|
|
Ames test in the drug development
Klaučová, Martina ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Martina Klaučová Školiteľ: prof. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Ivona Pávková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Použitie Amesovho testu v štúdiu genotoxicity novo vyvíjaných látok Cieľ práce: Cieľom práce je stanovenie potenciálnej genotoxicity novo vyvíjaných látok v rámci základného testovania a zavedenie Amesovho mikroflukuačného testu do bežných laboratórnych podmienok. Metódy: V práci som použila komerčný kit založený na princípe Amesovho testu, ktorý farebnou zmenou avizuje reverznú mutáciu testovaného bakteriálneho kmeňa S. typhimurium. Naštudovala som si dostupnú literatúru a navrhla najvhodnejšie prevedenie mikrofluktuačného testu, prípravu chemikálií, uchovávanie kmeňov a následne test zaviedla do bežnej laboratórnej praxe. Výsledky: Z látok dodaných k otestovaniu pôsobia genotoxicky T6445 a T6447 v koncentrácii 30 µM testované s metabolickou aktiváciou S9 na kmeni ST TA 98. Látka UOCHB1 v koncentrácii 30 µM testovaná bez metabolickej aktivácie S9 vykazuje hraničnú pozitívnu reakciu na kmeňoch ST TA 98 aj ST TA 100. Ostatné vzorky toxicitu neprejavujú. V rámci zavádzania testu boli vyskúšané 3 rôzne postupy, z ktorých najvhodnejším sa zdá byť test za využitia farebného...
|
|
|
Vyhodnocení aktivity potenciálně antibiotických látek pomocí mikrodiluční bujónové metody II
Kopečná, Klára ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Jílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Klára Kopečná Školitel: Mgr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Vyhodnocení aktivity potenciálně antibiotických látek pomocí mikrodiluční bujónové metody II Cíl práce: Vyhodnotit antibakteriální aktivitu látek syntetizovaných na Katedře farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Farmaceutické fakulty v Hradci Králové, Univerzity Karlovy v Praze, pod vedením prof. PharmDr. Martina Doležala, Ph.D. Metody: Pomocí mikrodiluční bujónové metody byla testována antibakteriální aktivita na osmi bakteriálních kmenech, konkrétně na Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus methicilin rezistentní, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus sp., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella pneumoniae ESBL pozitivní a Pseudomonas aeruginosa. Výsledky: Testované látky byly rozděleny do 5 skupin podle podobnosti v chemické struktuře. Nejlepší antibakteriální účinnost byla zaznamenána ve skupině derivátů N-benzyl-6- (alkylamino)pyrazin-2-karboxamidu. Závěr: Antibakteriální aktivita byla prokázána u 10 z 24 testovaných látek. Z námi testovaných látek vykazovaly všechny, vyjma jedné, účinnost na grampozitivní bakterie. Mezi nejcitlivější testované kmeny k daným látkám...
|
|
|
Identification of DNA sequence binding C/EBP and C/EBPb proteins involved in RANKL expression
Dušek, Lukáš ; Křivčíková, Lucie (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Karlova Univerzita v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Autor: Lukáš Dušek Supervisor: Ing. Lucie Křivčíková, Asist. Vid Mlakar, B. Sc. microbial., Ph.D. Název práce: Identifikace DNA sekvence vázané C/EBP a C/EBPb proteiny zapojené v expresi RANKL Osteoporóza, nebo také řídnutí kostí, je celosvětovým problémem v lidském zdraví, které neustále nabývá na významu. Johnell a Kanis ve své studii odhadli, že v roce 2000 došlo k více jak 9 miliónům osteoporotických zlomenin, což ve výsledku znamená 3 zlomeniny způsobené osteoporózou každou vteřinu [1]. Vzhledem k provázanosti kostní hustoty (BMD) s věkem a stárnutí světové populace je možné očekávat nárůst významu tématu kostního zdraví a osteoporózy zvláště. Objev osy osteoprotegerin (OPG) / receptor activator of nuclear factor kappa-B (RANK) / RANK-ligand (RANKL) v pozdních 90. letech vložil vědcům do rukou významný cíl budoucího zkoumání kostního metabolismu a odhalil zajímavá propojení s kardiovaskulárními chorobami, imunitním systémem, přežívání rakovinových buněk a kostnímu cílení metastáz. Tato práce v sobě nesla jeden experimentální a dva teoretické cíle. Experimentálním a také primárním cílem bylo identifikovat transkripční faktory a vazebná místa v oblasti -662 až -438 od promotorové oblasti genu...
|
|
| |
|
|
Určení mechanismu vstupu F. tularensis do B lymfocytů
Hadámková, Barbora ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Janďourek, Ondřej (oponent)
Barbora Hadámková Určení mechanismu vstupu F. tularensis do B lymfocytů Diplomová práce Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní obor: Farmacie Cíl práce: Vedle zpracování rešerše se základními poznatky z problematiky, bylo hlavním cílem této práce analyzovat mechanismus vstupu intracelulární bakterie Francisella tularensis do B buněk. Metody: Na B buňkách získaných peritoneálním výplachem z myší Balb/c jsme blokovali vybrané komplementové receptory, receptor B buněk a Fcƴ receptor. B buněčnou populaci jsme infikovali bakterií F. tularensis LVS/GFP opsonizovanou komplementem a/nebo protilátkami. Pomocí průtokového cytometru jsme měřili procento infikovaných B buněk a jejich subpopulací, konkrétně B1a, B1b a B2, a hodnotili jsme vliv blokace a opsonizace na procentuální zastoupení infikovaných B buněk. Výsledky: Z naměřených dat můžeme říci, že se procento infikovaných B buněk po infekci F. tularensis opsonizovanou komplementem zvýší. Toto zvýšení bylo výraznější u subtypů B buněk B1b a B2. Naopak opsonizace F. tularensis protilátkami infekci nijak neovlivnila. Zjistili jsme také, že blokace receptoru Fcƴ snížila infekci, když byla k infekci B buněk použita bakterie s opsonizací komplementem a protilátkami zároveň. Při blokaci komplementových receptorů jsme významné...
|
|
|
Susceptibility profile of biofilms of non-albicans Candida spp. to echinocandins
Pešková, Pavla ; Křivčíková, Lucie (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta Univerzity Karlovy v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidátka: Pavla Pešková Školitelka: Ing. Lucie Křivčíková Diplomová práce: Citlivost biofilmů non-albicans Candida spp. k vybraným echinokandinům Kvasinky rodu Candida jsou jedny z nejčastějších lidských houbových patogenů. Jimi zapříčiněné infekce jsou spojené s výskytem specifické formy růstu zvané biofilm (BF), která vykazuje zvýšenou rezistenci vůči antimykotické léčbě. Jelikož systémové infekce způsobené non-albicans Candida druhy se v posledních letech vyskytují stále častěji, je potřeba se zaměřit na zkoumání jejich citlivosti k různým antimykotikům. Hlavním cílem naší práce bylo zjistit citlivost biofilmů (BF) non-albicans Candida druhů k vybraným echinokandinům. Testovali jsme 3 druhy z rodu Candida - C. lusitaniae, C. guilliermondii a C. krusei a 3 echinokandiny - anidulafungin (AND), caspofungin (CAS) and micafungin (MFG). Echinokandiny mají jedinečný funkční mechanismus. Inhibují funkci enzymu β-1,3-glukan syntetázy. Poškození jeho funkce vede ke ztrátě produkce β-1,3-glukanu, narušení buněčné stěny a ztráty životaschopnosti houbové buňky. V experimentální části jsme jako růstové médium pro BF a planktonické buňky (PL) z rodu Candida použili YNB a RPMI 1640. PL i...
|
|
|
Mykotoxiny a lidské zdraví
Roudná, Iva ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Jílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Roudná Iva Školitel: Mgr. Konečná Klára, Ph.D. Konzultant: RNDr. Klaban Vladimír Název bakalářské práce: Mykotoxiny a lidské zdraví Předkládaná bakalářská práce se zabývá nejen obecně, ale současně i konkrétně všemi aspekty biosyntézy mykotoxinů a jejich negativním působením nejen na člověka, ale i na domácí a hospodářská zvířata z hlediska živočišné výroby. Nejdříve jsou mykotoxiny obecně definovány a představeny jako kontaminující substance v životním prostředí člověka a rovněž je zmíněno i případné zneužití mykotoxinů při bioteroristických akcích. Potom následuje obecné pojednání o mikromycetech a jejich významu nejen jako producentů nebezpečných mykotoxinů, ale je popsáno i pozitivní využití mikromycetů v potravinářství, v moderních biotechnologiích, v biologické ochraně rostlin, ale i při čištění odpadních vod. Velká pozornost je rovněž věnována patogennímu působení mikromycetů, neboť mohou způsobovat různá mykotická a alergická onemocnění. Následuje kapitola o producentech (zdrojích) mykotoxinů. Práce se zabývá zejména třemi nejdůležitějšími rody plísní tvořících mykotoxiny: rody Aspergillus, Fusarium a Penicillium. Důležité druhy v rámci těchto rodů jsou popsány nejen z hlediska...
|
|
|
Studium exprese SWC7 molekul na prasečích B lymfocytech
Fikrová, Petra ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
2. SOUHRN Cílem této diplomové práce je objasnit profil exprese molekuly SWC7 na B buňkách a případně její úlohu ve vyzrávání B lymfocytů. Zrání prasečích B lymfocytů v periferii lze v současné době definovat na základě exprese povrchových molekul CD2 a CD21. Jako experimentální metoda sloužící pro zjištění fenotypu B lymfocytů nesoucích na svém povrchu molekulu SWC7 byla používána průtoková cytometrie. Měření schopnosti produkce protilátek bylo provedeno metodou ELISA. Při základní fenotypizaci bylo zjištěno, že molekula SWC7 se vyskytuje pouze na povrchu IgM+ a CD21+ B buněk, které mohou, ale nemusí, na svém povrchu nést molekulu CD2. Na základě tohoto zjištění byly na sortovacím průtokovém cytometru získány čisté subpopulace IgM+ CD21+ B buněk lišící se v expresi molekul SWC7 a CD2. Čisté subpopulace byly následně kultivovány a analyzovány pro zjištění změny fenotypu. Média ze sortovaných buněk byla odebírána a analyzována metodou ELISA na přítomnost prasečích protilátek IgM, IgG a IgA. Získané výsledky naznačují, že expresi molekul SWC7 na povrchu B buněk lze považovat za znak zrání, protože ztráta této molekuly z povrchu buněk je nevratná a protože pouze SWC7- B buňky jsou schopné produkovat protilátky typu IgM a IgG. Proces zrání prasečích B lymfocytů probíhá pravděpodobně tak, že nejprve dojde u CD2+...
|
|
|
Alergie, jejich komplikace a léky v této souvislosti začátkem 21.století
Březinová, Lenka ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Lenka Březinová Školitel: PharmDr. Petr Jílek, CSc. Název bakalářské práce: Alergie, jejich komplikace a léky v této souvislosti začátkem 21. století Alergie je jedním z hlavních zdravotních problémů většiny moderních společností. I když je známá po staletí, byl v posledních desetiletích zaznamenán dramatický nárůst výskytu tohoto onemocnění. Důležitým pokrokem v alergologii byl objev imunoglobulinu E jako nosiče přímého typu hypersensitivity. Alergické reakce dělíme do šesti základních skupin s tím, že se vzájemně v organismu prolínají. Klinické příznaky předurčují tzv. Mediátory, které pocházejí různých buněk. Mezi nejznámější patří histamin, dále jsou to např. Leukotrieny, eikosanoidy a další. Alergické nemoci mohou komplikovat alergická konjunktivitida, chronická sinusitida, nosní polypy, záněty středouší, atopický ekzém, astma a nejzávažnější a život ohrožující anafylaktický šok. Mezi základní léky k tlumení příznaků alergie patří antihistaminika, které se dělí do I. a II. generace. Další možností léčby je imunoterapie, která má jako jediná potenciál, aby se zabránil nebo změnil průběh alergického onemocnění. Tato léčba je však velice nákladná. Alergie je celosvětová epidemie s...
|
|
|
Současné postupy v diagnostice, léčbě a prevenci infekce vyvolané methicilin rezistentními kmeny bakterie Staphylococcus aureus (MRSA)
Korejsová, Erika ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Vejsová, Marcela (oponent)
Autor: Erika Korejsová Vedoucí práce: Mgr. Klára Konečná, Ph.D. Konzultant: MUDr. Marie Smolíková Název: Současné postupy v diagnostice, léčbě a prevenci infekce vyvolané methicilin rezistentními kmeny bakterie Staphylococcus aureus (MRSA) Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Biologických a lékařských věd Studijní obor: Zdravotnická bioanalytika Staphylococcus aureus je bakterie, která se nachází na nosní sliznici zdravých lidí (20-40%) a na kůži, aniž by způsobovala onemocnění. Za určitých okolností, například při poškození či poranění kůže, sliznic a při snížené obranyschopnosti jedince, může vzniknout infekce. Proto jsou hospitalizovaní pacienti k této infekci mnohem vnímavější. Největší nebezpečí představují kmeny MRSA (methicilin-rezistentní Staphylococcus aureus). Jedná se většinou o multirezistentní kmeny Staphylococcus aureus, kde se kromě rezistence k oxacilinu (methicilinu) vyskytuje i rezistence k dalším antibiotikům. Léčba těchto pacientů je problematická, protože MRSA jsou kmeny značně odolné a přetrvávají v organizmu a v prostředí. Jejich eradikace není jednoduchá. Často při snížené hladině antibiotik v krvi pacienta dochází k reinfekci. To znamená značné finanční náklady pro zdravotnická zařízení, zvláště nemocnice. Proto se zde...
|
host ::
RSS.