|
|
Úloha jednotlivých aminokyselinových zbytků první transmembránové domény v deaktivaci P2X7 receptoru
Knězů, Michal ; Zemková, Hana (vedoucí práce) ; Vlachová, Viktorie (oponent)
P2X7 receptor je trimerní ligandem otevíraný iontový kanál, aktivovaný extracelulárním ATP. Tento receptor je exprimovaný v mnoha tkáních a buněčných typech, jako jsou kupříkladu gliové buňky, buňky imunitního systému, různé epitely a spermie, a hraje roli v mnoha buněčných a fyziologických procesech, jako například fagocytóza, regulace metabolismu nebo apoptóza. Podjednotka P2X7 receptoru se sestává z intracelulárního N- a C-konce, dvou transmembránových domén (TM1 a TM2) a velké extracelulární ligand vazebné domény. P2X7 má nízkou sensitivitu pro svůj přirozený ligand, avšak jeho dlouhá nebo opakovaná aplikace sensitivitu k agonistovi zvyšuje spolu s amplitudou proudové odpovědi receptoru. Aktivace P2X7 receptoru je také spojena s akumulací velkých organických kationtů, kupříkladu fluorescentního barviva ethidium bromidu. Sensitizace receptoru je spojená s prodloužením deaktivace, jejíž mechanismus nebyl dosud zcela objasněn, a která může být měřena jako pokles proudu při odmytí agonisty. Tato práce se zabývá rolí jednotlivých aminokyselin v TM1 v kinetice deaktivace naivního a sensitizovaného P2X7 receptoru. Elektrofyziologická hole-cell patch clamp metoda byla použita k zaznamenání agonistou stimulovaného proudu a jeho poklesu u divokého typu P2X7 (P2X7-WT) a alaninových nebo leucinových...
|
|
|
Struktura a funkce P2X receptorů aktivovaných extracelulárním ATP
Knězů, Michal ; Zemková, Hana (vedoucí práce) ; Hejnová, Lucie (oponent)
ATP hraje důležitou roli v mezibuněčné signalizaci v mnoha tkáních eukaryot. P2X receptory jsou jedním z typů ligandem-aktivovaných iontových kanálů, jejichž přirozených ligandem je právě ATP, a jsou zodpovědné za množství fyziologických funkcí v organismech. V posledních 11 letech se objevilo několik studií zabývajících se krystalizací P2X receptorů a jejich strukturou. Tyto studie objasnili mnoho fenoménů týkajících se vlastností P2X receptorů, například vazbu ligandu, některé typy modulace, charakter samotného iontového kanálu, který P2X receptory tvoří, a hlavně jeho celkovou strukturu i se strukturními specifiky pro konkrétní P2X podtypy. Studie například vysvětlují důvody desenzitizace, mechanismus otevírání iontového kanálu a konformační změny související s vazbou ligandu, které otevírání předcházejí. Cílem této práce je přinést přehled poznatků o známých strukturách P2X receptorů a nahlédnout do funkčních vlastností jejich specifik. Klíčová slova: P2X receptor, purinergní signalizace, ATP, iontový kanál, krystalová struktura
|
host ::
RSS.