|
|
Sledování interakce pesticidu s acetylcholinesterasou za použití biosenzoru
Drobík, Oto ; Opletalová, Veronika (vedoucí práce) ; Vlček, Vítězslav (oponent)
SLEDOVÁNÍ INTERAKCE PESTICIDU S ACETYLCHOLINESTERASOU ZA POUŽITÍ BIOSENZORU Oto Drobík Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Organofosforové a karbamátové pesticidy jsou toxické látky užívané v zemědělství jako insekticida. Pro člověka jsou tyto látky velmi toxické a akutní otrava může vést až k úmrtí, protože dochází k inhibici acetylcholinesterasy, což vede k nadměrné kumulaci acetylcholinu v organismu. V rámci diplomové práce byl připraven funkční biosenzor, pro který byl použit standardní tříelektrodový amperometrický senzor vyrobený sítotiskem. Byly testovány senzory s platinovou a uhlíkovou pracovní elektrodou. Dále byla vybrána vhodná metoda elektrochemické detekce, byly optimalizovány některé reakční podmínky a vyhodnoceny kinetické parametry enzymové reakce. Také byly testovány a porovnány různé metody imobilizace acetylcholinesterasy k senzoru a byla vyhodnocena jejich úspěšnost. Jako zástupce pesticidů byly vybrány vzorky paraoxon-methyl a diisopropylfluorfosfát. Byla stanovena mez detekce pro oba pesticidy, která se pohybovala v rozmezí 10-6 - 10-5 mol/l. Pro ověření správnosti získaných výsledků byla rovněž provedena i kontrola pomocí spektrofotometrického stanovení Ellmanovou metodou.
|
|
|
Kolorimetrická metoda založená na imobilizované acetylcholinesterase pro stanovení účinnosti inhibitorů používaných v terapii
Drobík, Oto ; Opletalová, Veronika (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Mgr. Oto Drobík Konzultant doc. RNDr. Veronika Opletalová, Ph.D. Název rigorózní práce Kolorimetrická metoda založená na imobilizované acetylcholinesterase pro stanovení účinnosti inhibitorů používaných v terapii. Mezi inhibitory acetylcholinesterasy (AChE) patří velké množství látek, které se využívají v zemědělství například jako insekticidy nebo pesticidy. Používají se také jako nervově paralytické látky pro vojenské účely. Některé našly využití i v léčbě nemocí jako je myastenia gravis nebo Alzheimerova nemoc. V rámci rigorózní práce byla úspěšně imobilizována AChE za pomocí želatiny na dno 96 jamkové destičky. Pomocí kolorimetrické metody byly optimalizovány reakční podmínky, byla testována i odolnost imobilizované AChE vůči vymytí. Dále byla zjištěna míra inhibice AChE rozpouštědly a byly vyhodnoceny kinetické parametry enzymové reakce. Jako zástupci inhibitorů AChE byly testovány vzorky takrinu a pyridostigminu. Dále se provedl dlouhodobější test stability imobilizované AChE. Dosažené výsledky ukazují, že popsaná metoda je vhodná pro rutinní sledování účinnosti inhibitorů cholinesteras.
|
|
|
Sledování interakce pesticidu s acetylcholinesterasou za použití biosenzoru
Drobík, Oto ; Opletalová, Veronika (vedoucí práce) ; Vlček, Vítězslav (oponent)
SLEDOVÁNÍ INTERAKCE PESTICIDU S ACETYLCHOLINESTERASOU ZA POUŽITÍ BIOSENZORU Oto Drobík Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Organofosforové a karbamátové pesticidy jsou toxické látky užívané v zemědělství jako insekticida. Pro člověka jsou tyto látky velmi toxické a akutní otrava může vést až k úmrtí, protože dochází k inhibici acetylcholinesterasy, což vede k nadměrné kumulaci acetylcholinu v organismu. V rámci diplomové práce byl připraven funkční biosenzor, pro který byl použit standardní tříelektrodový amperometrický senzor vyrobený sítotiskem. Byly testovány senzory s platinovou a uhlíkovou pracovní elektrodou. Dále byla vybrána vhodná metoda elektrochemické detekce, byly optimalizovány některé reakční podmínky a vyhodnoceny kinetické parametry enzymové reakce. Také byly testovány a porovnány různé metody imobilizace acetylcholinesterasy k senzoru a byla vyhodnocena jejich úspěšnost. Jako zástupce pesticidů byly vybrány vzorky paraoxon-methyl a diisopropylfluorfosfát. Byla stanovena mez detekce pro oba pesticidy, která se pohybovala v rozmezí 10-6 - 10-5 mol/l. Pro ověření správnosti získaných výsledků byla rovněž provedena i kontrola pomocí spektrofotometrického stanovení Ellmanovou metodou.
|
host ::
RSS.