|
| |
|
|
Sledování exprese vybraných markerů kaskády pro transformující růstový faktor u myšího modelu aterosklerózy
Pagurko, Lukáš ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Lukáš Pagurko Sledování exprese vybraných markerů kaskády pro transformující růstový faktor u myšího modelu aterosklerózy. Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Sledovali jsme expresi endoteliální NO syntázy (eNOS) v aterosklerotických plátech myší za použití imunohistochemických metod. Cílem bylo prokázat jestli atorvastatin ovlivňuje expresi eNOS bez hypolipidemických účinků. Metody: Použili jsme samice kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E (apoE) a LDL-receptoru (LDLr) ve věku 16 týdnů. Byla provedena biochemická analýza vzorků krve a imunohistochemická analýza segmentů tkáně tvořených aortou a horní polovinou srdce. Pro detekci exprese eNOS byla použita metodika EnVision s detekcí pomocí DAB. Výsledky: V biochemické analýze jsme zjistili, že osmitýdenní podávání atorvastatinu statisticky významně zvýšilo hladiny celkového cholesterolu. U všech řezů v kontrolní i atorvastatinové skupině byla pozorována přítomnost aterosklerotických lézí, přičemž u řady z nich byla již nalezena ateromová nekrotická jádra. Podávání atorvastatinu vedlo k signifikantnímu poklesu velikosti aterosklerotických plátů ve srovnání s neléčenou skupinou. Podávání atorvastatinu dále vedlo k výraznému navýšení exprese eNOS zejména na povrchu...
|
|
|
Sledování změn exprese VCAM-1 v experimentální aterogenezi
Mertlíková, Veronika ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Veronika Mertlíková Školitel: Doc. PharmDr. Petr Nachtigal Ph.D. Název diplomové práce: Sledování změn exprese VCAM-1 v experimentální aterogenezi. Cílem práce bylo popsat expresi VCAM-1 ve stěně cévy u normocholesterolemických myší kmene C57BL/6J, kterým byla podávána standardní laboratorní dieta a u hypercholesterolemických apoE-deficientních myší. Jako experimentální model jsme použili samce normocholesterolemického myšího kmene C57BL/6J a apoE-deficientní myši ve věku 6 týdnů. Samci myšího kmene C57BL/6J byli krmeni standardní laboratorní dietou a apoE-deficientní myši cholesterolovou dietou po dobu 8 týdnů. Poté byla provedena biochemická analýza vzorků krve a imunohistochemická analýza odebraných segmentů aortálního sinu a aortálního oblouku. V porovnání s kontrolním kmenem myší C57BL/6J byla u apoE-deficientních myší nalezena vysoká hladina cholesterolu v krvi. Aterosklerotické pláty vyvíjí pouze tyto hypercholesterolemické myši. Pomocí imunohistochemických metod jsme sledovali expresi VCAM-1 v aortě u C57BL/6J myší, kde nebyly přítomny aterosklerotické pláty, dále u apoE-deficientních myší v místech bez plátů a v oblasti plátů. V oblastech bez lézí byla exprese VCAM-1 detekována...
|
|
|
Změna exprese transportních proteinů během intrahepatální cholestázy u potkanů
Kolouch, Jan ; Doleželová, Eva (vedoucí práce) ; Cermanová, Jolana (oponent)
Jan Kolouch Změna exprese transportních proteinů během intrahepatální cholestázy u potkanů Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem diplomové práce bylo ověření cholestatického poškození jater prostřednictvím biochemické analýzy plazmy a analýzy exprese hlavních jaterních transportních proteinů (Ntcp, Oatp1a4, Bsep, Mrp2, Mrp3, Mrp4) pro uptake a eflux látek na úrovni mRNA. Metody: Potkani kmene Wistar (n = 6, v každé skupině; 280 - 320 g), byli rozděleni do dvou skupin: kontrolní skupina (LPS-K) a skupina LPS (lipopolysacharid podaný jednorázově i.p., 4 mg/kg). Vzorky krve a jater byly odebrány 12 hodin po aplikaci LPS. Biochemická analýza plazmy byla provedena pomocí Cobas Integra ® 800 a GC/MS. Změny exprese transportních proteinů na úrovni mRNA byly hodnoceny qRT-PCR. Výsledky: V porovnání s kontrolou byla ve skupině LPS pozorována významně zvýšená plazmatická koncentrace žlučových kyselin a zvýšená aktivita enzymů ALP a GMT. U žlučových kyselin došlo ke zvýšení koncentrace na 818 %, aktivita ALP byla zvýšená na 311 % a aktivita GMT na 2167 %. Intrahepatální cholestáza vedla k významnému poklesu exprese jaterních transportních proteinů na úrovni mRNA - Ntcp na 4,6 %, Oatp1a4 na 2,2 %, Mrp2 na 1,7 % a Bsep na 25 %. Závěr: Z...
|
|
|
Sledování vlivu exprese receptorů pro transformující růstový faktor během aterogeneze u myšího modelu aterosklerózy
Vybulková, Lucie ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Lucie Vybulková Sledování vlivu exprese receptorů pro transformující růstový faktor během aterogeneze u myšího modelu aterosklerózy Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem práce bylo zavedení metodiky pro detekci TGF-βRI, subtypu ALK-5, a sledování jeho exprese v kořenu aorty u apoE/LDLr-deficientních myší. Metody: S využitím samic kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E a LDL- receptoru byla provedena biochemická analýza vzorků krve, histologické barvení olejovou červení k detekci lipidů ve tkáních a imunohistochemická analýza segmentů tkáně pocházejících z aorty a horní poloviny srdce. Pro detekci exprese ALK-5 byla použita metodika EnVision s detekcí pomocí DAB. Výsledky: Pomocí biochemické analýzy jsme potvrdili předpokládaný nárůst hladin cholesterolu u myší krmených cholesterolovou dietou ve srovnání se skupinou myší na standardní dietě. Při histologickém barvení olejovou červení jsme detekovali vyšší tvorbu aterosklerotických lézí u myší s cholesterolovou stravou. Imunohistochemickou analýzou exprese ALK-5 jsme prokázali vysokou expresi ALK-5 v tunica media a v aterosklerotických plátech bez výrazného rozdílu u obou skupin myší. Závěr: Výsledky ukázaly, že exprese ALK-5 není ovlivněna hladinami cholesterolu...
|
|
|
Imunohistochemická analýza exprese fosforylované formy Smad2 po podávání atorvastatinu u experimentální aterogeneze
Vybulková, Lucie ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Biologických a lékařských věd Kandidát Mgr.Lucie Vybulková Konzultant Doc.PharmDr.Petr Nachtigal, PhD Název rigorózní práce Imunohistochemická analýza exprese fosforylované formy Smad2 po podávání atorvastatinu u experimentální aterogeneze Cíl práce: Cílem této rigorózní práce bylo popsat vliv atorvastatinu na expresi fosforylované formy Smad2 v aterosklerotických plátech ApoE/LDLr-deficitních myší pomocí imunohistochemických metod. Dále byl sledován vliv atorvastatinu na spektrum lipidů a velikost aterosklerotických plátů. Metody: V experimentu byly použity samice kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E a LDL- receptoru. Byla u nich provedena biochemická analýza vzorků krve, histologické barvení olejovou červení k detekci lipidů ve tkáních, kvantitativní analýza velikosti lézí a imunohistochemická analýza vzorků aorty se semilunárními chlopněmi pro detekci exprese Smad2 s využitím metodiky Avidin-Biotin a detekcí pomocí DAB. Výsledky: Při biochemické analýze jsme potvrdili nárůst hladin celkového cholesterolu a VLDL po podávání atorvastatinu. Kvantifikací aterosklerotických lézí byla zjištěna menší velikost lézí u ATV skupiny myší. Imunohistochemickou analýzou jsme prokázali expresi fosforylované formy Smad2 v...
|
|
|
Roup dětský
Exnerová, Andrea ; Vejsová, Marcela (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Andrea Exnerová Roup dětský Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Zdravotní laborant Cíl: Cílem této práce je vytvořit přehled dosavadních poznatků o roupu dětském a provést dotazníkové šetření mezi rodiči, jehož záměrem je zjistit informace o průběhu, diagnostice a léčbě této nákazy a o informovanosti veřejnosti o tomto onemocnění. Metody: Dotazníkové šetření mezi rodiči, jejichž děti byly někdy nakaženy roupem dětským. Výsledky: Roupová nákaza je nejčastější u dětí ve věku 4-7 let. U poloviny dětí, které navštívily pediatra, bylo provedeno vyšetření. V téměř 25 % byl proveden odběr stolice. Děti byly léčeny nejčastěji předepsanými léky, k domácí samoléčbě se rodiče uchylují jen zřídka. V jedné třetině případů byli nakaženi i ostatní členové domácnosti. V polovině případů byla preventivně přeléčena celá rodina. Nejčastějším příznakem je svědění konečníku (83 %). Komplikace jsou výjimečné. 60 % respondentů si chybně myslí, že se lze roupy nakazit od zvířat. Respondenti nákazu nejčastěji označovali jako nemoc špinavých rukou. Závěry: Roupová nákaza se vyskytuje nejčastěji ve věku 4-7 let, kdy děti začínají navštěvovat kolektivní zařízení. U poloviny případů byla diagnóza určena na základě klinického obrazu či anamnézy od rodičů. Zarážející je odběr...
|
|
|
Rozvoj endotelové dysfunkce v srdci u myšího modelu aterosklerózy.
Filipová, Petra ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Rozvoj endotelové dysfunkce v srdci u myšího modelu aterosklerózy Autor diplomové práce: Petra Filipová Vedoucí práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Úvod a cíl práce: Ateroskleróza je onemocnění, při kterém dochází k tvorbě aterosklerotických plátů ve stěně cév. Představuje vedoucí příčinu srdečního selhání a cévní mozkové příhody. Za jednu z hlavních příčin se považuje endotelová dysfunkce, která byla popsána již u velkého počtu zvířecích modelů. V naší práci jsme se zaměřili na detekci markerů endotelové dysfunkce v srdci ApoE/LDLR double knock-out myšího modelu. Metody: Sledovali jsme změny v expresi eNOS, p-eNOS a HO-1 u dvouměsíčních a osmiměsíčních ApoE/LDLR double knock-out myší, které byly krmeny standardní laboratorní dietou. K semikvantitativnímu hodnocení sledovaných markerů jsme použili Western blot analýzu homogenátu levé srdeční komory. Výsledky a závěr: Naše výsledky ukazují, že nedochází ke změně exprese eNOS, p-eNOS a HO- 1 v levé komoře u studovaného myšího modelu aterosklerózy ve vztahu k věku, což může znamenat, že nedochází k rozvoji endotelové dysfunkce v koronárním řečišti těchto myší. Nicméně, pro další studie by bylo vhodné porovnat tyto skupiny s kontrolními wild-type...
|
|
|
Spirulina platensis a její vliv na aterogenezi u myšího modelu aterosklerozy
Žáková, Marie ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
Marie Žáková Spirulina platensis a její vliv na aterogenezi u myšího modelu aterosklerózy Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Sledovali jsme vybrané aterosklerotické a zánětlivé markery u apoE-deficientních myší krmených Spirulinou platensis k ověření jejích hypolipidemických a protizánětlivých účinků. Metody: Použily jsme samce myši kmene C57BL/6J s deficitem apolipoproteinu E (apoE-/-) ve věku 3 měsíců. Zvířata byla rozdělena do 2 skupin (kontrolní a zkoušené). Obě skupiny byly krmeny po dobu 8 týdnů cholesterolovou dietou. Zkoušené skupině bylo přidáváno 20 mg/kg/den Spiruliny platensis. Provedená biochemická analýza sloužila k zjištění lipidového spektra v krvi. K vizualizaci velikosti aterosklerotické léze a detekci lipidů bylo provedeno histologické barvení olejovou červení. Imunohistochemická analýza sloužila k průkazu množství exprese VCAM-1. Výsledky: Biochemická analýza neprokázala kromě snížení LDL cholesterolu významný pokles celkového cholesterolu. U obou skupin myší byla histologickým barvením olejovou červení ilustrována přítomnost aterosklerotických lézí s kumulací lipidů, výsledky se mezi skupinami nelišily. Imunohistochemickou analýzou byl ve skupině, které byla podávána Spirulina, prokázán oproti kontrolní skupině...
|
|
|
Vliv C-reaktivního proteinu na endotel v aortě spontánně hypertenzních potkanů
Kosán, Aleš ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
VLIV C-REAKTIVNÍHO PROTEINU NA ENDOTEL V AORTĚ SPONTÁNNĚ HYPERTENZNÍCH POTKANŮ Diplomová práce Autor: Aleš Kosán Studijní obor: Farmacie Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Endotelová dysfunkce a chronický zánět jsou faktory hrající roli v patogenezi metabolického syndromu. Tato práce je koncipována jako pilotní studie, jejímž cílem je navrhnout další směr zkoumání v oblasti vlivu C-reaktivního proteinu na endotel. Pomocí metody Western blot byla sledována exprese čtyř látek, v minulosti spojených se vznikem endotelové dysfunkce: endotelinu-1, hemoxygenázy-1, endoglinu a fosforylované syntázy oxidu dusnatého. Měření bylo provedeno na vzorcích z homogenizovaných potkaních aort transgenních spontánně hypertenzních potkanů exprimujících lidský C reaktivní protein. Jako kontrolní skupina byl využit kmen standardních spontánně hypertenzních potkanů. Detekce byla provedena pomocí chemiluminiscenčního substrátu na RTG filmy a získaná data byla semikvantitativně vyhodnocena denzitometrickou metodou. U endoglinu jsme zaznamenali zvýšenou expresi v hodnotě 186,3 % oproti kontrolní skupině. Exprese fosforylované formy endotelové syntázy představovala 325,6 % v porovnání s kontrolní skupinou. U hemoxygenázy-1 byl nárůst exprese minimální (109,0 %) a exprese endotelinu-1 byla...
|
host ::
RSS.