|
|
Biosenzory pro testování inhibitorů cholinesteras
Keresteš, Ondřej ; Kučerová, Marta (vedoucí práce) ; Lochman, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Student: Bc. Ondřej Keresteš Vedoucí práce: PharmDr. Marta Kučerová, Ph.D. Konzultant: pplk. prof. RNDr. Miroslav Pohanka, Ph.D., DSc. Název diplomové práce: Biosenzory pro testování inhibitorů cholinesteras Acetylcholinesterasa (AChE, EC 3.1.1.7) štěpí acetylcholin v nervovém systému. Vazba acetylcholinu na receptor a následné hydrolytické štěpení v centrálních synapsích nebo na nervosvalových ploténkách umožňuje opakovaný přenos nervového vzruchu. Tím je zabezpečen vědomý pohyb a optimální kognitivní schopnosti člověka. Při styku AChE s inhibitorem dojde k jejímu zablokování, tedy ke zhoršení kognitivních funkcí a zasaženého postihnou křeče, při delší expozici může nastat smrt. Cílem práce bylo otestovat různé přístupy v měření aktivity AChE inhibované fyzostigminem a takrinem. Dalším cílem byla příprava biosenzorů pomocí vybraných imobilizačních technik. Vyzkoušeny byly tři postupy imobilizace - dva s použitím elektrochemických detektorů, kdy byla cílem optimalizace metody stanovení aktivity AChE měřením rozdílu pH (AChE kotvena v chitosanové membráně), nebo chronoamperometricky (AChE sorbována na tištěné elektrodě). Třetí zkoumanou cestu zahrnovala imobilizace AChE na magnetické...
|
|
|
Spektrofotometrické stanovení aktivity cholinesterasy v přítomnosti karbamátových inhibitorů
Keresteš, Ondřej ; Kučerová, Marta (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Student: Ondřej Keresteš Vedoucí práce: PharmDr. Marta Kučerová, Ph.D. Školitel: pplk. prof. RNDr. Miroslav Pohanka, Ph.D., DSc. Název bakalářské práce: Spektrofotometrické stanovení aktivity cholinesteras v prostředí karbamátových inhibitorů V současné době jsou známy dva typy cholinesteras. Prvním je acetylcholinesterasa (AChE, EC 3.1.1.7), která je zodpovědná za štěpení acetylcholinu v centrálním i periferním nervovém systému. Druhým typem je butyrylcholinesterasa (BChE, EC 3.1.1.8), někdy nazývaná též pseudocholinesterasa. Její význam ještě nebyl plně pochopen. Inhibitory karbamátového typu se řadí mezi reversibilní inhibitory cholinesteras. Jejich účinnost časem slábne vlivem jejich vlastní hydrolýzy. Cílem této experimentální práce bylo jednak stanovit kinetické parametry AChE a BChE, dále optimalizovat metodu pro stanovení vybraných karbamátových inhibitorů - karbofuranu a fysostigminu. Stanovení aktivity cholinesteras bylo provedeno Ellmanovou metodou. Provedena byla mimo jiné optimalizace stanovení rychlosti vazby inhibitorů. V našem případě bylo dosaženo plného navázání inhibitorů již mezi 7-8 minutou. Bylo zjištěno, že oba inhibitory mají na zkoumané enzymy podobný účinek....
|
host ::
RSS.