|
Role kaspázy-3 při apoptóze
Kolářová, Karolína ; Tlapáková, Tereza (vedoucí práce) ; Anděra, Ladislav (oponent)
Kaspázy zajišťují v organismech protizánětlivé, apoptotické, ale také vývojové procesy. širokou působností ve všech buňkách. Pokud však dojde k narušení jejich správné funkce, může docházet k různým patogenním stavům zajímavým tématem pro vědce, neboť jejich přímá spojitost se spouštěním apoptotických procesů je nadějnou možností terapie chorob, které s apoptózou souvisí, jako je například rakovina, neurodegenerativní onemocnění, ale také srdeční ischemie či diabetes. Kaskáda apoptotických procesů je řízena právě zmíněnými kaspázami, které se nachází v kaskádě. Pokud dojde ke spuštění kaskády v buňce, děje se tak kvůli přítomnému signálu "nebezpečí", který však může být velmi různý. Nejznámějšími spouštěči apoptotické kaskády jsou např. aktivovaný receptor Fas a ligand FasL, cytochrom c přítomný v cytoplazmě, nevyrovnané množství IAPs v buňce, poškozená DNA, a mnoho dalších. Po přijmutí signálu, aktivaci iniciační kaspáz 9, které následně aktivují 7 štěpí mnohé substráty, čímž propagují 3 je tedy efektorovým enzymem zodpovědným za samotné provedení regeneraci i diferenciaci buněk. Kaspáza 3 a její inhibitory lze využít k potlačení či léčbě Klíčová slova: generativní onemocnění
|
|
Multi-step synthesis of caspase-3 sensor based on Förster resonance energy transfer
Lišková, Marcela ; Klepárník, Karel ; Pazdera, P. ; Foret, František
Programmed cell death or apoptosis is regulated process of cell suicide. The central role in apoptosis play cysteine proteases called caspases. Caspases recognize tetra-peptide sequences Asp-Glu-Val-Asp (DEVD) on their substrates and hydrolyze peptide bonds after aspartic acid residues. Various techniques for the determination of caspase-3 are commercially available e.g. Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay (ELISA), Western blotting or flow cytometric analysis. The products of the cleavage can be detected by spectrophotometry, fluorimetry, chemiluminescence (CL) or ELISA. In this work, we suggested fluorescent sensor based on Förster Resonance Energy Transfer (FRET) to determine caspase-3 in cell nucleus or cytoplasm by apoptosis for very fast analysis by fluorescence microscopy without sample destroying.
|