|
|
Mutageneze genů psbO1 a psbO2 v Arabidopsis thaliana pomocí metody CRISPR-Cas9
Hlavsová, Kateřina ; Duchoslav, Miloš (vedoucí práce) ; Knoppová, Jana (oponent)
Protein PsbO je jednou z nezbytných podjednotek fotosystému II, proteinového komplexu nacházejícího se v tylakoidních membránách chloroplastů. PsbO má důležitou funkci pro stabilizaci manganového klastru, na které probíhá rozklad vody a produkce kyslíku. V Arabidopsis thaliana mádvěizoformy,jejichžfunkcevšaknebyladoposuduspokojivěobjasněna.Dosavadní poznatky o izoformách PsbO1 a PsbO2 pochází zejména z experimentůprováděnýchnaT -DNA inzerčníchmutantech psbo1 a psbo2. Získáním životaschopnýchdvojitýchmutantů psbo1 psbo2 vyvstalaotázkaohledněmíryexpresemutovanýchgenůumutantů psbo1 a psbo2. Proto jsme pomocí metody CRISPR-Cas9 vytvořiliknock -out mutantní linie psbo1cr a psbo2cr, které jsme porovnali s doposud používan ými T-DNA inzerčními mutanty psbo1 a psbo2. Provedli jsme porovnání základních fenotypových charakteristik, parametrů fluorescence chlorofylu a a imunodotekciproteinůPsbO1aPsbO2.Výsledkyukazují,žeikdyžmožnáv T-DNAinzerčních mutantech probíhá slabáexpresemutovanýchgenů,měřenéparametrymutantů psbo1cr a psbo2cr jsou s nimi shodné. Klíčováslova: PsbO, fotosystém II, CRISPR-Cas9, mutageneze, Arabidopsis thaliana
|
|
|
Role of PsbO isoforms in Arabidopsis thaliana
Svoboda, Václav ; Duchoslav, Miloš (vedoucí práce) ; Knoppová, Jana (oponent)
Role izoforem PsbO v Arabidopsis thaliana Abstrakt Fotosystém II (PSII) využívá sluneční energii k oxidaci vody a redukci plastochinonu. Oxidace vody probíhá na kyslík vyvíjejícím komplexu (OEC). OEC je stabilizován vnějšími podjednotkami PSII z nichž největší a nejdůležitější je PsbO, mangan-stabilizující protein, který se vyskytuje ve všech dosud známých oxygenních fotosyntetických organizmech. Modelová rostlina Arabidopsis thaliana exprimuje dvě izoformy genu psbO, jmenovitě PsbO1 a PsbO2. Nedávná pozorování mutantů psbo1 a psbo2, kteří postrádají funkční geny psbO1, respektive psbO2, přinesla nové skutečnosti o konkrétních rolích izoforem PsbO při fotosyntéze. PsbO1 je obecně považována za hlavní izoformu umožňující efektivní rozklad vody, zatímco pro PsbO2 byla navržena role v opravných procesech PSII (výměna světlem poškozeného proteinu D1). Tato práce je zaměřena na konkrétní role izoforem PsbO v Arabidopsis při fotosyntéze a zejména se soustředí na odpověď na světelný stres. Pro rozsáhlou biochemickou studii byli použiti mutanti psbo1, psbo2 a wild type Col-0. Naším cílem bylo zjistit jak je ovlivněna celková struktura a složení thylakoidů u mutantů. Dále zjistit jak probíhá odpověď na světelný stres u wild type s ohledem na změny v množství jednotlivých subkompartmentů, změny v subpopulacích...
|
|
|
Biogenesis of Photosystem II in the Model Cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 - The Role of Selected Auxiliary Protein Factors and Subcellular Localisation
KNOPPOVÁ, Jana
This thesis explores localisations and roles of three auxiliary protein factors involved in the biogenesis of Photosystem II (PSII) in the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 and contributes to subcellular localisation of the initial steps of PSII biogenesis and repair-related D1 synthesis. The main results consist in i) identification of a functional interaction of the protein factor Psb27 with a lumenal domain of the Photosystem II subunit CP43, ii) discovery of a novel pigment binding complex formed by the Ycf39 protein and high-light-inducible proteins implicated in photoprotection and delivery of recycled chlorophyll to newly synthesized D1 protein during the PSII reaction centre formation, iii) providing evidence that the early steps of PSII assembly and the repair-related D1 synthesis occur in the thylakoid membrane of Synechocystis, and iv) revealing that the cyanobacterial PsbP orthologue, CyanoP, assists in the early phase of PSII biogenesis as an assembly factor facilitating the association of D2 and D1 assembly modules.
|
host ::
RSS.