|
|
Targeting cholinergic system in tretment of Alzheimer's disease.
Golianová, Nikoleta ; Jakubík, Jan (vedoucí práce) ; Říčný, Jan (oponent)
Alzheimerova choroba je neurodegeneratívne ochorenie centrálnej nervovej sústavy a veľmi vážny typ demencie. Alzheimera malo 46,8 milióna ľudí na svete v roku 2015, a podľa Medzinárodnej organiácie Alzheimerovej choroby (ADI), sa bude počet pacientov zdvojnásobovať každých 20 rokov a v roku 2050 bude Alzheimerom postihnutých viac než 130 miliónov ľudí. Existujú dva typy: familiárny a sporadický. Familiárny typ má nástup v rannom veku a príčinou sú genetické faktory. Sporadický typ je častejší s neskorším nástupom a hlavnými faktormi sú vek a ε alela apolipoproteínu E. Hlavné príznaky sú poruchy pamäti, po ktorých nasleduje dezorientácia, zmätok, depresia a neskôr i vážne psychické a motorické poruchy. Tieto symptómy sú dôsledok straty neurónov spôsobenej tvorbou β-amyloidných olligomérov a neurofibrilárnych klbiek v centrálnej nervovej sústave (CNS). Zatiaľ neexistujú žiadne efektívne diagnostické metódy, ani terapeutické postupy, ktoré by zastavili degeneráciu mozgu. Existujú lieky, ako napríklad inhibítory acetylcholínesterázy, ktoré boli dokázané, že spomaľujú priebeh Alzheimerovej choroby. Ďalšie cholínergné lieky sú vyvíjané, ale ukázalo sa, že spôsobujú mnoho vedľajších efektov, pretože stimulujú viac typov receptorov. Nasledujúce farmakologické postupy sa zameriavajú na odstránenie plakov a...
|
|
|
The analysis of structural details of the NMDA receptor
Radilová, Kateřina ; Balík, Aleš (vedoucí práce) ; Jakubík, Jan (oponent)
NMDA receptor je nezbytnou součástí exitační transmise v centrální nervové soustavě. Pozměněná funkce NMDA receptorů je spojována s mnoha neurodegenerativními a neuropsychiatrickými chorobami. Vyřešené krystalové struktury NMDA receptorů znamenaly velký posun v pochopení detailů jejich funkce. Bohužel tyto v současnosti dostupné struktury představují jen některé funkční stavy receptoru a také několik strukturních informací stále chybí. Ke kompletnímu porozumění procesu aktivace a deaktivace NMDA receptorů je potřeba doplnit stávající informace dalšími studiemi. Cílem této práce bylo pomocí kombinace různých metod (počítačové modelování, klonování, biochemické metody, exprese a purifikace proteinu a strukturní hmotnostní spektrometrii) získat nová strukturní data, kterými bychom byli schopni doplnit mezery v současnosti dostupných modelech a strukturách receptoru, zejména pak receptoru v různých funkčních stavech. Klíčová slova NMDA receptor, glutamátový receptor, počítačové modelování, struktura, klonování, exprese proteinu
|
|
|
Cholinergic system as pharmacological target in Alzheimer's disease
Golianová, Nikoleta ; Jakubík, Jan (vedoucí práce) ; Telenský, Petr (oponent)
Alzheimerova choroba je neurodegeneratíve ochorenie a veľmi vážny typ demencie. Alzheimer postihuje množstvo starších ľudí a tieto čísla rok čo rok narastajú. Existujú dva typy: familiárny a sporadický. Familiárny forma má nástup v rannom veku a príčinou sú genetické faktory. Sporadická forma je častejšia, s neskorším nástupom a hlavnými faktormi sú vek a ε alela apolipoproteínu E. Prvý symptóm je porucha pamäti, ktorý nasleduje zmätok, dezorientácia, depresia a neskôr vážne psychické a motorické poruchy. Tieto symptómy sú ako dôsledok straty neurónov, senilných plakov a neurofibrilárnych klbiek v centrálnej nervovej sústave (CNS). Zatiaľ neexistujú efektívne diagnostické alebo terapeutické postupy, ktoré by zastavili degeneráciu mozgu. Inhibítory acetylcholínesterázy sú momentálne jediné schválené liečivá, ktoré boli dokázané, že spomaľujú priebeh Alzheimerovej choroby. Ďalšie cholínergné lieky boli vyvíjané, ale ukázalo sa, že spôsobujú mnoho vedľajších efektov. Výskumy sa snažia nájsť taký modulátor, ktorý by sa zameriaval na špecifické receptory v CNS, aby sa takým vedľajším efektom zabránilo. Kľúčové slová: acetylcholín, Azlheimerova choroba, β-amyloid, cholínergný systém, farmakológia, inhibítor cholínesterázy, muskarínové receptrory, nikotínové receptory
|
|
|
Modulace centrální cholinergní neurotransmise.
Valušková, Paulína ; Mysliveček, Jaromír (vedoucí práce) ; Cendelín, Jan (oponent) ; Jakubík, Jan (oponent)
Souhrn Úvod: Centrální cholinergní systém hraje klíčovou roli při kontrole různých mozkových funkcí, jakými jsou paměť, učení, pozornost, motorika a odměňování. Narušená integrita, regulace, nebo kapacita cholinergní signalizace je úzce spjata s kognitivními symptomy mnohých neurodegenerativních a neuropsychiatrických onemocnění, jakými jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, porucha pozornosti s hyperaktivitou (ADHD), deprese, schizofrenie a zvýšená distraktibilita. Hlavním neurotransmiterem cholinergních neuronů je acetylcholin (ACh) a regulace jeho hladiny je základním přístupem farmakoterapie onemocnění spojovaných s centrálním cholinergním systémem. Cílem předložené disertační práce bylo studium změn centrální cholinergní neurotransmise s ohledem na různe aspekty modulace hladiny ACh v mozku jako kontrola jeho uvolňování prostředníctvím M4 muskarinových receptorů (MR), jeho hydrolýza acetylcholinesterázou (AChE) nebo butyrylcholinesterázou (BChE) a následně po jeho hydrolýze v synapsi regulací zpětného vychytávání metabolitu cholinu pomocí vysokoafinitního cholinového transportéru (CHT). Metodika: Použitím telemetrie jsme sledovali pohybovou aktivitu a tělesnou teplotu u myší s vyřazeným genem pro M4 MR (M4KO) a kontrolních wild type (M4WT) myší za bazálních podmínek a po aplikaci centrálně...
|
|
|
Modulační vliv monovalentních iontů na δ-opioidní receptory
Vošahlíková, Miroslava ; Svoboda, Petr (vedoucí práce) ; Jakubík, Jan (oponent) ; Kršiak, Miloslav (oponent)
Přesná role opioidních receptorů v drogové závislosti a také modulační mechanizmus, jakým jsou tyto receptory ovlivňovány monovalentními ionty, nejsou doposud zcela vysvětleny. Naše výsledky podporují názor, že mechanizmus závislosti na morfinu je primárně založen na desenzitizaci odpovědi μ- a δ-opioidních receptorů. Desenzitizace nastává již na úrovni funkční aktivity G proteinů. Dlouhodobé vystavení potkanů působení morfinu mělo za následek zvýšení počtu δ-opioidních receptorů a změnu jejich citlivosti vůči sodným iontům. Analýza inhibičního vlivu různých monovalentních iontů na vazbu agonisty v buněčné linii δ-OR-Gi1α (Cys351 -Ile351 )-HEK293 potvrdila preferenční citlivost δ-opioidního receptoru k sodným iontům. Podařilo se nám rozlišit vysoko- a nízkoafinní vazebná místa pro sodné ionty. Biofyzikální analýza interakce iontů lithia, sodíku, draslíku a cesia s plazmatickou membránou buněk HEK293 pomocí fluorescenčních technik ukázala na význam polárních skupin přítomných v povrchové vrstvě membrány. Právě do této oblasti je možné umístit vazebná místa s nízkou afinitou. Klíčová slova: morfin, frontální mozková kůra, opioidní receptory, G proteiny, monovalentní ionty, plazmatická membrána, metody fluorescenční spektroskopie.
|
|
|
Adaptace centrálního nervového systému na chybění acetylcholinesterázy
Farár, Vladimír ; Mysliveček, Jaromír (vedoucí práce) ; Jakubík, Jan (oponent) ; Cordero-Erausquin, Matilde (oponent)
Acetylcholinesteráza (AChE) účinně hydrolyzuje acetylcholin (Ach). Inhibice AChE je letální a myši s chyběním AChE ve všech tkáních (AChE KO) jsou těžce poškozeny. AChE je v CNS kotvena na prolin bohatou kotvou - proline-rich membrane anchor (PRiMA), zatímco ve svalech je kotvena kolagenem Q (ColQ). V této disertaci popisujeme že u PRiMA KO myší, u nichž je AChE v CNS eliminována, nedochází k významným změnám v chování i přes nadbytek ACh a adaptaci cholinergních receptorů podobnou té, která byla pozorována u AChE KO myší. Kromě toho u myší, u nichž AChE nemůže interagovat s PRiMA i ColQ, je fenotyp podobný jako u AChE KO myší, ale biochemické změny v CNS jsou podobné změnám u PRiMA KO jedinců. PRiMA KO myší se také od ostatních AChE deficitních myší liší svou reakcí na AChE inhibitory. Naše výsledky nasvědčují, že AChE v periferních tkáních je hlavním cílem inhibitorů AChE a že chybění AChE v periferii je hlavní příčinou fenotypických charakteristik AChE KO myší.
|
|
|
Mobilizace vnitrobuněčného vápníku receptory pro acetylcholin muskarinového typu.
Šantrůčková, Eva ; Jakubík, Jan (vedoucí práce) ; Krůšek, Jan (oponent)
Receptory pro acetylcholin muskarinového typu se účastní celé řady fyziologických i patofyziologických pochodů. Muskarinové receptory jsou metabotropní receptory pro acetylcholin. Hlavním cílem této práce bylo porovnat, jak krátkodobé vystavení jednotlivých podtypů muskarinových receptorů xanomelinu dlouhodobě ovlivňuje jejich funkční aktivitu. Muskarinové receptory se dělí do dvou skupin podle preferenčního typu G-proteinu - u lichých podtypů (M1, M3, M5) je to Gq/11, zatímco sudé podtypy (M2, M4) předávají signál do buňky hlavně přes Gi/o G-proteiny. Pro všechna měření byly použity CHO buňky stabilně exprimující jednotlivé podtypy muskarinových receptorů. Aby vápníková odpověď měla u všech podtypů srovnatelné parametry, byly buňky exprimující M2 a M4 receptory přechodně transfekovány cDNA pro lidský G-protein Gq/16. Hladina Ca2+ byla měřena pomocí fluorescenční sondy Fura 2. Vystavení xanomelinu vyvolalo na všech podtypech rychlé uvolnění Ca2+. V souladu s funkční selektivitou xanomelinu byla na M1 a M4 okamžitá vápníková odpověď na xanomelin srovnatelná s odpovědí na plného agonistu karbachol a zvýšená hladina vápníku přetrvávala hodinu po odstranění xanomelinu. Na druhé straně u M5 receptoru mělo krátkodobé vystavení xanomelinu dlouhotrvající antagonizující účinek na aktivaci karbacholem. Objasnění...
|
|
| |
|
|
Proposal of E-commerce
Jakubík, Ján ; Mates, Vojtěch (oponent) ; Luhan, Jan (vedoucí práce)
This master's thesis deals with the proposal of e-commerce BezPopelniku.cz which sells electronic cigarettes and accessories. The theoretical part explains the concepts and methods that are used in other parts of the thesis. The second part is devoted to analyzing the market of electronic cigarettes in the Czech Republic, SWOT analysis, requirements for the technical features of e-commerce platform, analysis of external and internal environment of the company and ultimately a risk analysis of the project. The third part of the thesis defines procedures for the right proposal of e-commerce, contains proposals for specific competitive advantages and describes the use of marketing tools to promote the store.
|
host ::
RSS.