|
|
The role of truncated PPM1D/Wip1 phosphatase in cancer
Martiníková, Andra-Stefania ; Macůrek, Libor (vedoucí práce) ; Souček, Pavel (oponent) ; Mistrík, Martin (oponent)
Poškození DNA v buňkách spouští aktivaci buněčne signální dráhy odpovědi na poškození DNA (DDR) do opravení DNA se tak zastaví buněčný cyklus. Opětovné zahájení buněčného cyklu je zahájeno pomocí PPM1D/WIP1 fosfatázy, která po opravení poškození defosforyluje markery poškození DNA. DDR tak brání nestabilitě genomu nebo vývoji rakoviny. Mutace genu Ppm1d pak působí vysoce stabilní zkrácený protein, který je pozorován jak u onkologických pacientů, tak i v rakovinných buněčných liniích. V této dizertační práci jsme využili model transgenní myši, ve které vedly mutace exonu 6 genu Ppm1d k expresi zkrácené varianty PPM1D proteinu. U myší se zkraceným PPM1D v brzlíku/thymu (Ppm1dT/+ ) byly pozorovány jak vysoké hladiny PPM1D proteinu, tak i snížená aktivace dráhy DDR po vystavení IR. Následně byly Ppm1dT/+ myši kříženy s Trp53+/- heterozygotními knock-out myšmi, které jsou náchylné k thymickému lymfomu. Získaní Ppm1dT/+ Trp53+/- dvojití mutanti měli po IR zvýšenou frekvenci T-buněčných lymfomů ve srovnání s mutanty pouze v Trp53+/- . Následně bylo pozorováno, že zkrácená varianta PPM1D vede k defektům aktivace kontrolních bodů buněčného cyklu v lidských netransformovaných RPE buňkách, které pokračují v proliferaci navzdory přítomnému poškození DNA. Po vystavení buněk RPE1 replikačnímu stresu byla...
|
|
|
Mechanisms of replicative, drug- and oncogene-induced cellular senescence
Košař, Martin ; Bartek, Jiří (vedoucí práce) ; Strnad, Miroslav (oponent) ; Mistrík, Martin (oponent)
Buňky jsou trvale vystaveny různým formám stresu, který pochází jak z vnitřního, tak z vnějšího prostředí. Buněčná senescence, permanentní zástava buněčného cyklu, představuje fyziologickou odpověď organismu, která zabraňuje proliferaci poškozených buněk. Jedná se o významný mechanismus nádorové suprese, jelikož inaktivace této bariéry v pre-maligních stadiích tumoru vede k rozvoji rakovinného bujení. Na druhou stranu, v dlouhodobé perspektivě se senescence podílí na stárnutí tkáně organismu. Porozumění příčinám a důsledkům senescence nám může poskytnout důležité informace o procesech jako je rakovinné bujení a stárnutí organismu, což může přispět k nalezení nových terapeutických přístupů. V první částí dizertační práce jsme studovali vztah mezi dvěma tumor-suprimujícími signálními dráhami, DDR a ARF, v odpovědi na aktivaci onkogenu. S využitím několika myších modelů, lidských klinických vzorků a buněčných kultur jsme ukázali, že k aktivaci signální dráhy ARF dochází v pozdějším stádiu vývoje nádoru než k aktivaci dráhy DDR. Pro spuštění ARF signalizace je navíc zapotřebí vyšší hladiny onkogenního stresu než pro aktivaci DDR. ARF tedy představuje pozdní a komplementární bariéru nádorové suprese. Změny chromatinu spojené se senescencí (SAHF) jsou obecně považovány za mechanismus přispívající k...
|
|
|
Mechanisms of replicative, drug- and oncogene-induced cellular senescence
Košař, Martin ; Bartek, Jiří (vedoucí práce) ; Strnad, Miroslav (oponent) ; Mistrík, Martin (oponent)
Buňky jsou trvale vystaveny různým formám stresu, který pochází jak z vnitřního, tak z vnějšího prostředí. Buněčná senescence, permanentní zástava buněčného cyklu, představuje fyziologickou odpověď organismu, která zabraňuje proliferaci poškozených buněk. Jedná se o významný mechanismus nádorové suprese, jelikož inaktivace této bariéry v pre-maligních stadiích tumoru vede k rozvoji rakovinného bujení. Na druhou stranu, v dlouhodobé perspektivě se senescence podílí na stárnutí tkáně organismu. Porozumění příčinám a důsledkům senescence nám může poskytnout důležité informace o procesech jako je rakovinné bujení a stárnutí organismu, což může přispět k nalezení nových terapeutických přístupů. V první částí dizertační práce jsme studovali vztah mezi dvěma tumor-suprimujícími signálními dráhami, DDR a ARF, v odpovědi na aktivaci onkogenu. S využitím několika myších modelů, lidských klinických vzorků a buněčných kultur jsme ukázali, že k aktivaci signální dráhy ARF dochází v pozdějším stádiu vývoje nádoru než k aktivaci dráhy DDR. Pro spuštění ARF signalizace je navíc zapotřebí vyšší hladiny onkogenního stresu než pro aktivaci DDR. ARF tedy představuje pozdní a komplementární bariéru nádorové suprese. Změny chromatinu spojené se senescencí (SAHF) jsou obecně považovány za mechanismus přispívající k...
|
|
|
Postranslational modifications in DNA damage response
Moudrý, Pavel ; Hodný, Zdeněk (vedoucí práce) ; Malcová, Ivana (oponent) ; Mistrík, Martin (oponent)
Náš genetický materiál je neustále vystavován působení mnoha faktorů a procesů, které představují enormní hrozbu pro naši schopnost přenášet genetickou informaci potomkům i pro naše vlastní přežití. Buňky mají mnoho mechanismů schopných detekovat a opravovat poškozenou DNA, souborně označovaných jako buněčná odpověď na poškození DNA (DDR). Aby došlo k optimalizaci oprav poškozené DNA a k potlačení jejích změn během normálních buněčných procesů, musí být DDR striktně regulována v čase i prostoru. Defekty v opravě DNA vedou ke genomové nestabilitě a v konečném důsledku až k rozvoji nádorových a neurodegenerativních onemocnění. Tato práce je kompilací výsledků čtyř projektů zaměřených na molekulární mechanismy buněčné odpovědi na poškození DNA a vytváření multiproteinových signalizačních a opravných komplexů v místech poškození DNA. Identifikovali jsme protein NUP153, který je součástí jaderného póru, jako nový faktor nezbytný pro jaderný import proteinu 53BP1 a buněčnou odpověd na poškození DNA. Ukázali jsme, že potlačení exprese NUP153 brání akumulaci proteinu 53BP1 v jádře nově utvářených dceřinných buňek, což vede k omezení akumulace proteinu 53BP1 v místech poškozené DNA indukovaných ionizujícím zářením, ke zpomalení oprav poškozené DNA, ke zvýšení citlivosti buněk k ionizujícímu záření a ke zhoršení...
|
|
| |
host ::
RSS.