|
|
Stanovení oxidovaného a redukovaného glutathionu v hemolyzátoru erytrocytů metodou kapilární elektroforézy s UV-VIS detekcí
Anderlová, Martina ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Vávrová, Jaroslava (oponent)
Souhrn V současné době existuje celá řada metod pro stanovení glutathionu v biologickém materiálu. Cílem této práce bylo nalézt vhodnou metodu a optimální podmínky pro separaci a identifikaci redukovaného (GSH) a oxidovaného (GSSG) glutathionu v erytrocytech metodou vysokoúčinné kapilární elektroforézy. Snažili jsme se eliminovat dlouhé preanalytické postupy uváděné v mnoha publikovaných článcích a nalézt optimální a rychlou metodu pro stanovení forem glutathionu. Optimalizovali jsme podmínky, které ovlivňují analýzu GSH a GSSG jako např. pH a koncentrace borátového pufru, průměr a délka kapiláry, napětí, vlnová délka, čas dávkování, teplota a frekvence. Optimalizace byla provedena na dvou různých systémech kapilární elektroforézy se záměrem najít nejvhodnější elektroforeogram pro stanovení glutathionu v hemolyzátech. Nejlepší výsledky jsme získali při použití 300 mmol/l borátového pufru o pH 7,8. K separaci jsme použili křemennou kapiláru o délce 47 cm a průměru 75 µm. Měření probíhalo při napětí 25 kV, proudu 30 µA, teplotě 25řC a vlnové délce 200 nm na kapilární elektroforéze firmy Prince Technologies. Po zavedení pracovních podmínek jsme metodu validovali a použili ji pro stanovení GSH a GSSH v hemolyzátech lidských erytrocytů. Z důvodu dobré a rychlé analytické přípravy může být tato metoda použita pro...
|
|
|
Stanovení oxidovaného a redukovaného glutathionu v hemolyzátoru erytrocytů metodou kapilární elektroforézy s UV-VIS detekcí
Anderlová, Martina ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Vávrová, Jaroslava (oponent)
Souhrn V současné době existuje celá řada metod pro stanovení glutathionu v biologickém materiálu. Cílem této práce bylo nalézt vhodnou metodu a optimální podmínky pro separaci a identifikaci redukovaného (GSH) a oxidovaného (GSSG) glutathionu v erytrocytech metodou vysokoúčinné kapilární elektroforézy. Snažili jsme se eliminovat dlouhé preanalytické postupy uváděné v mnoha publikovaných článcích a nalézt optimální a rychlou metodu pro stanovení forem glutathionu. Optimalizovali jsme podmínky, které ovlivňují analýzu GSH a GSSG jako např. pH a koncentrace borátového pufru, průměr a délka kapiláry, napětí, vlnová délka, čas dávkování, teplota a frekvence. Optimalizace byla provedena na dvou různých systémech kapilární elektroforézy se záměrem najít nejvhodnější elektroforeogram pro stanovení glutathionu v hemolyzátech. Nejlepší výsledky jsme získali při použití 300 mmol/l borátového pufru o pH 7,8. K separaci jsme použili křemennou kapiláru o délce 47 cm a průměru 75 µm. Měření probíhalo při napětí 25 kV, proudu 30 µA, teplotě 25řC a vlnové délce 200 nm na kapilární elektroforéze firmy Prince Technologies. Po zavedení pracovních podmínek jsme metodu validovali a použili ji pro stanovení GSH a GSSH v hemolyzátech lidských erytrocytů. Z důvodu dobré a rychlé analytické přípravy může být tato metoda použita pro...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.