|
| |
|
|
Stanovení vybraných fenolických látek v ovoci
Pechová, Martina ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Martina Pechová Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení vybraných fenolických látek v ovoci Tato diplomová práce se zabývá vývojem a optimalizací HPLC metody pro stanovení vybraných fenolických látek - kyselina gallová, kyselina chlorogenová, kyselina kávová, katechin, epikatechin, rutin, kvercetin, kvercitrin, floretin a floridzin. V této práci jsou zahrnuty informace o obecné charakteristice fenolických látek a o jejich struktuře. Dále je stručně popsána metoda HPLC a je zmíněna krátká rešerše odborných publikací týkajících se uvedeného tématu. V rámci optimalizace bylo testováno několik typů gradientů mobilní fáze, stacionárních fází (chromatografických kolon typu C18, fenyl-hexyl, bifenyl, amino, kyano a monolitická kolona), další podmínky separace (teplota, extrakce) a byla provedena částečná validace metody. K analýze vybraných látek byla použita předkolona Ascentis Express C18 (5 x 4,6 mm x 5 µm) a kolona Kinetex C18 (150 x 4,6 mm x 5 µm). Detekce byla provedena pomocí DAD spektrofotometrického detektoru při vlnových délkách 255, 280, 320 a 365 nm, teplotě kolonového prostoru 30 řC s využitím gradientové eluce s mobilní fází acetonitril a voda s úpravou pH...
|
|
|
Analysis of atorvastatine by HPLC with using of fluorescence derivatization
Líška, Marián ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
10 Abstrakty 10.1 Analýza atorvastatinu metódou kvapalinovej chromatografie s využitím fluorescenčnej derivatizacie Hlavným cieľom tejto práce bolo vyvinúť metódu stanovenia atorvastatinu pomocou HPLC, ktorá by bola dostatočne citlivá na stanovenie plazmatických hladín, teda koncentrácii v jednotkách ng/ml. UV-VIS detekcia nie je dostatočne citlivá na tento účel, preto bola použitá fluorescenčná detekcia. Atorvastatin bol derivatizovaný pomocou 4-bromometyl-6,7-dimetoxykumarínu v prostredí N,N-dimethylformamidu, ako katalyzátory boli použité uhličitan draselný a 18-crown-6- ether. Bola prevedená optimalizácia reakčných podmienok, pričom sa zistilo, že optimálne podmienky sú inkubácia v tme po dobu 45 minút pri teplote 20řC. Metódu vyčistenia vzorky od nežiaducich látok sa však optimalizovať nepodarilo. Technika prepínania kolón nebola s použitými kolónami dostatočne účinná, takže výsledné chromatogramy boli aj napriek maximálnej optimalizácii chromatografických podmienok stále značne znečistené interferujúcimi látkami, a teda požadovaná úroveň citlivosti nebola dosiahnutá.
|
|
|
Vyšetření tělních tekutin na automatickém analyzátoru XT-4000i
Tycová, Blanka ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Sadílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Blanka Tycová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název rigorózní práce: Vyšetření tělních tekutin na automatickém analyzátoru XT - 4000i Tato rigorózní práce je zaměřena na cytologické vyšetření tělních tekutin, které jsou analyzovány v hematologické laboratoři OKH v Pardubické krajské nemocnici, a.s. Jedná se o mozkomíšní mok, pleurální, perikardiální a abdominální tekutinu, peritoneální dialyzát a synoviální tekutinu. Z naměřených dat během analýzy tělních tekutin bylo cílem zaměřit se na kontrolu kvality a zjistit preciznost, pravdivost, linearitu měření, a jaká je stabilita peritoneálního dialyzátu při laboratorní (21,7 řC) a chladničkové teplotě (6,9 řC). Statistickým hodnocením naměřených dat bylo prokázáno, že analyzátor poskytuje validní hodnoty. Grafickým zpracováním bylo prokázáno, že měření opravdu probíhalo lineárně. Zároveň bylo prokázáno, že větší stabilitu vykazuje vzorek peritoneálního dialyzátu, který byl skladován při chladničkové teplotě (6,9 řC). Korelace výsledků analýzy tělních tekutin zjištěných automatickým analyzátorem XT - 4000i a mikroskopickou metodou za použití Fuchs-Rosenthalovy počítací komůrky byla posledním cílem této práce. Statistickým hodnocením...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení vitaminu E acetátu v přípravcích Geladrink
Kovářová, Lenka ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Pospíšilová, Marie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lenka Kovářová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, PhD. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení vitaminu E acetátu v přípravcích Geladrink Byla vyvinuta HPLC metoda pro separaci a stanovení látky vitaminu E-acetátu v přípravku Geladrink Forte. Metoda je založena na využití kolony Chromolith Performance RP-18e (100 x 4,6 mm) a UV detekce při 290 nm. Vitamin E-acetát byl separován v přítomnosti cholekalciferolu jako vnitřního standardu od matrice přípravku. Sloučeniny byly separovány s využitím izokratické eluce mobilní fází methanol - voda (98: 2) průtokem 2,0 ml/min. Měření probíhalo při 30 řC. Systém umožnil úspěšnou separaci obou složek v čase pod 4 min. Retenční čas cholekalciferolu byl 2,26 min a vitaminu E-acetátu 3,22 min. Rozlišení chromatografických píků cholekalciferolu a vitaminu E-acetátu bylo 5,248. Vyvinutá metoda byla také využita pro analýzu vitaminu E-acetátu v přípravku Pro-Visio. Stanovené koncentrace vitaminu E-acetátu byly přepočítány na obsah vitaminu E, který deklaruje výrobce. Klíčová slova: vitamin E-acetát, HPLC, Geladrink, Pro-Visio.
|
|
|
Studium vlivu chinonů a Quantum Dots částic na průběh chemiluminiscenčních reakcí
Kořínková, Martina ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Martina Kořínková Školitel: PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium vlivu chinonů a Quantum Dots částic na průběh chemiluminiscenčních reakcí Záměrem této diplomové práce bylo pozorovat a vyhodnotit vliv 9,10- fenantrenchinonu, dithiothreitolu a Quantum Dots (QD) částic na chemiluminiscenční (CL) systém, který obsahoval roztok peroxidu vodíku, luminolu a hexakyanoželezitanu draselného. Všechny analýzy byly provedeny pomocí průtokové metody sekvenční injekční analýzy (SIA). Chemiluminiscenční záření luminolu bylo založeno na jeho oxidaci peroxidem vodíku za katalýzy FeIII (CN)6. Existuje také ještě jiný CL systém, který se podařilo vyvinout japonským vědcům s využitím chinonu, luminolu a dithiothreitolu. Zájmem této práce bylo tedy reprodukovat výsledky, kterých dosáhli autoři japonské studie, avšak s použitím metody SIA nebyly shledány srovnatelné výsledky měření. Fenantrenchinon ovlivňoval CL signál ve smyslu zkrácení délky dosvitu a tím lze také vysvětlit rozdíly v hodnotách plochy pod píkem u jednotlivých měření. Roztok dithiothreitolu ovlivnil CL signál tak, že jen mírně zkracoval délku dosvitu. U roztoků s Quantum Dots částicemi bylo pozorováno, že čím méně je roztok QD...
|
|
|
Stanovení bopindololu technikou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí
Holá, Petra ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Při oxidaci léčiva bopindolol [4-(2-benzoyloxy3-tert-butylaminopropyl)-2-methylindol (I)] manganistanem v prostředí vodné H2SO4 je emitováno chemiluminiscenční (CL) záření. CL signál je zesilován hexametafosfátem. Tato CL reakce byla využita k vypracování automatizovaného stanovení I ve farmaceutických přípravcích technikou sekvenční injekční analýzy (SIA). SIA sytém ovládaný osobním počítačem se skládal z 2,5-ml pístového čerpadla Cavro XL 3000, 10-cestného selekčního ventilu Vici-Valco a průtokového fluorescenčního detektoru Spectra-Physics FS970 doplněného CL detekčním modulem, který byl zhotoven v naší laboratoři. CL signál bopindololu korigovaný slepým pokusem se zvýšil 3-krát (ve srovnání s dávkováním čistě vodného roztoku I) pokud injektovaný vzorek obsahoval 60% (v/v) methanolu. Optimální pořadí, koncentrace a objemy aspirovaných zón reaktantů byly: 80mM Na hexametafosfát ( 61l), I v 60% (v/v) methanolu (60 l), 30mM H2SO4 (40 l) a 0,5mM KMnO4 (9 l). Kalibrační křivka vyjadřující závislost intensity CL (výška píku) na koncentraci bopindololu byla lineární v rozsahu 1 - 8 M I; limit detekce (S/N = 3) byl 0,2 M I. Frekvence dávkování vzorků byla 100 h-1 . Opakovatelnost výšek píků byla charakterizována hodnotou RSD 1,8% pro 15 nástřiků 8 M I. Navržená SIA-CL metoda byla použita ke...
|
|
| |
|
|
SIA stanovení dusitanů, dusičnanů a chloridů podle platných ISO norem
Dundová, Aneta ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá tématem stanovení dusitanů, dusičnanů a chloridů metodou SIA upravenou podle platných ISO norem. Česká technická norma ČSN EN ISO 11 732 udává metodu vhodnou ke stanovení amoniakálního dusíku metodou FIA a CFA ve vodách různých druhů. Podstata zkoušky spočívá v aspiraci vzorku obsahující amoniakální dusík do kontinuálního proudícího nosného roztoku, kde se mísí s tokem alkalického roztoku. Amoniak se oddělí v difúzním segmentoru přes polopropustnou membránu a přechází do proudícího toku roztoku, ve kterém je indikátor pH. V důsledku změny hodnoty pH se mění zbarvení indikátoru, které je zaznamenáváno průtokovým spektrofotometrem. Bylo provedeno převedení uvedeného FIA stanovení daných iontů do SIA systému při dodržení kalibračních rozsahů z uvedené normy. Princip stanovení dusitanů je odlišný, byla použita Griess diazo-kopulační reakce za vzniku azobarviva měřitelného při 540 nm v průtokové cele spektrofotometru. Kalibrační křivka dusitanů vykazovala linearitu v rozmezí c = 0,01 - 0,1 mg/l a c = 0,1 - 1,0 mg/l s korelačními koeficienty R2 = 0,9979 a R2 = 0,9962. Roztok dusičnanů byl aspirován do redukční kolony zhotovené z kadmia a mědi. Po redukci NO3 - na NO2 - byl vzorek aspirován do systému, kde se mísil s činidlem a nakonec procházel průtokovou celou detektoru....
|
|
|
Stanovení verapamilu metodou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí
Homolová, Zuzana ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Verapamil byl stanovován metodou sekvenční injekční analýzy (SIA) s chemiluminiscenční detekcí (CL). Chemiluminiscence byla emitována během oxidace vzorku manganistanem draselným v roztoku kyseliny sírové za přítomnosti zesilovače CL polyfosfátu sodného (PFS). Optimalizovány byly koncentrace, pořadí, objem činidel a průtoková rychlost. Rovněž byl vyzkoušen vliv rozpouštědel 60% methanolu a 60% ethanolu. Optimální pořadí, objemy a koncentrace činidel pro vodný roztok verapamilu byly: 30 μl 10 mM KMnO4, 50 μl 2% PFS, 50 μl 1 mM verapamilu, 30 μl 1 M H2SO4 a pro 60% ethanolický roztok: 20 μl 10 mM KMnO4, 30 μl 2% PFS, 50 μl 1 mM verapamilu, 30 μl 2 M H2SO4, 30 μl 2% PFS a průtoková rychlost 30 μl/s. Přechodný CL signál byl zaznamenáván při vlnové délce 390 nm. Kalibrační křivky závislosti intenzity CL (výška píku) na koncentraci vzorku byly nelineární, lineární části se pohybovaly v rozmezí 510-5 - 510-3 M pro vodný roztok verapamilu a 110-5 - 110-3 M pro 60% ethanolický roztok. Detekční limity byly 210-5 M pro vodný roztok a 110-5 M pro 60% ethanolický roztok verapamilu. Opakovatelnost (RSD, n = 10) se pohybovala mezi 4,43 % (110-4 M) a 1,83 % (110-3 M) pro vodný roztok a 2,11 % (110-4 M) a 4,90 % (110-3 M) pro 60% ethanolický roztok. Verapamil byl stanovován v HVLP (tablety s obsahem...
|
host ::
RSS.