|
|
Stanovení 5-hydroxyindoloctové kyseliny pomocí HPLC s elektrochemickou detekcí
Harvila, Marek ; Dejmková, Hana (vedoucí práce) ; Schwarzová, Karolina (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá stanovením 5-hydroxyindoloctové kyseliny (5-HIAA) pomocí HPLC s amperometrickou detekcí na borem dopované diamantové filmové elektrodě (BDDFE) v matrici lidské moči. 5-hydroxyindoloctová kyselina je finálním metabolitem hormonu serotoninu a slouží jako biomarker pro diagnostiku přítomnosti karcinoidního tumoru vyskytující se nejhojněji v gastrointestinálním traktu a v plících lidského těla. Metoda stanovení byla úspěšně optimalizována, podmínky separace byly: kolona LiChroCART® 250-4, Purospher® RP-18 (5µm), průtoková rychlost 0,5 ml·min-1 , gradientová eluce s následujícím programem gradientu: 0 min: 10/90, 10 min: 80/20, 15 min 80/20 (MeOH/AF-pufr,v/v), dávkováno bylo 20 µl vzorku. Optimalizovány byly i podmínky detekce: vlnová délka UV spektrofotometrického detektoru byla nastavena na 276 nm a amperometrická detekce na borem dopované diamantové filmové elektrody probíhala při potenciálu 1,1 V oproti argentochloridové referenční elektrodě. Oběma detekčními technikami byly proměřeny koncentrační závislosti roztoků standardu v rozmezí 1·10-7 až 1·10-4 mol∙l-1 a potvrzena jejich linearita. Pomocí nejnižší koncentrační řady 1·10-7 až 1·10-6 mol∙l-1 byly stanoveny na základě poměru signál/šum mez detekce a stanovitelnosti. Pro spektrofotometrickou detekci bylo dosaženo...
|
host ::
RSS.