|
|
Abiotická elicitace explantátové kultury Trifolium pratense L.
Fiedlerová, Gabriela ; Kašparová, Marie (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Abiotická elicitace explantátové kultury Trifolium pratense L. Souhrn Cílem této diplomové práce bylo sledovat vliv abiotických elicitorů chloridu rtuťnatého a chloridu kademnatého na produkci flavonoidů, a u elicitoru chloridu rtuťnatého také isoflavonoidů, u explantátové kultury Trifolium pratense L. (varieta DO−8). Kultury byly kultivovány na živném médiu podle Gamborga s přídavkem 2,4−dichlorfenoxyoctové kyseliny (2 mg.l-1 ) a 6−benzylaminopurinu (2 mg.l-1 ) při teplotě 25 řC a světelné periodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Obsah flavonoidů byl stanoven spektrofotometricky dle Českého lékopisu 2005. Obsah isoflavonoidů byl stanoven metodou HPLC. Z výsledků je zřejmé, že u obou použitých abiotických elicitorů má nejvýznamnější pozitivní efekt na produkci flavonoidů explantátovou kulturou Trifolium pratense L. (varieta DO−8) koncentrace elicitoru 10 μmol. Nejvyšší obsah flavonoidů (0,576 %) byl zaznamenán při elicitaci chloridem kademnatým o koncentraci 10 μmol při době působení 48 hodin, kdy došlo ke statisticky významnému zvýšení obsahu flavonoidů o 294 % oproti kontrole. Metodou HPLC byl stanoven obsah isoflavonoidů při elicitaci explantátové kultury Trifolium pratense L. (varieta DO−8) chloridem rtuťnatým. Nejsilnější elicitační účinek měla koncentrace elicitoru 0,1 μmol při době působení 48 hodin....
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Alkaloids from Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master and their cholinesterase and prolyl oligopeptidase inhibitory activity.
Farkašovský, Marek ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Farkašovský Marek: Alkaloidy Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master a ich cholínesterázová a prolyloligopeptidázová inhibičná aktivita. Rigorózna práca 2017, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky a ekológie. Náplňou tejto práce bola izolácia obsahových látok z frakcie ND 3 - 5/2, získanej stĺpcovou chromatografiou alkaloidného extraktu z Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master. Príprava extraktu a následná stĺpcová chromatografia bola prevedená Mgr. Danielou Hulcovou v rámci jej doktorského štúdia. Pomocou preparatívnej TLC sa z tejto podfrakcie podarilo izolovať dva alkaloidy, ktorých štruktúra bola určená na základe optickej otáčavosti, MS (EI, ESI), 1H NMR a 13C NMR analýz. Výsledky boli porovnané s dostupnou literatúrou. Prvým izolovaným alkaloidom bol O-acetylpluviin, ktorý patrí do skupiny lykorínových alkaloidov. Inhibičná schopnosť vyjadrená v IC50 bola v porovnaní so štandardmi (galantamín, huperzín A, fyzostigmín, berberín a Z-pro-prolinal) nevýznamná. IC50 AChE: 684 ± 54 µM, IC50 BuChE: 603 ± 49 µM, IC50 POP ˃1000 µM. Na základe výsledkov môžeme tvrdiť, že z hľadiska inhibície cholínesteráz a POP sa jedná o neperspektívnu látku. Druhým izolovaným alkaloidom bola zatiaľ nepopísaná látka so systematickým názvom...
|
|
|
Biologická aktivita obsahových látek rostlin XV. Vliv alkaloidů z Chelidonium majus L. na acetylcholinesterázu
Nagyová, Jana ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Nagyová, J.: Biologická aktivita obsahových látek rostlin XV. Vliv alkaloidů z Chelidonium majus L. na acetylcholinesterázu, Rigorózní práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hr. Králové, 67 stran. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, alkaloidy, Chelidonium majus, acetylcholinesteráza, biologická aktivita. V rámci screeningu rostlin s obsahem alkaloidů, které inhibují aktivitu lidské erytrocytární acetylacholinesterázy byl podroben studiu vlaštovičník větší (Chelidonium majus L., Papaveraceae). K izolaci alkaloidů bylo použito 41,8 kg celé sušené rostliny (nať a kořen); z vyčištěného ethanolového extraktu byly získány směsi pseudokyanidů benzofenantridinových alkaloidů, dále fenolové baze a alkaloidy z chloridů rozpustných i nerozpustných v chloroformu. Zabývala jsem se dělením benzofenanthridinových alkaloidů připravených z pseudokyanidů; z této směsi jsem kombinací sloupcové a tenkovrstvé chromatografie izolovala chelerythrin ve formě chloridu (porovnáním s autentickým standardem a porovnáním fyzikálně-chemických charakteristik izolované látky s údaji v literatuře). Biologická aktivita (inhibice lidské erytrocytární acetylcholinesterázy) byla IC50 5,89.10-6 M. V porovnání s biologickou aktivitou standardních alkaloidních inhibitorů acetylcholinesterázy (galanthaminu a...
|
|
|
Základní fytochemický výzkum některých taxonů oddělení Eumycota s ohledem na studium antioxidační aktivity
Mrvíková, Hana ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
SOUHRN Tato práce si kladla za cíl provést základní fytochemický výzkum vybraných 14 taxonů hub oddělení Eumycota. Pojednávané druhy hub patří celkem do sedmi čeledí: Boletaceae, Hydnaceae, Pleurotaceae, Polyporaceae, Russulaceae, Strophariaceae a Telephoraceae. Nejpočetněji je zde zastoupena čeleď Russulaceae kam náleží osm hub ze sledovaných 14 druhů. Příprava extraktů pro účely v této práci spočívala jen v navážení potřebného množství již hotového lyofilizátu a přidání vhodného rozpouštědla. Práce se zabývala dvěma experimentálními základy. Tenkovrstvou chromatografií se skupinovými reakcemi a stanovením antioxidační aktivity pomocí DPPH testu s použitím metody SIA. Literární rešerže byla zaměřena jak na informace o obsahových látkách sledovaných taxonů tak na údaje o jejich biologické aktivitě a případné toxicitě. Z hlediska antioxidační aktivity se zdá být zajímavá houba Albatrellus ovinus. Ve studii 3- hydroxyneogrifolin a 1-formyl-3-hydroxyneogrifolin, látky obsažené v její plodnici, vykazovaly silnější antioxidační aktivitu než α - tokoferol nebo BHA. 14 Při použití metody SIA pro stanovení antioxidační aktivity DPPH testem byly použity koncentrace sumárních extraktů 0,1 mg/ml, 0,5 mg/ml, 0,25 mg/ml a 0,1 mg/ml. Standardem byl Trolox měřený při koncentracích 0,5 mg/ml, 0,1 mg/ml, 0,05 mg/ml a 0,025...
|
|
|
Vliv elicitace na produkci suspenzní kultury Trifolium pratense L.
Keřková, Adéla ; Kašparová, Marie (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Adéla Keřková Vliv elicitace na produkci suspenzní kultury Trifolium pratense L. Souhrn V práci byl sledován vliv čtyř koncentrací chloridu kademnatého na produkci flavonoidů a isoflavonoidů suspenzní kulturou Trifolium pratense L. (varieta DO-9 a SPRINT). Kultury byly kultivovány při teplotě 25 o C a světelné periodě 16 hodin světlo/ 8 hodin tma na živném médiu podle Gamborga s přídavkem 2 mg.l-1 2,4-dichlorfenoxyoctové kyseliny a 2 mg.l-1 6-benzylaminopurinu. U elicitovaných i kontrolních vzorků bylo provedeno fotometrické stanovení flavonoidů dle Českého lékopisu 2005 a stanovení isoflavonoidů metodou HPLC. Z výsledků vyplývá, že optimální vliv chloridu kademnatého na produkci flavonoidů a isoflavonoidů se projevil u variety DO-9 po 168hodinové aplikaci a u variety SPRINT po 6hodinové aplikaci koncentrace 0,1 µmol.
|
|
|
Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae a jejich biologická aktivita 1.
Klímová, Kamila ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Mišáková K: Alkaloidy rostlin čeledi Amaryllidaceae a jejich biologická aktivita 1. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové, 2014, 63 s. Předmětem diplomové práce byla příprava alkaloidního extraktu z rostliny Nerine bowdenii, za účelem izolace 2 alkaloidů v čisté formě metodou sloupcové chromatografie a následně metodou preparační tenkovrstvé chromatografie. Vzorky byly podrobeny strukturní MS a NMR analýze a testovány na inhibiční aktivitu vůči lidským cholinesterázám (HuAChE a HuBuChE), na antioxidační a cytotoxickou aktivitu. Izolované látky byly identifikovány jako ambellin a undulatin. Přítomnost těchto alkaloidů byla u rostliny Nerine bowdenii popsána již dříve. Při testu na stanovení cholinesterázové inhibiční aktivity ambellinu a undulatinu byly naměřeny tyto hodnoty; pro ambellin: IC50, HuAChE = 169 ± 7 μM a IC50, HuBuChE = 985 ± 25 μM, pro undulatin: IC50, HuAChE = 23,52 ± 1,19 μM a IC50, HuBuChE > 1000 μM. Jako standardy byly použity galanthamin (IC50, HuAChE = 1,71 ± 0,007 μM, IC50, HuBuChE = 42,30± 1,30 μM), huperzin A (IC50, HuAChE = 0,033 ± 0,001 μM, IC50, HuBuChE > 1000 μM) a eserin (IC50, HuAChE = 0,063 ± 0,001 μM, IC50, HuBuChE = 0,130 ± 0,004 μM). Při testu na stanovení...
|
host ::
RSS.