrné pístové čerpadlo bylo použito jako extrakční jednotka. Magnetické míchadlo bylo použito pro míchání obsahu pístového čerpadla a k vytvoření disperze extrakčního činidla ve vodné fázi. Motor, který byl opatřen neodymovými magnety, byl použit jako zdroj otáčivého magnetického pole a byl ovládán softwarem, proto mohl být zastaven během oddělování fází. Po sestavení a nastavení systému následovalo předběžné testování a výběr činidel. Pyrolidin dithiokarbamát amonný (APDC) byl vybrán jako...
|
|
|
Separace vybraných anorganických iontů pomocí sekvenční injekční chromatografie
Jarošová, Patrícia ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Patrícia Jarošová Školitelia: Dr. Burkhard Horstkotte, Ph.D., M.Sc. Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Separace vybraných anorganických iontů pomocí sekvenční injekční chromatografie Bola skúmaná schopnosť predkolóny Dionex Ionpac® CG5A (2 x 50 mm, P/N 046104) separovať niektoré katióny prechodných kovov vo vzorke vody, za použitia systému sekvenčnej injekčnej chromatografie (SIC). Použitá separácia bola iónovo výmenná, kolónu tvorili častice pokryté dvojvrstvou funkčného latexu schopného vymieňať katióny aj anióny. Ako chelatačné činidlo v mobilnej fáze bola použitá pyridín-2,6-dikarboxylová kyselina (PDCA) a reakčné činidlo obsahovalo 4-(2-pyridylazo) resorcinol (PAR). Detekcia prebiehala spektrofotometricky. Pri optimalizácií boli použité dve metódy: simplex a univariantná metóda. Boli nájdené ideálne podmienky pre separáciu. Mobilná fáza pozostávala z PDCA v koncentrácií 4 mmol/l, kyseliny mravčej v koncentrácií 40 mmol/l, síranu sodného v koncentrácií 4 mmol/l a hydroxidu sodného v koncentrácií 2 mmol/l. Reakčné činidlo bolo zložené z PAR (0,3 mmol/l), hydroxidu amónneho (150 mmol/l), hydrogenuhličitanu sodného (60 mmol/l) a hydroxidu sodného (45 mmol/l). Vzorka o...
|
|
|
Separace vybraných anorganických iontů pomocí sekvenční injekční chromatografie
Jarošová, Patrícia ; Horstkotte, Burkhard (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Patrícia Jarošová Školitelia: Dr. Burkhard Horstkotte, Ph.D., M.Sc. Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Separace vybraných anorganických iontů pomocí sekvenční injekční chromatografie Bola skúmaná schopnosť predkolóny Dionex Ionpac® CG5A (2 x 50 mm, P/N 046104) separovať niektoré katióny prechodných kovov vo vzorke vody, za použitia systému sekvenčnej injekčnej chromatografie (SIC). Použitá separácia bola iónovo výmenná, kolónu tvorili častice pokryté dvojvrstvou funkčného latexu schopného vymieňať katióny aj anióny. Ako chelatačné činidlo v mobilnej fáze bola použitá pyridín-2,6-dikarboxylová kyselina (PDCA) a reakčné činidlo obsahovalo 4-(2-pyridylazo) resorcinol (PAR). Detekcia prebiehala spektrofotometricky. Pri optimalizácií boli použité dve metódy: simplex a univariantná metóda. Boli nájdené ideálne podmienky pre separáciu. Mobilná fáza pozostávala z PDCA v koncentrácií 4 mmol/l, kyseliny mravčej v koncentrácií 40 mmol/l, síranu sodného v koncentrácií 4 mmol/l a hydroxidu sodného v koncentrácií 2 mmol/l. Reakčné činidlo bolo zložené z PAR (0,3 mmol/l), hydroxidu amónneho (150 mmol/l), hydrogenuhličitanu sodného (60 mmol/l) a hydroxidu sodného (45 mmol/l). Vzorka o...
|
host ::
RSS.