|
|
Vazebné vlastnosti enzymů purinnukleosidfosforylasa a thymidinfosforylasa
Strašilová, Kateřina ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
7. SUMMARY IN CZECH (SOUHRN PRÁCE) Tato práce se zabývá zkoumáním vazebných vlastností a interakcí u enzymů purinnukleosidfosforylasa a thymidinfosforylasa s jejich přirozenými substráty s využitím metody SPR analýzy v přístroji Biacore X. Cílem práce bylo nejprve zjistit, zda a jak mohou být enzymy, připravené technologií rekombinantní DNA, ukotveny na povrch analytického čipu CM 5 s volnými karboxylovými skupinami. Poté bylo testováno, jakým způsobem a za jakých podmínek se již ukotvené enzymy vážou se svými přirozenými substráty. Měnícími se podmínkami byly druh pufru, jeho pH a molalita, teplota v systému a průtoková rychlost celou. Jako přirozené substráty pro enzym PNP byly použity guanosin ve směru rozkladné reakce a guanin s ribóza-1-fosfát nebo s deoxyribóza-1-fosfát ve směru syntézy. Pro enzym TP, který byl studován pouze ve směru fosforolýzy, byly jako přirozené substráty použity thymidin, uridin, a deoxyuridin. V závěru byla opakována interakční analýza k ověření stability čipu pokrytého TP enzymem, který byl uskladněn v lednici po dobu 10 týdnů. Přístroj Biacore X je založen na metodě SPR analýzy. Surface plasmon resonance neboli povrchová plasmonová rezonance je neinvazivní optická metoda sloužící ke sledování interakcí mezi biomolekulami a jejich ligandy. Odpověď nezávisí na povaze...
|
host ::
RSS.