|
|
Molekulární charakterizace faktorů účastnících se tvorby cystové stěny Giardia intestinalis.
Pastyříková, Aneta ; Doležal, Pavel (vedoucí práce) ; Hrdý, Ivan (oponent)
1 Abstrakt Povrch cyst Giardia intestinalis pokrývá silná vláknitá stěna poskytující parazitovi potřebnou ochranu před vnějším prostředím. Materiál cystové stěny se skládá z proteinů a sacharidů. Hlavní sacharid, unikátní β-1,3-N-acetylgalaktosaminový homopolymer (označovaný jako Giardan), je syntetizován z glukózy cytosolickými enzymy indukovanými během encystace. Tato práce se zaměřuje na ověření biosyntézy Giardanu a funkční charakterizaci UDP-N-acetylglukosamin 4'- epimerázy (UA4E), jednoho z enzymů účastnících se syntetické dráhy. Pro tyto účely byl odpovídající gen cíleně odstraněn za využití systému CRISPR/Cas9. Byla získána stabilní buněčná linie, ve které byly odstraněny všechny čtyři kopie genu UA4E. Úspěšnost genového knock-outu byla potvrzena na základě proteomické analýzy. Pomocí fluorescenční mikroskopie jsme pozorovali, že ΔUA4E buňky indukované k encystaci jsou schopny iniciovat encystační procesy a procházet buněčnou diferenciací. U buněk byla pozorována přítomnost ESV váčků a typické morfologické znaky odpovídající cystám. Tato stadia však měla tenkou povrchovou vrstvu a nebyla schopna vytvořit typickou silnou stěnu s fibrilárním vzhledem na jejich povrchu, což vedlo k následné produkci neživotaschopných cyst. Klíčová slova Giardia intestinalis, Giardan, UDP-N-acetylglukosamin...
|
|
|
Současné možnosti léčby střevní a mimostřevní amébózy
Pastyříková, Aneta ; Nohýnková, Eva (vedoucí práce) ; Stejskal, František (oponent)
Amébóza je parazitární nákaza vyvolaná patogenní střevní amébou Entamoeba histolytica, která se v lumen tlustého střeva člověka množí jako forma minuta. Za dosud ne zcela definovaných podmínek se forma minuta může transformovat na formu magna, která napadá stěnu tlustého střeva a je schopna se krví šířit mimo střevo a infikovat vnitřní orgány, hlavně játra. Amébóza se primárně léčí chemoterapeutiky, která se podle místa účinku dělí na luminální a tkáňová. Luminální léčiva cílí na stádia E.histolytica v lumen střeva, proto se používají pro léčbu asymptomatické a symptomatické formy střevní amébózy. Tkáňová léčiva, mezi něž patří především derivát 5-nitroimidazolu, metronidazol, který je lékem volby při léčbě amébózy, pronikají do tkání a používají se k terapii invazivní střevní a mimostřevní nákazy. Pokud chemoterapie není účinná, nebo by hrozila ruptura abscesu a sepse, provádí se chirurgická léčba. V této bakalářské práci jsou shrnuty terapeutické přístupy k jednotlivým klinickým formám amébózy, možnosti chemoterapie v současnosti, ale i v době před používáním 5- nitroimidazolových derivátů, a alternativy k současným lékům. Klíčová slova Střevní améby člověka, Entamoeba histolytica, amébóza, léčba
|
host ::
RSS.