|
|
Adenylát cyklázový toxin bakterie Bordetella pertussis: mechanizmus úniku draselných iontů z makrofágů
Pospíšilová, Eva ; Mašín, Jiří (vedoucí práce)
Adenylát cyklázový toxin-hemolyzin (ACT, CyaA) je klíčovým faktorem virulence bakterie Bordetella pertussis, která způsobuje onemocnění černý kašel. CyaA se váže na fagocytické buňky s receptorem CD11b/CD18 na povrchu a vykazuje dvě různé aktivity. Jedna je spojena s prekurzorem toxinu, který oligomerizuje a tvoří v membráně buňky malé kation selektivní póry. Druhá souvisí s prekurzorem, jenž pravděpodobně funguje jako monomer. Ten translokuje enzymatickou adenylát cyklázovou doménu do cytozolu buňky, při čemž dochází též ke vstupu vánenatých iontů do buňky. Adenylát cyklázová doména váže po translokaci buněčný kalmodulin a katalyzuje rychlou přeměnu buněčného ATP na cAMP. V této práci jsme ukázali, že CyaA způsobuje rovněž únik draselných iontů z CD11b+ buněk. Dále jsme ukázali, že k úniku draselných iontů je nutná vazba CyaA na receptor CD11b/CD18 a permeabilizace membrány póro-tvorným prekurzorem. Divoký typ toxinu způsobuje únik draselných iontů se stejnou kinetikou jako enzymaticky inaktivní verze toxinu, jenž není schopna tvořit cAMP. Únik draselných iontů způsobený CyaA tedy není ovlivněn zvýšenou hladinou cAMP ani cAMP signalizací způsobenou tímto toxinem. Zkrácená verze toxinu (CyaA-AC), s odstraněnou AC doménou, měla i přes svojí normální hemolytickou aktivitu na erytrocytech i na umělých...
|
host ::
RSS.