|
|
Role of disulphide bonds in hA2A subtype adenosine receptor
Zappe, Lukáš ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická Fakulta v Hradci Králové Katedra Biochemicky věd Kandidát: Lukáš Zappe Vedoucí: Ing. Petra Matoušková Ph.D., PD Dr. Anke C. Schiedel Název diplomové práce: Role disulfidických vazeb u hA2A podtypu adenosinového receptoru Adenosinový receptor podtyp A2A je součástí rodiny receptorů spřažených s G proteinem (GPCR), která je nyní cílem téměř 40% všech léčivých látek. GPCRs se skládají ze sedmi transmembránových domén spojených třemi extracelulárními a třemi intracelulárními kličkami (ECL a ICL). Byla odkryta skutečná struktura receptoru, tedy víme, že ECL1 a ECL2 jsou spojeny disulfidickými vazbami. Z toho ECL2 je pravděpodobně zodpovědná za proces rozpoznání a navázání ligandu. Abychom lépe pochopili, jak důležitá je úloha těchto disulfidických vazeb v tomto procesu, pomocí přímé jednobodové mutace byly vytvořeny čtyři adenosinové A2A mutantní receptory, kde aminokyselina cystein byla nahrazena za serin (C146S, C159S, C166S a C146S-C159S). Ovlivnění receptorové exprese bylo zkoumáno pomocí metody ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Následný efekt na proces rozpoznání ligandu receptorem byl proveden pomocí kompetice mezi radioaktivně značeným ligandem [3 H]CGS-21680 (5 nM) a několika agonisty na adenosinových receptorech (NECA, CGS-21680, PSB-826,...
|
|
|
Role of disulphide bonds in hA2A subtype adenosine receptor
Zappe, Lukáš ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická Fakulta v Hradci Králové Katedra Biochemicky věd Kandidát: Lukáš Zappe Vedoucí: Ing. Petra Matoušková Ph.D., PD Dr. Anke C. Schiedel Název diplomové práce: Role disulfidických vazeb u hA2A podtypu adenosinového receptoru Adenosinový receptor podtyp A2A je součástí rodiny receptorů spřažených s G proteinem (GPCR), která je nyní cílem téměř 40% všech léčivých látek. GPCRs se skládají ze sedmi transmembránových domén spojených třemi extracelulárními a třemi intracelulárními kličkami (ECL a ICL). Byla odkryta skutečná struktura receptoru, tedy víme, že ECL1 a ECL2 jsou spojeny disulfidickými vazbami. Z toho ECL2 je pravděpodobně zodpovědná za proces rozpoznání a navázání ligandu. Abychom lépe pochopili, jak důležitá je úloha těchto disulfidických vazeb v tomto procesu, pomocí přímé jednobodové mutace byly vytvořeny čtyři adenosinové A2A mutantní receptory, kde aminokyselina cystein byla nahrazena za serin (C146S, C159S, C166S a C146S-C159S). Ovlivnění receptorové exprese bylo zkoumáno pomocí metody ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Následný efekt na proces rozpoznání ligandu receptorem byl proveden pomocí kompetice mezi radioaktivně značeným ligandem [3 H]CGS-21680 (5 nM) a několika agonisty na adenosinových receptorech (NECA, CGS-21680, PSB-826,...
|
|
|
Role of disulphide bonds in hA2A subtype adenosine receptor
Zappe, Lukáš ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická Fakulta v Hradci Králové Katedra Biochemicky věd Kandidát: Lukáš Zappe Vedoucí: Ing. Petra Matoušková Ph.D., PD Dr. Anke C. Schiedel Název diplomové práce: Role disulfidických vazeb u hA2A podtypu adenosinového receptoru Adenosinový receptor podtyp A2A je součástí rodiny receptorů spřažených s G proteinem (GPCR), která je nyní cílem téměř 40% všech léčivých látek. GPCRs se skládají ze sedmi transmembránových domén spojených třemi extracelulárními a třemi intracelulárními kličkami (ECL a ICL). Byla odkryta skutečná struktura receptoru, tedy víme, že ECL1 a ECL2 jsou spojeny disulfidickými vazbami. Z toho ECL2 je pravděpodobně zodpovědná za proces rozpoznání a navázání ligandu. Abychom lépe pochopili, jak důležitá je úloha těchto disulfidických vazeb v tomto procesu, pomocí přímé jednobodové mutace byly vytvořeny čtyři adenosinové A2A mutantní receptory, kde aminokyselina cystein byla nahrazena za serin (C146S, C159S, C166S a C146S-C159S). Ovlivnění receptorové exprese bylo zkoumáno pomocí metody ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Následný efekt na proces rozpoznání ligandu receptorem byl proveden pomocí kompetice mezi radioaktivně značeným ligandem [3 H]CGS-21680 (5 nM) a několika agonisty na adenosinových receptorech (NECA, CGS-21680, PSB-826,...
|
|
|
Role of disulphide bonds in hA2A subtype adenosine receptor
Zappe, Lukáš ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická Fakulta v Hradci Králové Katedra Biochemicky věd Kandidát: Lukáš Zappe Vedoucí: Ing. Petra Matoušková Ph.D., PD Dr. Anke C. Schiedel Název diplomové práce: Role disulfidických vazeb u hA2A podtypu adenosinového receptoru Adenosinový receptor podtyp A2A je součástí rodiny receptorů spřažených s G proteinem (GPCR), která je nyní cílem téměř 40% všech léčivých látek. GPCRs se skládají ze sedmi transmembránových domén spojených třemi extracelulárními a třemi intracelulárními kličkami (ECL a ICL). Byla odkryta skutečná struktura receptoru, tedy víme, že ECL1 a ECL2 jsou spojeny disulfidickými vazbami. Z toho ECL2 je pravděpodobně zodpovědná za proces rozpoznání a navázání ligandu. Abychom lépe pochopili, jak důležitá je úloha těchto disulfidických vazeb v tomto procesu, pomocí přímé jednobodové mutace byly vytvořeny čtyři adenosinové A2A mutantní receptory, kde aminokyselina cystein byla nahrazena za serin (C146S, C159S, C166S a C146S-C159S). Ovlivnění receptorové exprese bylo zkoumáno pomocí metody ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Následný efekt na proces rozpoznání ligandu receptorem byl proveden pomocí kompetice mezi radioaktivně značeným ligandem [3 H]CGS-21680 (5 nM) a několika agonisty na adenosinových receptorech (NECA, CGS-21680, PSB-826,...
|
host ::
RSS.