|
|
Analýza bioléčiv pomoci kapalinové chromatografii. Optimalizace přípravy vzorků.
Kolečková, Pavlína ; Khalikova, Maria (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Pavlína Kolečková Školitel: Mgr. Maria Khalikova, CSc. Název diplomové práce: Analýza bioléčiv pomocí kapalinové chromatografie. Optimalizace přípravy vzorků Tato diplomová práce je zaměřena na vývoj a optimalizaci postupu přípravy vzorků v kyselém pH pro peptidové mapování současně při minimalizaci vzniku nežádoucích modifikací peptidu v průběhu přípravy. V rámci optimalizace postupu byly provedeny přípravy několika vzorků, které se lišily jak postupem přípravy, použitými chemikáliemi či enzymy, tak i rozdílnými podmínkami inkubace. Enzymy použité pro přípravu vzorků byly trypsin, endoproteináza Lys-C, endoproteináza Glu- C, endoproteináza Asp-N a endoproteináza Sap-9. V diplomové práci se také používaly komerčně dostupné soupravy pro přípravu vzorků v kyselém prostředí a výsledky byly porovnány. Vzorky byly analyzovány metodou UHPLC-UV a LC-MS. Výsledky z LC-MS analýzy se poté zpracovávaly pomocí proteomických softwarů jako FragPipe a Byonic (Protein Metrics) díky kterým, mohly být vyhodnoceny postupy pro štěpení a přípravu vzorků v kyselém pH, popsány jejich výhody a úskalí. Pro celkové porovnání a vyhodnocení nejlepších postupů pro přípravu vzorků pro peptidové mapovaní byla provedena příprava vzorků...
|
host ::
RSS.