|
|
Kryokonzervační metody ve výrobě léčivých přípravků moderní terapie
Jandová, Miroslava ; Čížková, Dana (vedoucí práce) ; Stříbrná, Lucie (oponent) ; Dubový, Petr (oponent)
Souhrn Disertační práce je zaměřena na uplatnění kryokonzervačních metod při opatřování, resp. zpracování základní suroviny pro výrobu léčivých přípravků moderní terapie (LPMT) při jejich vlastní výrobě a při jejich dočasném skladování v kryokonzervačním skladu zdravotnického zařízení před jejich použitím. Všechny výsledky uvedené v této práci byly dosaženy za přísných podmínek stanovených pro výše uvedené činnosti předpisy Evropské unie a harmonizovanými právními normami ČR. První část je věnována validaci odběru a kryokonzervace výchozí suroviny - mononukleárních buněk periferní krve pro výrobu registrovaných LPMT pomocí chimérických antigenních receptorů T-lymfocytů (CAR-T). Praktickým výstupem z tohoto bylo získání povolení opatřování, zpracování a distribuce mononukleárních buněk pro výrobu LPMT a také získání vývozní licence do země místa výroby geneticky manipulovaného LPMT. V druhé části jsou prezentovány a vyhodnoceny výsledky odběru výchozí suroviny, kostní dřeně, pro výrobu hodnoceného LPMT na bázi lidských mezenchymálních stromálních buněk (hMSCs) a vývoje kryokonzervačního protokolu pro hodnocený léčivý přípravek moderní terapie za podmínek správné výrobní praxe (SVP) jako experimentální část klinické studie EUDRA CT č. 2016-000926-21. Protokol byl s úspěchem použit u všech hodnocených...
|
|
|
Difúzní parametry CNS u vybraných patologických stavů a buněčná terapie míšního poranění
Homola, Aleš ; Syková, Eva (vedoucí práce) ; Zvěřina, Eduard (oponent) ; Pokorný, Jaroslav (oponent) ; Dubový, Petr (oponent)
Akutní hypoxie nebo ischémie patří v neurologii k etiologicky nejvýznamnějším jednotkám vedoucím k náhlé mozkové dysfunkci. V časné fázi je jejím podkladem membránová depolarizace vedoucí k nadměrnému přesunu iontů a vody. Buněčný edém vede ke změnše n í velikosti ECP a tedy i zvýšení koncetrace látek v něm obsažených, včetně toxických metabolitů. Délka trvání patologického podnětu je určuj ícím faktorem pro vznik nevratného buněčné poškození formou apopotózy nebo nekrózy. Změny difúzních parametrů způsobené hypoxickým podnětem byly e x p e rim entálně studovány dosud pouze na modelu globální anoxie navozené srdeční zástavou. Na tomto modelu byly zjištěny dramatické změny ve velikosti a tortuozitě ECP mozkové k ůry , které se rozvinuly během několika minut po zástavě mozkové perfúze. Rozhodli jsme se proto zkoumat změny difúzních parametrů ECP mozkové kůry i na modelech, kde délka trvání patologického podnětu byla časově omezená. Jednalo se o model tranzientní hypoxie a tranzientní hypoxie/ischemie. Získaná data jsme korelovali se změnam i v extracelulární koncetraci laktátu, glukózy a glutamátu. Během tranzientní hypoxie/ischémie jsme zaznamenali postupný rozvoj změn difúzních parametrů ECP po celou dobu trvání podnětu. Konečné hodnoty byly obdobné těm, které byly zjištěny při terminální anoxii. Naproti...
|
|
|
Biomaterials and stem cells in spinal cord injury
Tukmachev, Dmitry ; Syková, Eva (vedoucí práce) ; Dubový, Petr (oponent) ; Sameš, Martin (oponent)
Poranění míchy (SCI) je velmi vážné trauma, které v současné době nelze účinně léčit. Použití hydrogelů na bázi ECM jako podpůrného a stimulačního prostředí a transplantace kmenových buněk představují slibné přístupy k léčbě SCI. Současné léčebné postupy však limituje neefektivní transport kmenových buněk do místa léze. Cílem této studie byl proto vývoj léčby SCI pomocí hydrogelů na bázi ECM a účinného systému pro transport kmenových buněk. Byl navržen neinvazivní magnetický systém, který byl následně použit k akumulaci kmenových buněk značených SPION na specifickém místě léze SCI. Decelularizované tkáně prasečí SC a UB syntetický hydrogel P(HEMA-AEMA) s orientovanou porozitou a modifikované HA-PH-RGD kyseliny hyaluronové byly transplantovány do míšní léze potkanů, a to buď s kmenovými buňkami nebo bez kmenových buněk. Následovala histologická analýza a analýza genové exprese. Všechny typy hydrogelů se integrovaly do léze a stimulovaly neovaskularizaci a axonální vrůstání do léze. Nebyl zjištěn žádný významný rozdíl v infiltraci tkáně mezi prostými hydrogely a hydrogely s nasazenými kmenovými buňkami. Subakutní injekce HA-PH-RGD/fibrinogenu v kombinaci s lidskými mezenchymálními kmenovými buňkami získanými z Whartonova želé však zesílila axonální vrůstání do léze. V hydrogelech byla pozorována...
|
|
| |
|
|
Difúzní parametry CNS u vybraných patologických stavů a buněčná terapie míšního poranění
Homola, Aleš ; Syková, Eva (vedoucí práce) ; Zvěřina, Eduard (oponent) ; Pokorný, Jaroslav (oponent) ; Dubový, Petr (oponent)
Akutní hypoxie nebo ischémie patří v neurologii k etiologicky nejvýznamnějším jednotkám vedoucím k náhlé mozkové dysfunkci. V časné fázi je jejím podkladem membránová depolarizace vedoucí k nadměrnému přesunu iontů a vody. Buněčný edém vede ke změnše n í velikosti ECP a tedy i zvýšení koncetrace látek v něm obsažených, včetně toxických metabolitů. Délka trvání patologického podnětu je určuj ícím faktorem pro vznik nevratného buněčné poškození formou apopotózy nebo nekrózy. Změny difúzních parametrů způsobené hypoxickým podnětem byly e x p e rim entálně studovány dosud pouze na modelu globální anoxie navozené srdeční zástavou. Na tomto modelu byly zjištěny dramatické změny ve velikosti a tortuozitě ECP mozkové k ůry , které se rozvinuly během několika minut po zástavě mozkové perfúze. Rozhodli jsme se proto zkoumat změny difúzních parametrů ECP mozkové kůry i na modelech, kde délka trvání patologického podnětu byla časově omezená. Jednalo se o model tranzientní hypoxie a tranzientní hypoxie/ischemie. Získaná data jsme korelovali se změnam i v extracelulární koncetraci laktátu, glukózy a glutamátu. Během tranzientní hypoxie/ischémie jsme zaznamenali postupný rozvoj změn difúzních parametrů ECP po celou dobu trvání podnětu. Konečné hodnoty byly obdobné těm, které byly zjištěny při terminální anoxii. Naproti...
|
host ::
RSS.