|
|
Synthesis of fluorinated serine derivatives and study of their effect on skin barrier function
Župina, Richard ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Opálka, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Organické a Bioorganické Chemie Školitel: Prof. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Konzultant: Dr. Georgios Paraskevopoulos, Ph.D. Autor: Richard Župina Název diplomové práce: Syntéza fluorovaných derivátov serínu a štúdium ich vplyvu na bariérovú funkciu kože Ľudská koža slúži ako bariéra proti fyzickému, chemickému a mikrobiálnemu poškodeniu. Ak je kožná bariéra narušená, dochádza k možnosti infiltrácie mikróbov a biochemického poškodenia. Ceramidy slúžia ako základné zložky lipidovej vrstvy pokožky, čím napomáhajú udržiavať integritu kožnej bariéry. Znížený obsah epidermálnych ceramidov súvisí s kožnými ochoreniami, ako je atopická dermatitída a psoriáza. Predchádzajúce zistenia našej výskumnej skupiny preukázali, že molekula analogická k ceramidom nachádzajúcim sa v epiderme, ktorá má podobné sterické a hydrofóbne vlastnosti, by mohla suplementovať nedostatok ceramidov v stratum corneum jednoduchým fyzikálno-chemickým pôsobením. Cieľom tejto štúdie bolo navrhnúť jednoduchú syntézu molekúl analogických ku kožným ceramidom vychádzajúcich zo štruktúry L-serínu s dvoma dlhými alifatickými reťazcami. Prvý reťazec pochádza z kyseliny lignocerovej viazanej amidovou väzbou k zbytku molekuly a druhý reťazec je buď 10 alebo 14 uhlíkový...
|
|
|
Studium topicky podávaných ceramidů
Kulhánková, Roksolana ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Vraníková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Autor: Roksolana Kulhánková Školitel: doc. PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Název diplomové práce: Studium topicky podávaných ceramidů Lidská rohová vrstva kůže (stratum corneum; SC) je nejsvrchnější vrstva epidermis, která je tvořena z několika vrstev korneocytů. Prostor mezi korneocyty je vyplněn bariérovými lipidy, tj. ceramidy, cholesterolem a mastnými kyselinami, které jsou zastoupeny v ekvimolárním poměru. Uspořádání mezibuněčných lipidů má významný vliv na bariérové vlastnosti kůže. Poškozená kožní bariéra (např. u atopické dermatitidy) je spjata s nedostatkem lipidů v lipidové matrici SC, což se projevuje zvýšením trans-epidermální ztráty vody a zhoršením kvality kůže (např. výraznou suchostí, šupinatěním a prasklinkami). Jednou z potenciálních cest v obnovení kožní bariéry je topické podávání bariérových lipidů, zejména ceramidů (Cer). Cílem této práce bylo studovat vliv topicky podávaných Cer (velmi dlouhý Cer AP samostatně nebo v kombinaci s ultradlouhým Cer EOS) na modelově poškozené SC a jejich účinku v procesu obnovy bariérové funkce. Bylo připraveno několik topicky podávaných formulací (krémů), u kterých byly hodnoceny vlivy hydrofilních kapalin, viskozitní přísady a zejména charakter...
|
|
|
Příprava modelu lidské kožní bariéry s využitím depozice tenkých lipidových filmů
Suciu-Šubert, Karina ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Opálka, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Student: Karina Suciu-Šubert Vedoucí: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava modelu lidské kožní bariéry s využitím depozice tenkých lipidových filmů Nejsvrchnější část lidské kůže - stratum corneum, která chrání tělo před vnějším prostředím, je tvořena zrohovatělými buňkami - korneocyty, které jsou obklopené extracelulární matrix vysoce uspořádaných lipidů: ceramidů (Cer), mastných kyselin a cholesterolu. Ochranná bariéra se neustále obnovuje dělením keratinocytů, které se diferencují na korneocyty a nakonec se z povrchu kůže odlučují. Korneocyty mají místo plazmatické membrány korneocytární obálku, která se skládá z bílkovinné části (např. involucrin) a jednomolekulární lipidové části tvořené převážně z ω-hydroxylovaných ceramidů, které jsou k bílkovinné části připojené kovalentními vazbami. Úkolem této diplomové práce byla příprava modelu lidské kožní bariéry s využitím depozice tenkých lipidových filmů. Byly vytvořeny 2 různé směsi lipidů: směs obsahující Cer NS a směs obsahující Cer EOS a NS. Směsi se nanášely na hydrofilní a hydrofobní substrát nastřikováním Linomatem V. Při nastřikování se měnilo množství lipidů, a tím i počet teoretických vrstev na substrátu. Další metodou...
|
|
|
Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum
Soukupová, Romana ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Kováčik, Andrej (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Autor: Romana Soukupová Školitel: Mgr. Petra Pullmanová, Ph.D. Název diplomové práce: Model lidské kožní bariéry s využitím tenkých vrstev stratum corneum Nejsvrchnější vrstva epidermis, stratum corneum, zastává funkci ochranné kožní bariéry. Obsahuje lipidovou matrix, která je tvořena ceramidy, cholesterolem a volnými mastnými kyselinami. Složení a uspořádání těchto lipidů je důležité k zajištění správného fungování kožní bariéry. V lipidové matrix jsou dále rozmístěny bezjaderné korneocyty, které jsou na svém povrchu obklopeny nerozpustnými proteiny s kovalentně navázanými lipidy tvořící korneocytární lipidovou obálku. Cílem této diplomové práce bylo připravit modely lidské kožní bariéry s využitím izolovaného stratum corneum se zachovalou korneocytární lipidovou obálkou a bez zachovalé korneocytární lipidové obálky a následně v těchto modelech sledovat a porovnat uspořádání lipidů. Pro přípravu modelů bylo potřeba ze vzorků kůže získat stratum corneum, ze kterého se následně izolovaly lidské kožní lipidy. Část takto delipidizovaného stratum corneum byla dále saponifikována. Po purifikaci kožních lipidů sloupcovou chromatografií se zjišťovalo jejich složení pomocí vysokoúčinné tenkovrstvé...
|
|
|
Synthesis and evaluation of human 6-hydroxyceramides
Majcher, Adam ; Opálka, Lukáš (vedoucí práce) ; Krátký, Martin (oponent)
Názov Diplomovej práce: Syntéza a hodnotenie ľudských 6-hydroxyceramidov Kandidát: Adam Majcher Školiteľ: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Skin Barrier Research Group, Katedra organické a bioorganické chemie Ceramidy (Cer) sú súčasťou veľkej rodiny sfingolipidov, ktoré sa nachádzajú vo všetkých ľudských bunkách a hrajú významnú rolu v bunkovej signalizácii. Vo vysokých koncentráciách môžeme Cer nájsť v najvrchnejšej vrstve epidermis, ktorá sa nazýva stratum corneum. Cer spolu s voľnými mastnými kyselinami a cholesterolom (v približne ekvimolárnom pomere), vytvárajú intercelulárnu lipidovú matrix. Hlavnou funkciou stratum corneum je bariérová ochrana organizmu, teda udržanie vodnej a elektrolytovej homeostázy a zábrana vstupu škodlivín do tela. Cer sa skladajú zo sfingoídnej báze a acylovej časti odvodenej od vyššej mastnej kyseliny. Cer odvodené od 6-hydroxysfingozínu (H) patria medzi obzvlášť nezvyčajné sfingolipidy. V porovnaní s Cer odvodenými od sfingozínu, Cer odvodené od 6-hydroxysfingozínu (H-Cer) boli nájdené len v epidermis a taktiež nie sú typické pre všetky cicavce. Funkcia a biosyntéza týchto látok doteraz nie je úplne pochopená. Niekoľko dermatologických študií poukázalo na znížené...
|
|
|
Hodnocení přípravy monovrstevných lipidových modelů kožní bariéry
Růžičková, Karolína ; Švecová, Barbora (vedoucí práce) ; Vraníková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Autor: Karolína Růžičková Školitel: PharmDr. Barbora Švecová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Anna Nováčková Název diplomové práce: Hodnocení přípravy monovrstevných lipidových modelů kožní bariéry Kůže, ochranná bariéra lidského těla, je tvořena několika vrstvami. Nejsvrchnější z nich je stratum corneum, součást epidermis, jehož mezibuněčný prostor je složen zejména z ceramidů, cholesterolu a vyšších mastných kyselin. Právě jejich složení a uspořádání jsou zásadní pro bariérovou funkci kůže. Pro studium těchto kožních lipidů na molekulární úrovni jsou využívány různé multivrstevné a monovrstevné modely. Jednou z hodnotících metod jsou Langmuirovy monovrstvy na rozhraní vzduch-kapalina. V této práci jsem se zabývala chováním monovrstevných lipidových modelů při čtyřech různých hodnotách pH kapalné subfáze. Srovnávány byly lipidové směsi izolované z lidské kůže, lipidové směsi připravené z jednotlivých složek a pro rozšíření také směs mastných kyselin. K hodnocení byly použity Langmuirovy izotermy a zobrazovací metoda Brewsterova úhlová mikroskopie při různých rychlostech komprese. Z hodnocení vyplynulo, že pH subfáze nemá na chování lipidů zásadní vliv. Lipidy...
|
|
|
Optimization of the skin barrier model with isolated ceramides of human stratum corneum
Dulanská, Lucia ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálnej chémie Autor: Lucia Dulanská Školiteľ: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Optimalizácia modelu kožnej bariéry s obsahom ceramidov izolovaných z ľudského Stratum corneum Stratum corneum (SC), najvrchnejšia vrstva kože, reguluje transkutánne straty vody a chráni pred vonkajšími podmienkami a škodlivými látkami. Skladá sa z zrohovatelých buniek - korneocytov a extracelulárnej lipidovej matrix, ktorá je zodpovedná za bariérové funkcie. Korneocyty sú pokryté kovalentne viazanými lipidmi a vytvárajú tak korneocytárnu lipidovú obálku (CLE). CLE sa považuje za prepojenie extracelulárnych lipidov s korneocytmi a slúži ako predlohová matrica. Naším cieľom bolo optimalizovať model kožnej bariéry simulujúcim taktiež prítomnosť CLE. Lipidová časť modelu bola pripravená z ekvimolárnej zmesi izolovaných ceramidov ľudskej kože (hCer), cholesterolu a voľných mastných kyselín (FFA, buď protonovaných alebo deuterovaných) s 5 % (m/m) cholesterol-sulfátom. hCer sa extrahovali z izolovaného ľudského SC a purifikovali sa stĺpcovou chromatografiou. Zloženie hCer sa stanovilo vysokoúčinnou tenkovrstvovou chromatografiou. Častice silikagélu s reverznou a normálnou fázou slúžili ako model CLE a negatívna kontrola....
|
|
|
Studium volných sfingoidních bází v kožní bariéře
Jarešová, Zuzana ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Vraníková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Autor: Zuzana Jarešová Školitel: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Název diplomové práce: STUDIUM VOLNÝCH SFINGOIDNÍCH BÁZÍ V KOŽNÍ BARIÉŘE Kožní bariéra, lokalizována ve stratum corneum (SC), se skládá z korneocytů a intercelulární matrix tvořené třemi základními typy lipidových molekul - ceramidy, volnými mastnými kyselinami a cholesterolem, zastoupenými v ekvimolárním poměru. Celkové uspořádání lipidů je organizované a velmi specifické. Ceramidy jsou strukturně tvořeny acylem mastné kyseliny, připojeným na sfingoidní bázi. V malém, ale nezanedbatelném množství lze však v kožní bariéře nalézt i volné sfingoidní báze. Některé studie ukazují, že u poruch kožní bariéry, jako je například atopická dermatitida, dochází k zvýšení jejich obsahu. Ačkoliv se předpokládá, že se volné sfingoidní báze podílejí na vlastnostech kožní bariéry, dodnes není přesně objasněn způsob jejich participace. Nedostatek studií, případně jejich různorodé výsledky, nás přivádí k hlavnímu cíli této práce - objasnit, jakým způsobem volné sfingoidní báze působí na kožní bariéru. V této práci byly připraveny modelové membrány izolací lidského SC ex vivo. Na SC byly aplikováni zástupci volných...
|
|
|
Synthesis and evaluation of human 6-hydroxyceramides
Majcher, Adam ; Opálka, Lukáš (vedoucí práce) ; Krátký, Martin (oponent)
Názov Diplomovej práce: Syntéza a hodnotenie ľudských 6-hydroxyceramidov Kandidát: Adam Majcher Školiteľ: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Skin Barrier Research Group, Katedra organické a bioorganické chemie Ceramidy (Cer) sú súčasťou veľkej rodiny sfingolipidov, ktoré sa nachádzajú vo všetkých ľudských bunkách a hrajú významnú rolu v bunkovej signalizácii. Vo vysokých koncentráciách môžeme Cer nájsť v najvrchnejšej vrstve epidermis, ktorá sa nazýva stratum corneum. Cer spolu s voľnými mastnými kyselinami a cholesterolom (v približne ekvimolárnom pomere), vytvárajú intercelulárnu lipidovú matrix. Hlavnou funkciou stratum corneum je bariérová ochrana organizmu, teda udržanie vodnej a elektrolytovej homeostázy a zábrana vstupu škodlivín do tela. Cer sa skladajú zo sfingoídnej báze a acylovej časti odvodenej od vyššej mastnej kyseliny. Cer odvodené od 6-hydroxysfingozínu (H) patria medzi obzvlášť nezvyčajné sfingolipidy. V porovnaní s Cer odvodenými od sfingozínu, Cer odvodené od 6-hydroxysfingozínu (H-Cer) boli nájdené len v epidermis a taktiež nie sú typické pre všetky cicavce. Funkcia a biosyntéza týchto látok doteraz nie je úplne pochopená. Niekoľko dermatologických študií poukázalo na znížené...
|
|
|
Study of sphingosine, dihydrosphingosine and phytosphingosine in skin barrier models
Kubátová, Denisa ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Svačinová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technológie Autor: Denisa Kubátová Školiteľ: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Názov diplomovej práce: Hodnotenie sfingozínu, dihydrosfingozínu a fytosfingozínu v modeloch kožnej bariéry Stratum corneum (SC), alebo rohová vrstva kože, ktorá sa nachádza v najvrchnejšej časti epidermis, predstavuje kožnú bariéru organizmu. SC je zložené z kornecoytov a intercelulárnej lipidovej matrix, ktorú tvoria najmä ceramidy (Cer), voľné mastné kyseliny (angl. free fatty acids; FFA) a cholesterol (Chol) zastúpené v ekvimolárnom pomere. Látky zo skupiny sfingolipidov - Cer, sú acylované sfingoidné bázy (napríklad sfingozín (S), dihydrosfingozín (dS) či fytosfingozín (P)), mastnou kyselinou (napríklad kyselinou lignocerovou (LIG)). V lipidovej matrix sa nachádzajú aj metabolické produkty Cer (voľné sfingoidné bázy), avšak ich význam na bariérové funkcie SC nie sú úplne známe. Niektoré štúdie ukazujú, že nielen jednotlivé Cer s rôznymi sfingoidnými bázami, ale aj pravdepodobne zvýšená prítomnosť voľných báz, môžu viesť k zmene permeability kožnej bariéry. Cieľom tejto práce bolo hodnotenie vplyvu voľných sfingoidných báz na permeabilitu modelových membrán SC. Bolo pripravených dohromady deväť typov...
|
host ::
RSS.