|
|
Chromatografické stanovení O-alkyl methylfosfonových kyselin v biologickém materiálu
Nováčková, Karolína ; Váňová, Nela (vedoucí práce) ; Štěrbová, Petra (oponent)
Diplomová práce se zabývá chromatografickým stanovení O-alkyl methylfosfonových kyselin v lidské plazmě a úpravou biologického materiálu před vlastní analýzou. Teoretická část se zabývala problematikou jednotlivých skupin bojových látek, jejich mechanismem účinku a metabolismem v lidském těle. Praktická část byla věnována úpravě vzorku lidské plazmy s cílem vyvinout takový postup, který umožní následné stanovení koncentrace volných O-alkyl methylfosfonových kyselin jakožto metabolitů bojových chemických látek, a pomůže je tak odlišit od těch, které se uvolní z vazby na bílkoviny lidské krve. Druhým cílem bylo vyvrátit možnou interferenci mezi derivatizačním činidlem a volnými O-alkyl methylfosfonovými kyselinami. Metodika a chromatografická analýza byly aplikovány na vzorky lidské plazmy s přídavkem pinakolyl methylfosfonové kyseliny (PMPA) a ethyl methylfosfonové kyseliny (EMPA). Tyto vzorky byly nejprve upraveny pomocí centrifugační filtrace, jejíž postup byl předmětem vývoje. Centrifugace probíhala v centrifugačních zkumavkách Vivaspin 6. Nejefektivnější postup byl takový, kdy zkumavky byly nejprve propláchnuty 400 μl vody a centrifugovány 10 min při 8 000 g. Následně byl na zkumavky nanesen vzorek, centrifugován (20 min, 8 000 g) a opět byly promyty 400 μl vody (centrifugace 10 min, 8 000 g)....
|
host ::
RSS.