|
| |
|
|
Spektrofluorimetrické stanovení aktivit aldo/ketoreduktas
Zavřelová, Iva ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Aldo/ketoreduktasy (AKR) jsou jednou ze tří enzymových nadrodin, které se uplatňují při oxidoredukci široké škály přírodních i cizorodých aldehydů, ketonů či alkoholů. Aktivita AKR se nejčastěji stanovuje spektrofotometricky, tato metoda však není dostatečně selektivní a citlivá. Na základě skutečnosti, že všechny AKR vyžadují pro katalýzu přítomnost nikotinamidových kofaktorů, jejichž redukovaná forma fluoreskuje, zatímco oxidovaná fluorescenci nevykazuje, se nabízí možnost využití spektrofluorimetrie - stanovení AKR pomocí kontinuálního sledování přeměny NADPH/NADP+ . Tato studie se zabývala testováním a optimalizací spektrofluorimetrického stanovení acenaftenoldehydrogenasy v subcelulárních frakcích (cytosol a mikrosomy) z homogenátu jater potkana a v cytosolu z buněčné linie MCF-7. Ze získaných výsledků je patrné, že spektrofluorimetrie může být perspektivní metodou pro stanovení aktivit některých AKR. Výhodou je její selektivita, citlivost a poměrně nenáročné provedení. Bude však nutné metodu dále optimalizovat, vyzkoušet další substráty a inhibitory a vyloučit možnost interference mikrosomů v cytosolických enzymových preparátech.
|
|
|
Spektrofluorimetrické stanovení aktivit aldo/ketoreduktas
Zavřelová, Iva ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Aldo/ketoreduktasy (AKR) jsou jednou ze tří enzymových nadrodin, které se uplatňují při oxidoredukci široké škály přírodních i cizorodých aldehydů, ketonů či alkoholů. Aktivita AKR se nejčastěji stanovuje spektrofotometricky, tato metoda však není dostatečně selektivní a citlivá. Na základě skutečnosti, že všechny AKR vyžadují pro katalýzu přítomnost nikotinamidových kofaktorů, jejichž redukovaná forma fluoreskuje, zatímco oxidovaná fluorescenci nevykazuje, se nabízí možnost využití spektrofluorimetrie - stanovení AKR pomocí kontinuálního sledování přeměny NADPH/NADP+ . Tato studie se zabývala testováním a optimalizací spektrofluorimetrického stanovení acenaftenoldehydrogenasy v subcelulárních frakcích (cytosol a mikrosomy) z homogenátu jater potkana a v cytosolu z buněčné linie MCF-7. Ze získaných výsledků je patrné, že spektrofluorimetrie může být perspektivní metodou pro stanovení aktivit některých AKR. Výhodou je její selektivita, citlivost a poměrně nenáročné provedení. Bude však nutné metodu dále optimalizovat, vyzkoušet další substráty a inhibitory a vyloučit možnost interference mikrosomů v cytosolických enzymových preparátech.
|
|
| |
host ::
RSS.