|
| |
|
|
Indukce přirozené imunitní odpovědi proti intracelulární bakterii Francisella tularensis
Sommerová, Gabriela ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Myslivcová Fučíková, Alena (oponent)
Cíl práce: Cílem této rešeršní práce je seznámit čtenáře s problematikou týkající se intracelulární bakterie Francisella tularensis ve vztahu k aktivaci přirozené imunitní odezvy hostitele na přítomnost infekčního agens. Hlavní poznatky: Mezi hlavní cíle této práce patří podat stručný přehled o rozpoznávání F. tularensis cestou Toll-like receptorů, produkce cytokinů a chemokinů a následné zapojení dalších komponent přirozené imunity, mezi které patří neutrofily, NK buňky nebo humorální složky imunitní odpovědi, do které se řadí také komplement. Zpracované informace se opírají o řadu studií prováděných převážně na myších modelech. Závěry: Intracelulární bakterie F. tularensis je známá jako původce onemocnění tularémie. Její vysoká infekčnost spolu s vysokým rizikem úmrtí u plicní formy vyvolává velké obavy ze zneužití této bakterie jako biologické zbraně. Doposud nejsou známy veškeré její mechanismy patogeneze, což je velkým problémem při vývoji účinných vakcín. Indukce přirozené imunity se jeví v obraně hostitele proti F. tularensis jako velmi důležitá. I přes několik desetiletí bádání se však stále nedaří plně objasnit mechanismy F. tularensis, kterými se podílí na manipulaci s hostitelskou buňkou včetně regulace indukce imunitní reakce na infekci vyvolanou F. tularensis. Klíčová slova:...
|
|
|
Investigation of protein-protein interaction important for pathogenesis of tularemia infection
Prokšová, Magdaléna ; Stulík, Jiří (vedoucí práce) ; Myslivcová Fučíková, Alena (oponent) ; Bouchal, Pavel (oponent)
Francisella tularensis označovaná aj ako "tajnostkarsky" patogén spôsobuje zoonotické ochorenie tularémiu. Unikátnosť tejto intracelulárnej baktérie spočíva v tom, že dokáže infikovať, prežiť a množiť sa vo fagocytujúcich bunkách a uniknúť pritom dohľadu imunitnému systému hostiteľa. Zároveň je vďaka svojej extrémnej infekčnosti, schopnosti spôsobiť ochorenie inhalačnou cestou a absencii vakcíny zaradená medzi potenciálne biologické zbrane. Vo virulencii zohráva kľúčovú úlohu únik baktérie z fagozómu. Je známe, že sa na ňom podieľa sekrečný systém typu VI a proteíny z ostrova patogenity F. tularensis. Avšak presné molekulárne mechanizmy, ktoré baktéria používa, neboli doposiaľ charakterizované. Cieľom práce bolo identifikovať proteíny hostiteľskej bunky, ktoré prostredníctvom interakcie s proteínmi baktérie F. tularensis riadia priebeh infekcie vo svoj prospech. Pre identifikáciu proteín-proteínových interakcií hotiteľ-patogén bol navrhnutý minimálny experimentálny model, ktorý pozostával z produkcie vybraných sekretovaných proteínov F. tularensis v hostiteľskej bunke. Bakteriálne proteíny z oblasti ostrova patogenity baktérie F. tularensis poddruh novicida (VgrG a IglJ) boli sfúzované s epitopovou kotvou FLAG tag a produkované v bunkovej línii HEK 293T. Interakčné partnery boli následne...
|
|
|
Využití proteomické analýzy pro identifikaci potenciálních biomarkerů u onemocnění kardiovaskulárního systému
Fučíková, Alena ; Lenčo, Juraj (vedoucí práce) ; Hernychová, Lenka (oponent) ; Pudil, Radek (oponent)
SOUHRN Hypertrofická kardiomyopatie se řadí mezi nejčastější geneticky podmíněná onemocnění kardiovaskulárního systému. Ačkoliv je toto onemocnění známé dlouhou dobu, zatím neexistují snadno použitelné diagnostické postupy, které by odhalily chorobu v raných stádiích, což je zásadní zejména u jedinců s negativní nebo neznámou rodinnou anamnézou. Tvorba metody cílené proteomické analýzy spolu s kvantifikací vybraných potenciálních markerů hypertrofické kardiomyopatie pomocí izotopicky značených standardů byla hlavním cílem předkládané dizertační práce. Touto metodou lze odhalit již velmi malá množství hledaných potenciálních markerů v minimálním množství biologického materiálu. V kombinaci s vhodně použitými standardy navíc umožňuje přesnou kvantifikaci velkého počtu analytů v relativně krátkém čase. Pomocí cíleného proteomického přístupu bylo kvantifikováno několik proteinových markerů hypertrofické kardiomyopatie, které byly již dříve uvedeny v literatuře. Zároveň byl v rámci dizertační práce popsán plazmatický fibronektin jako nový potenciální marker tohoto onemocnění. Koncentrace několika vybraných proteinů byly závěrem stanoveny pomocí enzymoimunoanalytické metody a porovnány s výsledky cílené proteomické analýzy. V rámci předkládané dizertační práce byla vytvořena a ověřena metoda cílené proteomické...
|
|
|
Indukce přirozené imunitní odpovědi proti intracelulární bakterii Francisella tularensis
Sommerová, Gabriela ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Myslivcová Fučíková, Alena (oponent)
Cíl práce: Cílem této rešeršní práce je seznámit čtenáře s problematikou týkající se intracelulární bakterie Francisella tularensis ve vztahu k aktivaci přirozené imunitní odezvy hostitele na přítomnost infekčního agens. Hlavní poznatky: Mezi hlavní cíle této práce patří podat stručný přehled o rozpoznávání F. tularensis cestou Toll-like receptorů, produkce cytokinů a chemokinů a následné zapojení dalších komponent přirozené imunity, mezi které patří neutrofily, NK buňky nebo humorální složky imunitní odpovědi, do které se řadí také komplement. Zpracované informace se opírají o řadu studií prováděných převážně na myších modelech. Závěry: Intracelulární bakterie F. tularensis je známá jako původce onemocnění tularémie. Její vysoká infekčnost spolu s vysokým rizikem úmrtí u plicní formy vyvolává velké obavy ze zneužití této bakterie jako biologické zbraně. Doposud nejsou známy veškeré její mechanismy patogeneze, což je velkým problémem při vývoji účinných vakcín. Indukce přirozené imunity se jeví v obraně hostitele proti F. tularensis jako velmi důležitá. I přes několik desetiletí bádání se však stále nedaří plně objasnit mechanismy F. tularensis, kterými se podílí na manipulaci s hostitelskou buňkou včetně regulace indukce imunitní reakce na infekci vyvolanou F. tularensis. Klíčová slova:...
|
|
|
Využití proteomické analýzy pro identifikaci potenciálních biomarkerů u onemocnění kardiovaskulárního systému
Fučíková, Alena ; Lenčo, Juraj (vedoucí práce) ; Hernychová, Lenka (oponent) ; Pudil, Radek (oponent)
SOUHRN Hypertrofická kardiomyopatie se řadí mezi nejčastější geneticky podmíněná onemocnění kardiovaskulárního systému. Ačkoliv je toto onemocnění známé dlouhou dobu, zatím neexistují snadno použitelné diagnostické postupy, které by odhalily chorobu v raných stádiích, což je zásadní zejména u jedinců s negativní nebo neznámou rodinnou anamnézou. Tvorba metody cílené proteomické analýzy spolu s kvantifikací vybraných potenciálních markerů hypertrofické kardiomyopatie pomocí izotopicky značených standardů byla hlavním cílem předkládané dizertační práce. Touto metodou lze odhalit již velmi malá množství hledaných potenciálních markerů v minimálním množství biologického materiálu. V kombinaci s vhodně použitými standardy navíc umožňuje přesnou kvantifikaci velkého počtu analytů v relativně krátkém čase. Pomocí cíleného proteomického přístupu bylo kvantifikováno několik proteinových markerů hypertrofické kardiomyopatie, které byly již dříve uvedeny v literatuře. Zároveň byl v rámci dizertační práce popsán plazmatický fibronektin jako nový potenciální marker tohoto onemocnění. Koncentrace několika vybraných proteinů byly závěrem stanoveny pomocí enzymoimunoanalytické metody a porovnány s výsledky cílené proteomické analýzy. V rámci předkládané dizertační práce byla vytvořena a ověřena metoda cílené proteomické...
|
|
| |
|
|
Hodnocení hematologických a biochemických ukazatelů u různých plemen psů.
Pechová, Eva ; Fučíková, Alena (vedoucí práce) ; Václav, Václav (oponent)
Tématem této diplomové práce bylo hodnocení hematologických a biochemických ukazatelů u různých plemen psů. Cílem této práce bylo vyhodnocení odebraných vzorků krve od 10 psů a 10 fen různých plemen a zjištění závislostí hodnot ve vztahu k věku, výživě a pohlaví. Vzorky byly zpracovány a vyhodnoceny od května do října roku 2015. Z hematologických ukazatelů byly vyšetřeny tyto: RBC, HGB, HCT, MCV, WBC a byl zhotoven krevní nátěr,
ze kterého byl proveden diferenciální rozpočet leukocytů. Dále byly vyšetřeny biochemické ukazatele: TP, GLU, CHOL, ATP. Literární rešerše byla zaměřena nejprve na základní složky krmiva psů. Dále byly popsány hematologické a biochemické ukazatele krve a také metodika celého pokusu.Výsledky byly zpracovány pomocí programu RStudio a byly počítány základní statistické charakteristiky: střední hodnota, minimum, maximum, medián, směrodatná odchylka. Byla použita statistická metoda ANOVA, ve které byla určována závislost hodnot mezi pohlavími, věkovými kategoriemi, typem krmiva, kterým byla zvířata krmena. Dále byly srovnány hodnoty mezi plemeny. Ze zjištěných rozdílů mezi plemeny bylo zvýšení červených krvinek u plemene německý ovčák a dobrman. Zvýšené hodnoty ALT měla plemena dobrman, labradorský retrívr a kříženec německého ovčáka. Významnými výsledky bylo zjištění, že došlo ke zvýšení počtu červených krvinek a hematokritu u jedinců krmených granulovanou stravou než u jedinců a kombinovanou stravou. Rozdíl byl také zjištěn u MCV mezi pohlavím.
U hodnot ALT byly zjištěny rozdíly mezi pohlavím, pro potvrzení vztahu k věku by bylo potřeba větší množství dat. Hodnoty ALT jsou závislé na typu krmiva, kde u jedinců krmených kompletní granulovanou stravou jsou hodnoty vyšší. Hodnoty celkové bílkoviny
se s přibývajícím věkem zvyšovaly u psů, tento trend budeme pravděpodobně pozorovat
i u fen. U jedinců krmených kombinovanou stravou (granulované krmivo + domácí strava) byl pozorován nárůst hodnot celkové bílkoviny s přibývajícím věkem. U jedinců krmených granulovaným krmivem nebyl tento nárůst tak významný.
|
|
|
Vliv rozdílných diet na hematologické a biochemické ukazatele u laboratorního potkana
Hudíková, Tereza ; Fučíková, Alena (vedoucí práce) ; Jan, Jan (oponent)
Tato diplomová práce se zabývala potvrzením či vyvrácením předpokladu, zda mají zvýšené dávky živočišné bílkoviny vliv na hematologické a biochemické ukazatele. Byl vytvořen výkrmový pokus, ve kterém byli použiti laboratorní potkani kmene Wistar, shodného pohlaví (samci) a jednotného věku při narození (+/- 5 dnů). Potkani byli rozděleni do 3 skupin po 10 kusech. Věk při zahájení pokusu byl cca 62 dní. Skupina č. 1 byla krmena standardní jadrnou směsí ad libitum, skupina č. 2 byla krmena standardní jadrnou směsí (6 g) s homogenizovaným hovězím masem (10 g), jehož množství odpovídá obsahu dusíkatých látek standardní jadrné směsi. Skupina č. 3 byla krmena ad libitum homogenizovaným hovězím masem. Před zahájením pokusu byl proveden odběr krve z kolaterální ocasní žíly, po ukončení pokusu byl proveden odběr krve punkcí ze srdce in vivo. Krevní vzorky z odběrů před a po pokusu byly použity pro analýzu hematologických a biochemických parametrů. Pro hematologické vyšetření byla použita krev ošetřena EDTA a pro stanovení biochemických ukazatelů byla použita krevní plazma. Celkově byly stanoveny tyto ukazatele: počet erytrocytů, hematokrit, hemoglobin a MCV u hematologické analýzy, triacylglycerol, cholesterol, kys. močová, dále prvky hořčík a železo u biochemické analýzy. Byly zjištěné statisticky významné rozdíly mezi hodnotami před a po pokusu u počtu erytrocytů, hemoglobinu a MCV z hematologických ukazatelů, tak u cholesterolu, hořčíku a železa z biochemických ukazatelů. Výsledky tohoto pokusu ukazují, že příjem odlišné diety může mít vliv na hematologické a biochemické ukazatele.
|
host ::
RSS.