|
|
CFTR-mRNA: alternativa pro genovou terapii cystické fibrózy
Pecková, Kateřina ; Bořek Dohalská, Lucie (vedoucí práce) ; Nosková, Libuše (oponent)
Cystická fibróza je onemocnění, u kterého dochází k mutaci CFTR genu kódujícího stejnojmenný protein, jehož hlavní funkcí je přenos chloridových iontů. K napravení tohoto defektu byla v rámci diplomové práce vybrána genová terapie. Byly syntetizovány dva typy stabilní mRNA obsahující minimálně 200 adeninů na 3' konci, 25 % pseudouridinu, 25 % 5-methylcytidinu a na 5' konci buďto klasickou čepičku (enzymová mRNA) nebo analog čepičky 3'-O-Me-m7G(5')ppp(5')G (tzv. ARCA mRNA). Byly použity buněčné linie od zdravých jedinců (NuLi-1) a pacientů trpících cystickou fibrózou s mutací F508del (CuFi-1). Vizualizace CFTR proteinu pomocí optimalizované metody nepřímé imunofluorescence potvrdila zvýšení exprese CFTR proteinu u obou buněčných linií CuFi-1 a NuLi-1, a to jak při použití ARCA mRNA tak při použití enzymové mRNA. Funkčnost CFTR proteinu byla stanovena prostřednictvím fluorescenčního barviva N-(ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxychinolinu (MQAE), kterým byly buněčné linie předem obarveny a které je specificky zhášeno halogenovými ionty. Transport iontů skrze tento kanál byl ověřen použitím CFTR(inh)-172, který specificky tento kanál inhibuje svou vazbou na R doménu. Po 24h transfekci ARCA mRNA buněčné linie CuFi-1 došlo k obnově jeho funkce. V neposlední řadě byla studována adheze bakterií Pseudomonas...
|
|
|
Vývoj modelového systému pro studium transportu chloridových iontů u buněk plicního epitelu pacientů trpících cystickou fibrosou
Pecková, Kateřina ; Bořek Dohalská, Lucie (vedoucí práce) ; Kubíčková, Božena (oponent)
U onemocnění zvaného cystická fibróza dochází k narušení fungování proteinu CFTR, jehož hlavní funkcí je transport chloridových iontů z buňky. Stanovení schopnosti CFTR kanálu transportovat chloridové ionty je považováno za jediný způsob, jak stanovit jeho aktivitu. V této práci byl transport chloridových iontů prostřednictvím CFTR kanálu studován u buněčných linií plicního epitelu zdravých pacientů (NuLi-1) a pacientů trpících cystickou fibrózou (CuFi-1). Pro studium byla vybrána a optimalizována metoda fluorescenčního značení za použití fluorescenčního barviva N- (ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxychinolinu (MQAE), které poskytuje fluorescenci v modré oblasti spektra a je nejcitlivější fluorescenční sloučeninou vůči chloridovým iontům, která byla doposud navržena. V rámci vývoje optimální metody byly pomocí fluorescenčního značení testovány dva způsoby měření transportu chloridových iontů a to stanovení jejich množství uvolněných buňkou do pufru obsahujícího MQAE a stanovení jejich množství v buňce přímo obarvené MQAE. Druhé stanovení se ukázalo jako vhodnější a reprodukovatelnější metoda pro prokázání transportu chloridových iontů. Zároveň byl sledován vliv sloučeniny forskolinu, která zvyšuje intracelulární koncentraci cAMP a tím urychluje otevírání CFTR kanálu, díky čemuž může být ověřeno, zda...
|
|
|
Obecní dům
Pecková, Kateřina ; Šárka, Justová (oponent) ; Balíková, Jitka (vedoucí práce)
Cílem diplomové práce je návrh Obecního domu v obci Habrovany u Vyškova. Budova je navržena v mírném svahu, půdorys je nepravidelný, výška objektu v jednotlivých částech rozdílná. Konstrukční system budovy je stěnový podélný. Budova obsahuje tři provozní soubory, a to obecní úřad, hasičskou zbrojnici a kulturně společenský sál. Obecní úřad je dvoupodlažní, ostatní prostory jsou jednopodlažní. Požární zbrojnice má garáž pro dva automobily.
|
|
|
Diagnostika a endovaskulární léčba okluzívního onemocnění pánevních a stehenních tepen
PĚČKOVÁ, Kristýna
Okluzívní onemocnění v oblasti pánevních a stehenních tepen může pro pacienta znamenat velmi závažnou zdravotní komplikaci. Proto je důležité znát veškerá rizika, která by těmto onemocněním mohla předcházet, znát i onemocnění samotná a v neposlední řadě je velmi důležitou kapitolou i diagnostika a v poslední fázi i samotná léčba. Proto jsem si toto téma vybrala, za účelem poskytnout případnému čtenáři veškeré výše uvedené informace o této problematice. K diagnostice okluzívního onemocnění jsou používány zobrazovací metody. K prostorovému zobrazení byly vyvinuty metody ultrasonografie ( UZ ), spirální CT angiografie ( CTA ), angiografie magnetickou rezonancí ( MRA ) a modifikace klasické angiografie {--} digitální subtrakční angiografie ( DSA ). UZ patří mezi základní vyšetřovací metodu svou neinvazivností. Spirální CTA je metoda, která je založena na dvou a třírozměrném zobrazení za použití speciálních programů. Zobrazení magnetickou rezonancí je neinvazivní vyšetřovací metoda a je odvozena od klasické nukleární MR. MRA je jednou z možných vyšetřovacích technik, které podává komplexní informace o vztahu okolních tkání k cévám a hemodynamice krevního toku. DSA umožňuje sledování průtoku cévami a pomocí digitalizace obrazu i jeho grafické zpracování a záznam rozměrů. Léčba okluzivního onemocnění oblasti pánevních a stehenních tepen zahrnuje perkutánní transluminální angioplastika ( PTA ) a implantace stentů.
|
|
|
Elektrochemická detekce stopových množství nitrovaných výbušnin
Barek, J. ; Fischer, J. ; Vyskočil, V. ; Pecková, K. ; Navrátil, Tomáš ; Josypčuk, Bohdan
Nitrované organické sloučeniny patří k nejčastěji užívaným výbušninám. Detekce nízkých koncentrací těchto sloučenin je v současné době velice atraktivní. Díky snadné redukovatelnosti nitroskupiny se voltametrie jeví jako velmi vhodná metoda pro tyto účely. Pro tato stanovení byly užívány následující elektrody: visicí rtuťová kapková elektroda, meniskem modifikovaná stříbrná pevná amalgámová elektroda, miniaturizovaná pastová stříbrná amalgámová elektroda a pastová elektroda na bázi prášku stříbrného pevného amalgámu a vhodné organické pastovací kapaliny.
|
|
| |
|
| |
|
|
Kompozitní pevné amalgámové elektrody
Lukina, A. ; Josypčuk, Bohdan ; Navrátil, Tomáš ; Pecková, K. ; Barek, J.
V příspěvku je uvedena výroba a první výsledky dosažené při užití kompozitních tuhých amalgámových elektrod (AgSA-CE). Leštěná, filmová stejně jako rtuťovým meniskem modifikované modifikace této elektrody byly studovány při stanovení p-nitrofenolu, olova, kadmia, jodičnanů, adeninu, kyseliny askorbové a jiných sloučenin.
|
|
|
Stanovení herbicidu dinosebu na amalgamových a uhlíkových elektrodách
Fischer, J. ; Barek, J. ; Pecková, K. ; Zima, J. ; Kücükkolbasi, S. ; Ersöz, M. ; Kara, H. ; Josypčuk, Bohdan ; Navrátil, Tomáš
Dinoseb, systematicky 2-(1-methylpropyl)-4,6-dinitro-fenol, je fenolický, běžně používaný herbicid a insekticid. Dinoseb má ve své struktuře dvě snadno redukovatelné nitroskupiny na aromatickém jádře a také hydroxy skupinu, kterou je možné elektrochemicky oxidovat. Pro stanovení ve vodě byla použita diferenční pulzní voltammetry. Redukce nitroskupin byla také využita k voltametrickému stanovení na visící rtuťové kapkové elektrodě (HMDE), rtuťové filmové elektrodě (MFE) a modifikované uhlíkové pastové elektrodě (MCPE), uhlíková pastová elektroda (CPE) a meniskem modifikované stříbrná amalgámová elektroda (m-AgSAE).
|
|
| |
host ::
RSS.