|
|
Vývoj experimentálního modelu pro testování žloutkových protilátek jako prostředku profylaxe bakteriálních infekcí
Hadrabová, Jana ; Hodek, Petr (vedoucí práce) ; Nosková, Libuše (oponent)
Respirační systém pacientů s cystickou fibrosou (CF) je ovlivněn geneticky podmíněným defektem v proteinovém transportéru pro chloridové ionty CFTR ("Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator"). Hlavní komplikací tohoto onemocnění jsou chronické infekce dýchacích cest, zejména bakterií Pseudomonas aeruginosa. Tato bakterie má vzhledem k asialyzovanému povrchu plicního epitelu CF pacientů usnadněnou adhezi např. pomocí lektinu PAIIL. Protože již byla prokázána schopnost slepičích protilátek bránit adhezi Pseudomonas aeruginosa na plicní buňky, byl v této práci sledován vliv protilátek IgY specifických proti PAIIL na rozvoj infekce v plicích experimentálních zvířat. Cílem byla optimalizace experimentálního modelu, na kterém by bylo možné sledovat vývoj infekce luminiscenčního kmene bakterií in vivo na optickém tomografu. Experimenty byly nejprve prováděny na potkanech Wistar. Protože však bakterie v potkaních plicích nebyly na dostupném zařízení měřitelné in vivo, ukázal se experimentální model potkana jako nevhodný. Dále bylo pokračováno na myších modelech. Byly provedeny experimenty pro optimalizaci inhalačního podání protilátek IgY a intratracheální aplikace bakteriální suspenze. Na vytvořeném systému byly testovány účinky protilátkové profylaxe na vznik bakteriální infekce ve srovnání s...
|
|
|
Slepičí protilátky jako prostředek pasivní imunizaci nemocných cystickou fibrosou
Hadrabová, Jana ; Hodek, Petr (vedoucí práce) ; Kubíčková, Božena (oponent)
Cystická fibróza (CF) je vrozené onemocnění zejména dýchacích cest a zažívacího ústrojí. Přenos je autozomálně recesivní, nemoc spočívá v mutaci genu pro protein CFTR, který funguje jako iontový kanál pro přenos chloridových aniontů. Důsledkem omezení jeho funkce je výrazné zahuštění plicního sekretu, ve kterém se pak snadněji zachytávají a rostou specifické mikroorganismy, zejména Pseudomonas aeruginosa. Infekce je nejprve léčena pomocí antibiotik, bakterie se však vůči nim brzy stávají rezistentní. Vzniká chronický zánět, jehož následkem je jizvení plicní tkáně (fibrosa). Zejména kvůli rezistencím vůči antibiotikům jsou hledány nové metody léčby pacientů s CF. Takovou metodou by mohla být pasivní imunizace pomocí slepičích protilátek IgY, které jsou specifické proti virulenčním faktorům Pseudomonas aeruginosa a jsou schopny je neutralizovat. Tyto protilátky je možné z roztoku pomocí nebulizátoru přeměnit na aerosol, který by mohli pacienti vdechovat. Protože by, vzhledem ke své struktuře, samy mohly potenciálně způsobovat zánětlivé reakce, bylo potřeba vyzkoušet inhalaci zdravými jedinci. K tomu bylo využito potkanů Wistar, jako experimentálního modelu. Nejprve byly protilátky izolovány, pak byl enzymaticky odštěpen fragment Fab a byla provedena purifikace. V inhalačním experimentu byl použit...
|
host ::
RSS.