Národní úložiště šedé literatury Nalezeno 2 záznamů.  Hledání trvalo 0.00 vteřin. 
Příprava a využití systému pro studium regulace genové exprese kvasinkových lineárních cytoplasmatických plasmidů
Horáčková, Kamila ; Vopálenský, Václav (vedoucí práce) ; Čáp, Michal (oponent)
O translaci lineárních cytoplasmatických plasmidů vyskytujících se u kvasinky Kluyveromyces lactis existují pouze velmi kusé informace. V současné době je poměrně dobře prozkoumán jejich transkripční aparát i celý transkriptom. Studium transkriptů lineárních plasmidů odhalilo velmi netypické uspořádání jejich 5ʼ konců, které obsahují netemplátovou polyadenylaci a postrádají N7 methylguanosinovou čepičku. Právě přítomnost této struktury na 5ʼ konci plasmudů specifických mRNA vyvolalo otázku iniciace translace. Tato práce se zabývala přípravou reportérového systému vhodného pro studium vlivu počtu netěmplátově přidaných adenosinů na 5ʼ konec mRNA lineárních plasmidů. Prvním krokem byla konstrukce duálního kvasinkového plasmidu nesoucího dva reportérové geny pod kontrolou dvou různých promotorů. Po jeho úspěšné konstrukci byla měřena aktivita promotorů TEF1 a PGK1, kdy se promotor TEF1 ukázal cca dvakrát silnější. Rovněž byl stanoven transkripční start obou promotorů. Druhým krokem byla konstrukce reportérového systému rovnou v kvasinkových plasmidech pGKL. Reportérové geny byly pod kontrolou dvou promotorů pocházejících z pGKL plasmidů iniciujících vznik trankriptů s různou strukturou. Po měření síly promotorů se ukázalo, že jejich síla je v porovnání s promotory TEF1 a PGK1 velmi nízká, až...
Vliv cílených mutací receptoru cytokininů CRE1/AHK4 z Arabidopsis thaliana na jeho odezvu vůči přirozeným a syntetickým cytokininům
Horáčková, Kamila
Receptor cytokininů CRE1/AHK4 je součástí signální dráhy Arabidopsis thaliana. Studovat a lépe pochopit jeho funkci usnadňuje reportérový systém využívající transgenní E. coli kmen KMI001, který v reakci na signalizaci AHK4 indukuje expresi enzymu ß-galaktosidázy. Práce ,,Vliv cílených mutací receptoru cytokininů CRE1/AHK4 z Arabidopsis thaliana na jeho odezvu vůči přirozeným a syntetickým cytokininům“ má dvě části, kdy první se zabývá charakterizací receptoru AHK4, jeho strukturou, funkcí, signální dráhou v A. thaliana a jeho mutantními formami. Dále je zde popsán kmen E. coli KMI001 využívaný pro studium receptoru. Druhá část práce je zaměřená na optimalizaci detekce ß-galaktosidázové aktivity KMI001 a konstrukci mutantních variant AHK4 receptoru mutagenezí pomocí PCR a na test jejich aktivity. V práci byli připraveni jednobodoví mutanti s mutací v druhé transmembránové doméně a na okraji histidinkinázové domény AHK4 receptoru. Dále byly připravené plazmidy s mutantními variantami AHK4 transformovány do E. coli kmene KMI001, kde byla testována jejich odezva vůči koncentrační řadě různých typů cytokininu. Výsledky nejen potvrdily dříve pozorované zvýšení citlivosti k trans¬-zeatinu, ale ukázaly i možné významné snížení střední efektivní koncentrace pro 6-benzylaminopurin a thidiazuron.

Viz též: podobná jména autorů
2 Horáčková, Karolína
6 Horáčková, Kateřina
5 Horáčková, Klára
4 Horáčková, Kristýna
2 Horáčková, Květa
Chcete být upozorněni, pokud se objeví nové záznamy odpovídající tomuto dotazu?
Přihlásit se k odběru RSS.