|
|
Characterisation of Rat Alveolar Cell Line R3/1
Horálková, Lenka ; Doležal, Pavel (vedoucí práce) ; Fendrich, Zdeněk (oponent) ; Forbes, Ben (oponent)
4. SUMMARY Buněčná řada R3/1 odvozená z krysích embryí, vykazuje několik fenotypových znaků vlastních buňkám alveolárního epitelu I. řádu. Cílem této práce bylo dále popsat vlastnosti R3/1 buněčné linie vzhledem k jejímu případnému využití jako in vitro drug disposition model, tj. model popisující veškeré procesy zahrnující absorpci, distribuci, metabolismus a exkreci léčiva do organismu. R3/1 buňky byly kultivovány na Traswell filtrech a transepitheliální elektrický odpor (TEER) byl měřěn jako parametr integrity buněčných vrstev. Přítomnost proteinů důležitých pro vytvoření funkčních buněčných spojení (tight junction, TJ) - E-cadherinu, occludinu a proteinů ZO-1 a ZO-2 byla analyzována na úrovni mRNA pomocí polymerázové řetězové reakce s reverzní transkripcí (RT- PCR) a na úrovni antigenu pomocí imunofluorescenční mikroskopie (IFM). Dále byla sledována přítomnost katabolických peptidáz, konkrétně karboxypeptidázy M, aminopeptidáz A, B, N a P, γ-glutamyltransferázy, dipeptidylpeptidázy IV, angiotensin konvertujícího enzymu a endopeptidáz 24.11 a 24.15. Zároveň s R3/1 buňkami byly tyto peptidázy stanoveny v primárních kulturách alveolárního epitelu potkanů a výsledky byly porovnány. Hodnoty TEER dosáhly maximální hodnoty ~99±17 Ω cm2 pátého dne kultivace, obohacení živného media o dexametazon (v koncentraci...
|
host ::
RSS.