|
|
Studium bakteriální mikroflóry u pacientek se spontánním předčasným porodem
Pasdiorová, Markéta ; Hronek, Miloslav (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
1. ABSTRAKT Bc. Markéta Pasdiorová Studium bakteriální mikroflóry u pacientek se spontánním předčasným porodem Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Zdravotnická bioanalytika - Odborný pracovník v laboratorních metodách Cíl práce: Předčasný porod a předčasný odtok plodové vody jsou spojovány s infekcemi genitálního traktu matky nebo s pozměněnou vaginální mikroflórou během těhotenství. V práci jsou rešeršně zpracovány poznatky o vaginálním mikrobiomu, předčasném porodu a možnostech analyzování vaginálního mikrobiomu sekvenováním nové generace. Cílem práce bylo vyhodnotit složení bakteriální mikroflóry u pacientek se spontánním předčasným porodem a navzájem porovnat vaginální a cervikální vzorky. Metody: Studovaná skupina se skládala ze 7 pacientek s diagnostikovaným spontánním předčasným porodem. Vzorky byly získány na základě spolupráce s Porodnickou a gynekologickou klinikou Fakultní nemocnice Hradec Králové. Hodnocení vaginálního mikrobiomu bylo provedeno metodou pyrosekvenování s použitím přístroje Genome Sequencer FLX+. Výsledky: Ve studii byly zachyceny všechny základní typické bakteriální vzorce. Nejvíce zastoupeny byly bakteriální druhy Lactobacillus crispatus/casei a L. iners, které se řadí mezi nejčastěji dominující laktobacily vyskytující se v pochvě...
|
|
|
BRAF mutace u metastazujícího maligního melanomu.
Hrabcová, Veronika ; Hronek, Miloslav (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
Bc. Veronika Hrabcová BRAF mutace u metastazujícího maligního melanomu Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Zdravotnická bioanalytika - Odborný pracovník v laboratorních metodách Cíl práce: Melanom je maligní onemocnění s rostoucí incidencí a v pokročilém stádiu onemocnění s velmi omezenou možností léčby. S pokrokem znalostí v genetice a o tumorigenezi byl u 50 % melanomů pozorován výskyt mutovaného BRAF proteinu. V 80-90 % se jednalo o BRAF V600E mutaci. Cílem práce bylo zavést vhodnou molekulárně biologickou metodu pro diagnostiku mutací v kodonu V600 genu BRAF. Metody: K testování DNA byly použity testy Cobas 4800 BRAF V600 a BRAF StripAssay. Cobas 4800 BRAF V600 test je založen na PCR reakci s použitím TaqMan sond navrženým k wild-type a BRAF V600E mutované sekvenci. BRAF StripAssay test vychází z PCR amplifikace s biotinylovanými primery a následné hybridizaci ke stripům s alelicky-specifickými oligonukleotidovými próbami. Vzorky vyšetřené DNA pocházely od 35 pacientů s pokročilým maligním melanomem z archivu Fingerlandova ústavu patologie Fakultní nemocnice Hradec Králové. Výsledky: Mutace BRAF V600 byla zachycena v přibližně polovině nádorů, což odpovídá výsledkům jiných studií. Ve srovnání metod vyšel lépe test Cobas. Část vzorků byla dle Cobas...
|
|
|
Porovnání diferenciálního počtu leukocytů stanoveného na analyzátoru Beckman Coulter LH 750 a mikroskopicky u skupiny dětských hematoonkologických pacientů
Šturmová, Michaela ; Fátorová, Ilona (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
Ve své práci jsem se zabývala porovnáním diferenciálního počtu leukocytů (DIF) stanoveného na analyzátoru a mikroskopicky u skupiny dětských onkologických a hematoonkologických pacientů. Práci jsem rozdělila na část teoretickou a část praktickou. Teoretická část zahrnuje vysvětlení procesu krvetvorby, vývoj krevních buněk a charakteristiku jednotlivých vývojových řad, dále popis hematoonkologických a onkologických onemocnění, která se nejčastěji vyskytují u sledované skupiny dětských pacientů, a jejich léčbu. V praktické části je popsáno stanovení DIF na analyzátoru Beckman Coulter LH 750 a pomocí mikroskopu Meopta. U vybraného souboru dětských pacientů jsem změřila krevní obraz s diferenciálním počtem leukocytů na analyzátoru, zhotovila nátěr a zhodnotila jej mikroskopicky. Výsledky jsem uvedla do tabulek, provedla jejich statistické zpracování pomocí párového t-testu v programu GraphPad Prism a znázornila pomocí grafů. Cílem práce bylo blíže prozkoumat a zhodnotit rozdíly mezi těmito dvěma metodami. U 19,32 % pacientů z testovaného souboru analyzátor DIF nevyhodnotil. Jednalo se o pacienty s čerstvým záchytem akutní leukémie, o pacienty, kterým byly podány růstové faktory, nebo o pacienty po cytostatické léčbě. Pokud i v takovýchto případech analyzátor diferenciál vyhodnotí, může dojít k...
|
|
|
Detekce exprese antigenu CD56 u pacientů s morfologickým nálezem LGL v periferní krvi.
Procházková, Irena ; Fátorová, Ilona (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
Autor: Bc. Irena Procházková Název: Detekce exprese antigenu CD56 u pacientů s morfologickým nálezem LGL v periferní krvi Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Odborný pracovník v laboratorních metodách Abstrakt Cílem této práce bylo získat údaje pro podpoření hypotézy, že LGL , tedy morfologicky velké granulované lymfocyty, jsou totožné s populací NK buněk, které se prokazují detekcí antigenu CD56. Počty CD56+ buněk byly získány stanovením jejich exprese průtokovou cytometrií po značení protilátkou proti CD56 a byla posouzena jejich korelace s počtem LGL buněk, nalezených při mikroskopickém hodnocení v periferní krvi pacienta po běžném panoptickém barvení krevního nátěru. Pro porovnání byly použity absolutní počty zjišťovaných parametrů. K výpočtům absolutních hodnot LGL buněk byly použity leukocyty ze změřeného krevního obrazu pacientů v analyzátoru Advia 2120i. U skupiny pacientů s imunodeficiencemi a různými formami alergií, u kterých jsme stanovili zvýšené počty CD56+/CD3- buněk (NK buněk), jsme provedli korelaci s počty LGL buněk stanovených mikroskopicky. Zjistili jsme silnou korelaci obou metod u celého souboru pacientů (R = 0,745), ale i u skupiny pacientů s imunodeficitními stavy (R = 0,862) a u...
|
|
|
Laboratorní diagnostika mnohočetného myelomu
Hubálková, Blanka ; Kovařík, Miroslav (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
SOUHRN Hlavním představitelem monoklonálních gamapatií je mnohočetný myelom. Mnohočetný myelom je zhoubné onemocnění způsobené maligní transformací B lymfocytů, jejich klonální proliferací a akumulací terminálních vývojových stádií plazmocytů. Diagnóza je stanovena na základě přítomnosti monoklonálního imunoglobulinu v séru nebo moči, průkazu infiltrace kostní dřeně myelomovými buňkami a osteolytického postižení. Z laboratorních metod, které nám pomáhají určit paraprotein, patří stanovení a identifikace monoklonálního imunoglobulinu pomocí elektroforézy a imunofixace, stanovení volných lehkých řetězců, cytologické vyšetření punktátu kostní dřeně. Průkaz osteolytického postižení je prováděn makroskopickými zobrazovacími technikami jako RTG. Možnosti léčby se v posledních letech výrazně zlepšily. Mezi léčebné programy zahrnující vysokodávkovou chemoterapii s autologní transplantací přibyly léky, kterými jsou thalidomid, lenalidomid a bortezomib. V praktické části práce jsme se zabývali srovnáním metod ELFO, IFE a VLŘ (Elektroforéza, imunofixace, volné lehké řetězce) z hlediska citlivosti záchytu paraproteinu. Ze závěrů sledování vyplynulo, že vyšetření sérových hladin VLŘ se jeví méně citlivou metodou než stanovení patologických hodnot indexu k/I. V našem Souboru pacientů byla kromě toho potvrzena vyšší...
|
|
| |
|
|
Morfologická a cytochemcká diagnostika vlasatobuněčné leukémie
Bergerová, Lenka ; Fátorová, Ilona (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
4 Název práce: Morfologická a cytochemická diagnostika vlasatobuněčné leukémie (bakalářská práce) Autor: Lenka Bergerová Katedra: Univerzita Karlova v Praze - Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, studijní obor Zdravotní laborant Vedoucí práce: MUDr. Dana Mikulenková Abstrakt Vlasatobuněčná leukémie je chronické lymfoproliferativní onemocnění klonálního charakteru vycházející ze zralých B-lymfocytů. V nátěru periferní krve a kostní dřeně nacházíme typické leukemické buňky, které jsou charakteristické velikostí, morfologií jádra a cytoplazmy. Jsou větší než zdravé lymfocyty, nejčastěji mají ledvinovité jádro s jemnějším síťovitým chromatinem a cytoplazmu vybíhající v jemné výběžky po celém obvodu buňky. V krevním obraze se zpravidla setkáváme s mírnou pancytopenií. Přítomnost patologických buněk prokazujeme v nátěru periferní krve a kostní dřeně panoptickým barvením dle Pappenheima. Mezi další vyšetření napomáhající k diagnostice tohoto onemocnění patří cytochemické vyšetření kyselé fosfatázy a kyselé fosfatázy rezistentní na tartarát, vyšetření povrchových znaků průtokovou cytometrií a histologické vyšetření kostí dřeně. Vedle klasické formy vlasatobuněčné leukémie rozlišujeme ještě variantní formu vlasatobuněčné leukémie, která se od klasické formy liší přítomností leukocytózy s lymfocytózou a morfologií...
|
|
|
Laboratorní diagnostiky anemií
Halamková, Renata ; Fátorová, Ilona (vedoucí práce) ; Vrbacký, Filip (oponent)
1 ABSTRAKT Bakalářská práce se zabývá velmi rozšířeným hematologickým onemocněním, anémií. Úvodní část definuje možné příčiny onemocnění a jeho klinický obraz. Následuje rozdělení jednotlivých typů anémií s popisem laboratorních nálezů. Některé charakteristiky anémií jsou obohacené o kazuistiky pacientů. Nejvíce jsou v populaci zastoupeny anémie sideropenické a megaloblastové, kterým jsem v práci věnovala největší pozornost. V závěru je prognóza onemocnění a úspěšnost léčby.
|
|
|
Hledání vhodných genů pro standardizaci kvantitativní PCR v reálném čase u pacientů s chronickou lymfocytární leukémií
Ryšková, Barbora ; Vrbacký, Filip (vedoucí práce) ; Sadílek, Petr (oponent)
4 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Barbora Ryšková Školitel: Mgr. Filip Vrbacký Název diplomové práce: Hledání vhodných genů pro standardizaci kvantitativní PCR v reálném čase u pacientů s chronickou lymfocytární leukémií Chronická B-lymfocytární leukémie (B-CLL) je nejčastěji se vyskytující leukémií u dospělých, a proto se intenzivně studuje. Doposud nebyla zjištěna vyvolávající příčina toto onemocnění a také nevíme jak toto lymfoproliferativní onemocnění úplně vyléčit s nízkým rizikem následných komplikací, které provázejí použitelnou transplantaci kostní dřeně. K oblastem, které nejsou dostatečně prozkoumány, patří exprese angiogenních faktorů na úrovni RNA. Proto jsme se rozhodli v laboratoři II. Interní kliniky - Oddělení klinické hematologie Fakultní nemocnice Hradec Králové věnovat právě této problematice. Mým úkolem bylo zavedení vhodné metody pro kvantifikaci odpovídajícího houskeeping genu použitého pro normalizaci výsledků kvantifikace vybraných angiogenních faktorů získaných pomocí PCR v reálném čase. Pro svou vhodnou míru exprese jsme zvolili gen Abl1. Tento gen je však alternativně sestřihován a pouze varianta obsahující 1.exon je skutečně použitelná jako housekeeping. Zaváděná metoda tudíž musela zohlednit tuto...
|
|
| |
host ::
RSS.