|
|
Potenciometrické stanovení gentamycinu ve farmaceutických přípravcích
Kočí, Martina ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
1. Abstrakt Gentamicin je aminoglykosidové antibiotikum, které se využívá k léčbě řady onemocnění zejména způsobené gramnegativními bakteriemi. Tradičně je tato látka analyzována především s využitím chromatografických metod. Současně byly popsány další metody jako je spektrofotometrie, průtoková injekční analýza (FIA) s chemiluminiscenční detekcí. V této práci je uvedena citlivá, rychlá a ekonomicky výhodná potenciometrická metoda pro stanovení gentamicinu. Byla vyvinuta iontově selektivní elektroda s PVC membránou, která využívá jako ionoforů různé druhy cyklodextrinů a jejich derivátů nebo komplex Evansovy modři s gentamicinem. Při vývoji elektrod byla testována různá rozpouštědla mediátorů a další pomocné látky pro dosažení optimálních charakteristik membrán. Vyvinuté ISE byly použity pro potenciometrické stanovení obsahu gentamicinu ve farmaceutických přípravcích.
|
|
|
HPLC analýza makrolidových a tetracyklinových antibiotik v nemocničních odpadních vodách
Vrubl, Jaroslav ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
HPLC analýza makrolidových a tetracyklinových antibiotik v nemocničních odpadních vodách ABSTRAKT Tetracyklinová a makrolidová antibiotika jsou léčiva užívaná k léčbě infečních onemocnění jak v humánní, tak veterinární medicině.Podobně jako jiné látky znečišťující životní prostředí, mohou v prostředí přetrvávat a indukovat negativní účinky v pozemních i vodních organismech a indukovat vznik bakteriální rezistence. Citlivé analytické metody jsou nezbytné k jejich stanovení v odpadních vodách k odhadu rizika plynoucího z jejich výskytu v životním prostředí. Kvůli vysoké citlivosti, je metoda HPLC-MS nejpoužívanější metodou. Metody využívající UV nebo fluorescenční detekci byly studovány jako alternativa k HPLC-MS. Kolony Hichrom Lichrosorb RP 18, 250 x 4.6 mm i. d. a Chromolith Performance RP 18e, 100 x 4.6 mm i.d. byly užívány při analýze s UV detekcí. Použita byla mobilní fáze ACN: 0.05M KH2PO4 (pH 7.5) 30:70 (v/v), UV detekce probíhala při 215 nm. Metoda využívající derivatizaci pomocí FMOC-Cl byla studována. Analýza byla prováděna na koloně Chromolith Performance RP 18e, 100 x 4.6 mm i. d, fluorescenční detektor byl nastaven na excitační vlnovou délku 286 nm, emisní vlnová délka byla 315 nm. Metoda ke stanovení tetracyklinů s UV detekcí používala gradientovou eluci ACN a 0.02M kyseliny šťavelové. Analýza...
|
|
|
Charakterizace kořenových exsudátů pomocí HPLC
Flutková, Kateřina ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
V první části této práce bylo provedeno HPLC exsudátů z kořínků naklíčených semen anglického trávníku s UV detekcí při 210 nm. Při této analýze byla použita kolona Acclaim OA 4 x 150 mm, Dionex, pracovalo se za laboratorní teploty a jako mobilní fáze sloužil 100 mM síran sodný o pH 2,65 a průtoku 0,6 ml/min. Nastřikovaný objem byl 40 μl, měření proběhlo za isokratických podmínek. Standardy byly roztoky kyselin šťavelové, vinné, mravenčí, jablečné, iso-citrónové, mléčné, octové, citrónové, jantarové, fumarové, cis- akonitové a trans-akonitové a jejich směs. Ze srovnání chromatogramů z našich měření a s přihlédnutím k literatuře bylo usouzeno, že v exsudátech se nachází kyseliny šťavelová a vinná, příp. též jablečná a octová kyselina. Tento předpoklad byl dokazován pomocí HPLC s diode-array detektorem. Druhá část práce spočívala v proměření vzorků exsudátů pomocí HPLC s diode-array detekcí s možností gradientové eluce. Použita byla kolona ProntoSIL 250 x 3 mm, Bischoff, pracovalo se za laboratorní teploty a jako mobilní fáze sloužila 50 mM kyselina ortho- fosforečná o průtoku 0,7 ml/min. Bylo nastřikováno 10 μl. Jako standardy byly použity roztoky kyselin šťavelové, vinné, jablečné, octové, citrónové a fumarové a jejich směs. Po porovnání chromatogramů vzorků a prohlédnutí spekter čistoty bylo vyhodnoceno, že...
|
|
|
Stanovení glukosaminu metodou kapilární zónové elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí
Los, Petr ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Pospíšilová, Marie (oponent)
7.1.1 Stanovení glukosaminu metodou kapilární zónové elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí Byla navržena nová CE metoda s bezkontaktní vodivostní detekcí pro analýzu glukosaminu a draselných kationtů v léčivých přípravcích. S optimálními podmínkami (elektrolyt 30mM tlumivý roztok kyseliny octové o pH = 5,2; napětí 30kV; 25řC) glukosamin (migrující jako volná baze) byl dostatečně separován od draselných kationtů, které se mohou v přípravcích objevit jako pomocná látka. Analýza byla vykonána v křemíkové kapiláře (50μm vnitřní průměr, 75cm celková délka, 27 cm k detektoru) a trvala méně než 3 minuty. Kalibrační závislosti byly lineární jak pro glukosamin (100 - 300 μg/ml; R2 = 0.997) tak pro K+ ionty 15 - 75 μg/ml; R2 = 0.997) při použití ethanolaminu (100 μg/ml) jako vnitřního standardu. Hodnoty LOD (S/N = 3) byly 9,3μg/ml pro glukosamin a 2,9μg/ml pro K+. Metoda byla použita pro různé lékové formy. Mezidenní přesnost byla stanovena 3 po sobě následující dny, pro celkem 15 navážek bylo RSD ploch glukosaminu 2,35%. Správnost metody byla potvrzena standardním přídavkem (poměr přídavek/nalezené množství se pohyboval v hodnotách 94,6 až 103,3%) a referenční HPLC metodou.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Optimalizace stanovení septonexu ve farmaceutických přípravcích metodou kapilární zónové elektroforézy s využitím organických rozpouštědel jako aditiv v základním elektrolytu
Šindelková, Martina ; Pospíšilová, Marie (oponent) ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce)
OPTIMALIZACE STANOVENÍ SEPTONEXU VE FARMACEUTICKÝCH PŘÍPRAVCÍCH METODOU KAPILÁRNÍ ZÓNOVÉ ELEKTROFORÉZY S VYUŽITÍM ORGANICKÝCH ROZPOUŠTĚDEL JAKO ADITIV V ZÁKLADNÍM ELEKTROLYTU Pro stanovení septonexu ve farmaceutických přípravcích byla vyvinuta nová metoda kapilární zónové elektroforézy s bezkontaktní vodivostní detekcí. Optimální podmínky pro separaci a stanovení septonexu byly následující: základní elektrolyt 30mM MES upravený 200mM TRISem na pH = 7,0, který obsahuje (2-hydroxypropyl)-β-cyklodextrin o koncentraci 12,5mg/ml a 20% (objemových) acetonitrilu, pracovní napětí 25kV, teplota termostatu kapiláry 25řC, nástřik vzorku 6 sekund při tlaku 50mbar. Jako vnitřní standard byl použit arginin (200µg/ml). Pík septonexu byl dostatečně separován od píku vnitřního standardu i od EOF. Analýza byla provedena v křemenné kapiláře (vnitřní průměr 50µm, celková délka 75cm a délka k detektoru 45cm). Analýza trvala méně než 5 minut, s promýváním kapiláry méně než 13 minut. Kalibrační závislost byla pro septonex lineární v rozsahu 75µg/ml - 400µg/ml, korelační koeficient r = 0,9997. LOD byl 13,5μg/ml a LOQ byl 45μg/ml. Metoda je použitelná jak pro kvalitativní, tak pro kvantitativní analýzu HVLP obsahujících septonex.
|
|
|
Stanovení paracetamolu, kyseliny askorbové a fenylefrinu ve farmaceutických přípravcích pomocí micelární elektrokinetické chromatografie
Kubíková, Drahomíra ; Polášek, Miroslav (oponent) ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce)
STANOVENÍ PARACETAMOLU, KYSELINY ASKORBOVÉ A FENYLEFRINU VE FARMACEUTICKÝCH PŘÍPRAVCÍCH POMOCÍ MICELÁRNÍ ELEKTROKINETICKÉ CHROMATOGRAFIE Autor: Kubíková D. Konzultant rigorózní práce: Pospíšilová M., Katedra analytické chemie, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Univerzita Karlova v Praze V této práci je zachycen vývoj a optimalizace metody pro separaci a stanovení paracetamolu (PA), kyseliny askorbové (AA) a fenylefrinu (FE) v léčivých přípravcích pomocí micelární elektrokinetické kapilární chromatografie (MEKC) s UV detekcí při 190 nm a 265 nm. Separace probíhala v nepotažené křemenné kapiláře (31,2 cm x 50 m, efektivní délka 21 cm) při 20 kV, teplotě 20řC a hydrodynamickém dávkování při tlaku 34,5 mbar po dobu 5 s. Optimální základní elektrolyt měl složení: 5 mM tetraboritan sodný, 5 mM dihydrofosforečnan draselný s obsahem 150 mM dodecylsíranu sodného (SDS) v 10 % methanolu. pH* elektrolytu bylo upraveno na hodnotu 8,2. Jako vnitřní standard byl použit methylparaben (MP). Analýza trvala méně jak 9 minut, s promýváním kapiláry méně jak 15 minut. Kalibrační křivky byly lineární v rozmezí koncentrací 0,375 - 9,0 mg/ml (PA), 0,3 - 7,2 mg/ml (AA) a 0,05 - 1,2 mg/ml (FE). Korelační koeficient byl v rozmezí 0,9986 - 0,9998. Validovaná metoda byla úspěšně použita pro kvalitativní a kvantitativní analýzu...
|
|
|
Stanovení nefopamu metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí
Štěpánková, Lucie ; Pospíšilová, Marie (oponent) ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce)
1.1 Souhrn Byla navržena a optimalizována jednoduchá a rychlá metoda pro stanovení nefopam hydrochloridu metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminescenční detekcí. Optimalizovanými parametry byly objemy a koncentrace vzorku nefopam hydrochloridu a reagencií, průtoková rychlost, složení nosného proudu, napětí na fotonásobiči a vliv látek používaných při výrobě tablet. Optimální objem vzorku byl 60 μl a optimální koncentrace činidel (a aspirované objemy) byly 10 mM síran amonnoceričitý v 50 mM kyselině sírové (40 μl), 3 mM tris(2,2'-bipyridyl)dichlororuthenium(II)hexahydrát v 50 mM kyselině sírové (59 μl), 7 mM octan sodný (34 μl). Optimální průtoková rychlost systémem byla 64 μl/s a pro průchod detektotrem 78 μl/s. Optimální napětí na fotonásobiči bylo 280 V. Jako nosný proud byla použita ultračistá voda. Kalibrační křivka byla lineární v rozsahu koncentrací 5.10-7 - 1.10-5 mol/l nefopam hydrochloridu. Parametry kalibrační křivky y = kx + q (kde y je intenzita chemiluminescence v nA a x je koncentrace nefopam hydrochloridu v μmol/l) byly vypočítány metodou lineární regrese. Směrnice k byla 22.398 a absolutní člen q byl 0.7161. Korelační koeficient r byl 0.9996. Relativní směrodatné odchylky byly 2.20 a 2.16 % (n = 10) pro stanovení nefopam hydrochloridu ve standardních roztocích o koncentracích 1.10-6...
|
host ::
RSS.