|
|
Charakterizace vybraného proteinu aktivujícího RAB GTPázy (RAB GAP) z Arabidopsis thaliana
Metlička, Jáchym ; Hála, Michal (vedoucí práce) ; Eliáš, Marek (oponent)
9 ABSTRAKT Rab GTPázy (Raby) jsou nejpočetnější rodinou eukaryotické super-rodiny Ras GTPáz. V aktivní GTP-vázající formě slouží jako nástroje vymezující proměnlivou identitu membrán a skrz rozličné efektory regulují utváření, transport, proměnu a fúzi membránových váčků. To je zásadní pro udržení kompartmentalizované struktury charakteristické pro eukaryotické buňky a pro zajištění endo- a exocytózy. K deaktivaci Rabů dochází skrz vazbu Rab GAPů, tj. proteinů disponujících schopností výrazně urychlit hydrolýzu GTP vázaného v Rabech. Tímto procesem mohou Rab GAPy omezovat rozsah aktivity Rabů a vytyčovat časoprostorové ohraničení odlišných populací Rab GTPáz. V této práci jsem se pokusil popsat Rab GAP, označený jako GAP2, který je zřejmě nutný pro standardní vývoj rostlin huseníčku rolního. Kromě charakteristické katalytické TBC domény obsahuje GAP2 (produkt genu At2g39280) C-terminální coiled-coil strukturní motiv, který byl už dříve pozorován v interakcích s konkrétními Rab GTPázami. Provedl jsem experimenty, jejichž cílem mělo být komplementování T-DNA inzerčního mutanta v genu GAP2, zjištění vnitrobuněčné lokalizace GAP2 proteinu, nalezení dosud nepopsaných interaktorů a popis interakce s Raby objevenými v pilotních experimentech. Výsledky nasvědčují, že GAP2 je primárně cytoplasmatický protein a jeho...
|
|
|
Úloha trehalózy v mykorhizních asociacích
Šoch, Jan ; Ponert, Jan (vedoucí práce) ; Hála, Michal (oponent)
Mykorhizní symbióza je v přírodě velmi rozšířený fenomén. Mezi symbionty dochází k translokaci živin, přičemž velmi důležitou úlohu v tomto procesu hraje disacharid trehalóza. Tento sacharid však také plní řadu důležitých funkcí v metabolismu hub i rostlin. U hub trehalóza slouží především jako zásobní a transportní sacharid. V metabolismu rostlin naproti tomu trehalóza funguje jako signální molekula, a to již v extrémně malých množstvích. Je tedy pravděpodobné, že na fyzickém rozhraní mezi symbionty by tento sacharid mohl sloužit houbám k ovlivnění metabolismu rostliny. Obdobnou úlohu trehalóza patrně zastává v řadě parazitických interakcí. Ve většině typů mykorhizních asociací vytváří syntéza trehalózy v myceliu uhlíkový sink, který vede k přesunu sacharidů z rostliny. Zcela odlišná situace nastává v těch typech mykorhizní symbiózy, kde rostlina získává sacharidy z houbového symbionta. Některé rostliny totiž dokážou trehalózu účinně utilizovat i jako jediný zdroj energie. Zde se proto otevírá otázka, zda by takové rostliny nemohly trehalózu z houbového symbionta cíleně získávat právě i jako zdroj energie a uhlíku. Tato literární rešerše si klade za cíl výše nastíněné možnosti zhodnotit a diskutovat s ohledem na dostupné literární zdroje. Klíčová slova: mykorhiza, orchideje, parazitismus,...
|
|
|
Genové manipulace trehalosového metabolismu a zvyšování odolnosti rostlin k abiotickým stresům
Hamet, Jaromír ; Lipavská, Helena (vedoucí práce) ; Hála, Michal (oponent)
Genetické modifikace zemědělských plodin jsou v dnešní době již běžně využívány v boji proti škůdcům a plevelům. Čím dál tím častěji se také objevují snahy využít genetické modifikace i ke zvýšení odolnosti k abiotickým stresům, které celosvětově ovlivňují výnosy mnohem více než stresy biotické. Jednou z intenzivně studovaných možností jak zvýšení stresové tolerance dosáhnout, je manipulace s trehalosovým metabolismem. Tato práce shrnuje dosavadní poznatky o ochranných účincích trehalosy v buňkách a zabývá se přirozenou signální funkcí trehalosy a meziproduktu její syntézy trehalosa-6-fosfátu u rostlin. Dále popisuje již dosažené úspěchy při zvyšování odolnosti rostlin k abiotickým stresům pomocí genetických zásahů do trehalosového metabolismu, ale i doprovodné problémy. V závěru je pak zhodnocen potenciál využití této metody do budoucna.
|
|
|
Návrh zkušebního zařízení/metody pro rychlé ověření kvality svarového spoje
Zejda, Václav ; Hála, Michal (oponent) ; Kubíček, Jaroslav (vedoucí práce)
Tato bakalářská práce se zabývá návrhem a výběrem vhodné metody pro rychlé ověření svarového spoje kulového čepu stabilizátoru osobních automobilů vytvořeného metodou odporového svařování. První, teoretická, část je věnována odporovému svařovaní. Druhá část se zabývá popsáním výroby a zkoušení konkrétní součásti. Poslední část obsahuje vlastní návrhy a posouzení vhodnosti použití jednotlivých konstrukčních řešení jednoduchých mechanických zařízení pro ověření kvality svarového spoje. Doporučeno je využít metodu Charpyho kladiva, na jejímž základě bylo navrženo speciální testovací zařízení.
|
|
|
Optimalizace výroby součástky z konstrukční oceli tl. 20 mm technologií laserového dělení
Šoukal, Hynek ; Hála, Michal (oponent) ; Mrňa, Libor (vedoucí práce)
Práce se zabývá optimalizací procesních parametrů při oxidačním laserovém dělení konstrukční oceli tloušťky 20 mm s ohledem na typ materiálu, výslednou drsnost řezu a výslednou cenu výrobku. V souladu s literární studií a také podle Taguchiho metody byl vypracován experiment. V rámci experimentu byla regulována řezná rychlost, výkon laseru, tlak řezného plynu a poloha ohniska. Sady vzorků byly vyřezány pomocí 7,5“ a 10“ fokusační čočky z ocelí TATA STEEL S355MC a SSAB LASER 355 MC. Dle normy ČSN EN ISO 9013 došlo k vyhodnocení vzorků z hlediska drsnosti. Poté byly vyhodnoceny mikro a makro struktury a porovnány tvrdosti dle Vickerse. Závěrem bylo stanoveno technicko – ekonomické vyhodnocení.
|
|
|
Proteomická a funkční charakterizace izoforem PsbO
Duchoslav, Miloš ; Fischer, Lukáš (vedoucí práce) ; Hála, Michal (oponent)
PsbO (mangan-stabilizující protein) je jedním z vnějších proteinů fotosystému II vázaných z luminální strany. Nachází se ve všech oxyfototrofních organismech a zajišťuje správnou funkci Mn4CaO5 klastru, kde probíhá fotosyntetický rozklad vody. Tato práce je zaměřena především na PsbO vyšších rostlin a jeho izoformy - jejich evoluci a funkce. Bioinformatickými analýzami jsme zjistili, že většina vyšších rostlin exprimuje právě dvě izoformy psbO. Fylogenetický strom vytvořený ze sekvencí PsbO má neobvyklou topologii. Na jednotlivé vzájemně paralogní izoformy se neštěpí u báze, jak by se dalo očekávat, ale spíše až na koncích jednotlivých větví, na úrovni čeledí či ještě nižších taxonomických jednotek. V práci jsme navrhli a diskutovali několik hypotéz evoluce izoforem PsbO. Součástí práce byla detailní identifikace spotů na gelech z 2D IEF-SDS PAGE tylakoidů bramboru, ve kterých se vyskytuje PsbO. Ve většině spotů jsme identifikovali konkrétní variantu izoformy. Nepodařilo se nám nalézt žádné posttranslační modifikace PsbO. Optimalizovali jsme metodu exprese psbO špenátu v E. coli a následné purifikace, která umožňuje získat velké množství správně sbaleného rekombinantního proteinu. Pomocí CD spektrometrie jsme zjistili, že při změnách pH typických pro lumen tylakoidů při změně osvětlení se mírně mění...
|
|
| |
|
|
Vliv polohy hořáku při navařování rotačních součástí
Rychlý, Rostislav ; Hála, Michal (oponent) ; Kubíček, Jaroslav (vedoucí práce)
Tato bakalářská práce se zabývá vlivem polohy hořáku při navařování rotačních součástí. V teoretické části práce je popsána metoda svařování tavící se elektrodou v ochraně aktivního plynu. V experimentální části jsou vyhodnoceny vyhotovené návary v různých polohách hořáku a optimalizovány parametry svařování pro dosažení plochého návarového kovu bez výrazného promísení se základním materiálem.
|
|
|
Porovnání drsnosti řezných hran při dělení materiálu CO2 a YbYAG laserem
Podaný, Petr ; Hála, Michal (oponent) ; Mrňa, Libor (vedoucí práce)
Bakalářská práce se zabývá porovnáním drsnosti řezných hran při dělení plynnovým CO2 laserem a pevnolátkovým Yb:YAG laserem. Teoretická část podává základní informace o průmyslových laserech a metodách, které se používají pro dělení materiálu. Je zde zahrnuta část popisující problematiku nastavení optimálních řezných parametrů spolu se všeobecnými pojmy o měření drsnosti. V experimentální části proběhlo měření 20 vzorků. Vzorky byly vyrobeny z konstrukčních ocelí DC 01 a S235JR+N, nerezové oceli X5CrNi18-10+2B a z hliníkové slitiny AlMg3. Dále práce popisuje uvedené materiály a laserové zařízení použité pro zhotovení vzorků. Vzorky jsou vyhodnoceny a zařazeny do tříd přesnosti dle normy ČSN EN ISO 9013.
|
|
|
Studium vlivu procesních parametrů na drsnost řezu při oxidačním režimu laserového dělení konstrukční uhlíkové oceli
Macháč, Patrik ; Hála, Michal (oponent) ; Mrňa, Libor (vedoucí práce)
Zpracování bakalářské práce pojednává o dělení materiálu pomocí laseru v oxidačním prostředí. Tato bakalářská práce je rozdělena do dvou částí, a to na teoretickou a praktickou. V teoretické části jsou popsány obecné metody řezání materiálu, jejich výhody, nevýhody, dále jsou popsány nynější průmyslové lasery, dále vliv parametrů na kvalitu řezu. V experimentální části je zpracován vliv procesních parametrů na kvalitu řezu a porovnání s normou ISO 9013. Použitý materiál v praktické části je konstrukční uhlíková ocel s označením S235 JRG 2 (11375), který byl řezán v oxidačním prostředí. Na základě vyhodnocení drsnosti povrchu řezné plochy byla za předpokladu zvolena cena řezání laseru jednoho metru a následně byla také zvolena nejvhodnější varianta nastavení procesních parametrů při dosažení kvalitní jakosti povrchu. V závěru práce jsou porovnány změny procesních parametrů a jejich zhodnocení.
|
host ::
RSS.