|
|
Cytochrom c a jeho úloha při apoptóze
Rajsiglová, Lenka ; Kalous, Martin (vedoucí práce) ; Švadlenka, Jan (oponent)
Energetický metabolismus a zajišťování životaschopnosti buňky jsou procesy přísně kontrolované dráhami, ve kterých mají centrální úlohu cytochromy, především cytochrom c. Nachází se v mezimembránovém prostoru mitochondrií spolu s dalšími molekulami, se kterými spolupracuje na udržování energetického metabolismu. Permeabilizace vnější mitochondriální membrány, prováděná proteiny Bcl-2 rodiny nebo změnami v koncentracích Ca2+ , způsobuje uvolnění cytochromu c do cytosolu. V cytosolu cytochrom c interaguje s dalšími pro-apoptotickými proteiny (Apaf-1, prokaspáza-9) kooperujícími na tvorbě apoptosomu a fosfatidylserinem. Následkem těchto interakcí buňka podstupuje apoptózu. Tato bakalářská práce shrnuje současné znalosti těchto procesů. V první části se zaměřuje na biosyntézu cytochromu c, dále pak na mechanismy jeho uvolňování z mitochondrií a interakce s dalšími proteiny v rámci apoptózy včetně možností regulace těchto procesů.
|
|
|
Stanovení exprese vybraných proteinů apoptotické kaskády v lidském endometriu
Dolgovyazova, Anastassiya ; Švandová, Ivana (vedoucí práce) ; Vondrejs, Vladimír (oponent)
Apoptosa je programovan a bun e cn a smrt, kter a je vyvol ana nap r. z ava zn ymi mutacemi v DNA nebo bun e cn ym stresem. Hraje d ule zitou roli v udr zov an tk a nov e homeost azy pomoc eliminace star ych, nepot rebn ych nebo po skozen ych bun ek. U castn se j velk e mno zstv molekul, z nich z nejd ule zit ej s jsou z astupci protein u Bcl- 2 rodiny a v ykonn e proteiny apoptosy, kaspasy, zodpov edn e za vlastn proveden apoptosy. Selh an regulace apoptosy m u ze zp usobit radu malignit, v cetn e n adorov e transformace. Lidsk e endometrium je speci ck a tk a n, ve kter e se apoptosa vyskytuje cyklicky. P redlo zen a pr ace se zab yv a studiem exprese protein u Bcl-2, Bax, Bad. Bid, pro-kaspasy-3, kaspasy-3 a PARP v norm aln m, atro ck em, hyperplastick em a kancerozn m (stadia I a II dle FIGO) endometriu. V ysledky t eto studie nazna cuj , ze proteiny Bid a Bad mohou b yt jedn emi z potenci aln ch zlomov ych bod u v procesu n adorov e transformace bu nky, na co z poukazuje i opa cn y vzorec jejich exprese v hyperplastick em a kancerozn m endometriu.
|
|
|
The role of fatty acids in apoptosis induction in pancreatic beta cells
Žigová, Ivana ; Libusová, Lenka (oponent) ; Němcová, Vlasta (vedoucí práce)
Diabetes mellitus 2. typu je jednou z civilizačných chorôb. K jej vzniku prispieva i úbytok funkčných β buniek, ku ktorému dochádza predovšetkým v dôsledku dlhodobého pôsobenia vysokých hladín mastných kyselín a glukózy v krvi. Experimenty z niekoľkých posledných rokov ukázali, že apoptóza pankreatických β buniek je indukovaná hlavne pôsobením nasýtených mastných kyselín, zatiaľ čo nenasýtené mastné kyseliny nemajú na β bunky výraznejší cytotoxický efekt a sú dokonca schopné inhibovať proapoptotický efekt nasýtených mastných kyselín. Navzdory intenzívnemu výskumu nie sú mechanizmy, ktorými mastné kyseliny spôsobujú u pankreatických buniek apoptózu na molekulárnej úrovni, zatiaľ uspokojivo vysvetlené. Pochopenie procesov, ktoré vedú k zániku funkčných β buniek, by mohlo umožniť vývoj nových terapeutických postupov pre liečbu diabetu 2. typu, ktoré by boli priamo zamerané na jednu z príčin vzniku tohto ochorenia. Cieľom tejto práce je zhrnúť súčasný stav poznania o mechanizmoch, ktorými mastné kyseliny indukujú a regulujú apoptózu u pankreatických β buniek.
|
|
|
Simple route of caspase-3 FRET sensor synthesis using “click chemistry”
Lišková, Marcela ; Křenková, Jana ; Klepárník, Karel ; Pazdera, P. ; Foret, František
Programmed cell death or apoptosis is regulated process of cell suicide. The central role in apoptosis play cysteine proteases called caspases. Caspases recognize tetra-peptide sequences Asp-Glu-Val-Asp (DEVD) on their substrates and hydrolyze peptide bonds after aspartic acid residues. Various techniques for the determination of caspase-3 are commercially available e.g. Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay (ELISA), Western blotting or flow cytometric analysis. The products of the cleavage can be detected by spectrophotometry, fluorimetry, chemiluminescence (CL) or ELISA. In this work, we suggested fluorescent sensor based on easily prepared Förster Resonance Energy Transfer (FRET). We use very simple chemistry called “click”. This type of chemistry takes advantages of quickness, simplicity and cheapness. “Click chemistry” is based on usage of various functional group and cross-linkers to combine individual molecules together.
|
host ::
RSS.