|
Diagnostické biosenzory pro encefalopatie způsobené priony
Šobrová, Pavlína
Prionové onemocnění jsou lidské a živočišné fatální přenosné neurodegenerativní onemocnění (TSE) charakterizované strukturální změnou buněčného prionového proteinu (PrPC) na jeho pozměněnou isoformu PrPSc. Hlavním cílem této práce bylo sumarizovat současné poznatky o jednotlivých TSE a možnostech jejich detekce se zaměřením na elektrochemické metody. Pro tyto účely byla použita cyklická voltametrie (CV), diferenční pulzní voltametrie (DPV), diferenční pulzní voltametrie ve spojení s Brdičkovou reakcí (DPV -- Brdičkova reakce) a chronopotenciometrická rozpouštěcí analýza (CPSA). Limity detekce jednotlivých technik byly stanoveny na 32 ug/ml u CV, 16 ug/ml u DPV, 16 ug/ml u DPV -- Brdičkova reakce a 8 ug/ml u CPSA. Dále byl sledován vliv působení teploty denaturace. Jak jasně vyplývá z výsledků, získané signály prionových proteinů lineárně klesaly v závislosti na délce trvání denaturační teploty (99 °C) po dobu 0, 15, 30, 45 a 60 min. Dále jsme se zaměřili na studium prionových proteinů a jejich interakce s CdTe kvantovými tečkami (QD) za použití elektrochemie. Primárně jsme elektrochemicky charakterizovali QD a stanovili jejich detekční limit na 100 fg/ml. Následně jsme se zaměřili na elektrochemické studium interakcí QD s prionovým proteinem. Detekční limit byl stanoven na 1 fg v 5 ul při 3S/N. Toto by mohlo hrát důležitou úlohu při značení prionových proteinů QD kvůli velmi snadné aplikovatelnosti a možnosti miniuaturizace zařízení, které může být použitelné in situ. a otevřít taknové možnosti stanovení přítomnosti prionových proteinů na chirurgických nástrojích a jiných materiálech, které jimi mohou být kontaminovány vlivem špatné degrability při daných sterilujících technikách.
|
|
Modifikované peptidy ve spojení s kvantovými tečkami
Janů, Libor
V této práci byly připraveny CdTe kvantové tečky (CdTe QDs) s různou vlnovou délkou emisního záření. K jejich přípravě byla použita mikrovlnná syntéza, přičemž povrchová modifikace byla provedena pomocí merkaptopropionové kyseliny (MPA). MPA zajišťuje biokompatibilitu a dobrou rozpustnost kvantových teček ve vodě, což umožňuje jejich přímé použití v bioanalytice. Dále byly připraveny CdTe QDs modifikované biotinylovaným glutathionem (GSH). V tomto případě se jedná využití peptidu, který se pomocí sulfanylové skupiny (--SH) váže na povrch kvantové tečky. Zárověň je peptid modifikován biotinem, což umožňuje vysoce specifickou reakci s analytem, který je optřem streptavidinem, avidinem nebo neutravidinem. Následně byly připraveny QDs, které byly modifikovány peptidem HWRGWVC. Hexamer HWRGWV vykazuje vysokou afinitu k Fc doméně lidského imunoglobulinu. Tímto způsobem byly připraveny protilátkou modifikované kvantové tečky.
|
|
New sensor for DNA mutation detection
Datinská, Vladimíra ; Klepárník, Karel ; Minárik, M. ; Foret, František
We present a design and synthesis of a new sensor intended for the genomic analysis in molecular cancer research. This sensor is based on the Förster resonance energy transfer (FRET) and can be used for the detection of complementary oligonucletide chains based on probe hybridization. Quantum dots (QDs) with their unique optical properties serve as suitable donors of energy in FRET.
|
|
Electronic excitation energy transfer between quasi-zero-dimensional systems
Král, Karel ; Menšík, Miroslav
Electronic excitation energy transfer is studied theoretically within a prototype system of quantum dots using the excitonic representation of the electronic states of two quasi-zero dimensional subsystems, between which the excitation energy is transferred in a process treated as an irreversible kinetic phenomenon. The electron-phonon interaction is used to circumvent the energy conservation problem, especially when considering the uphill and downhill excitation transfer processes. The theory is studied upon utilizing a simplified model of two interacting quantum dots, both coupled to their environment. The theoretical approach is documented by numerical calculations. The results could be relevant to various cases of the electronic excitation energy transfer between quasi zero dimensional nanostructures.
|
|
Sensor based on Förster resonance energy transfer with quantum dot
Lišková, Marcela ; Datinská, Vladimíra ; Klepárník, Karel ; Foret, František
Förster resonance energy transfers (FRET) are based on the nonradiative transfer of energy between a donor and acceptor dye in the distance 1-10 nm. With respect to this, quantum dots (QDs) with a high absorbance can serve as suitable donors of energy in FRET. Here, we present architectures of two sensors based on QD conjugates useful in imaging and diagnostics of cancer. One sensor, based on an oligonucleotide conjugate, can be used for the detection of complementary oligonucletide chains. The other was designed for the detection of enzymes inside cells.
|
| |
| |
| |
| |
| |